微生物學化膿性細菌課件

1、1,第三篇 微生物學各論,三性兩法生物學性狀 微生物學檢查法致病性免疫性 防治法,,,2,第十四章 化膿性細菌,,3,化膿性細菌：一類能夠感染人體并引起化膿性炎癥的細菌。常引起創(chuàng)傷感染和醫(yī)院內感染。根據革蘭染色性的不同可分成G+菌：葡萄球菌、鏈球菌、肺炎鏈球菌等G-菌：腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、銅綠假單胞菌等。,,4,第一節(jié) 葡萄球菌屬 (Staphylo

2、coccus),對人類致病的主要是金黃色葡萄球菌（S.aureus）。,5,分布廣泛，是最常見的化膿性球菌醫(yī)院內交叉感染的重要傳染源所致疾病化膿性炎癥食物中毒燙傷樣皮膚綜合征毒性休克綜合征耐藥率高,6,1、形態(tài)與染色球形或橢圓形，平均直徑1µm，典型排列呈葡萄串狀；無鞭毛，無芽胞，體外培養(yǎng) 時一般不形成莢膜；革蘭染色陽性。衰老、死亡或被中性粒細胞 吞噬后易G－。,一、生物學性狀,7,膿標本革蘭

3、染色鏡檢,8,2、培養(yǎng)特性,營養(yǎng)要求不高，耐鹽，最適生長溫度為37℃，最適pH為7.4。在普通瓊脂平板上孵育24~48h后，形成S型（光滑）菌落?？僧a生脂溶性色素，菌落呈現(xiàn)金黃色、白色、檸檬色不同的顏色。血瓊脂平板上，致病性葡萄球菌形成明顯的全透明溶血環(huán)（?溶血）。,9,三種葡萄球菌培養(yǎng),瓊脂培養(yǎng)基,金黃色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,腐生葡萄球菌,金黃色色素,白色色素,檸檬或白色色素,致病力強,條件致病菌,一般不致病,,10,金黃色葡

4、萄球菌—金黃色菌落,11,金黃色葡萄球菌血平板,,12,3、生化反應,觸酶陽性；可與鏈球菌區(qū)別多數(shù)菌株能分解葡萄糖、麥芽糖和蔗糖；致病株能分解甘露醇。,13,4、抗 原 結 構,14,葡萄球菌A蛋白 (staphylococcus A protein ，SPA) 是葡萄球菌細胞壁的一種表面蛋白，可與人類免疫球蛋白IgG的Fc段非特異性結合，而IgG分子的Fab段仍能同相應抗原分子特異性結合，介導完成協(xié)同凝集

5、試驗。,15,意義：,I. 含SPA的葡萄球菌可作為載體，結合特異性抗體后，開展簡易、快速的協(xié)同凝集試驗，檢測多種微生物抗原。,16,,II. SPA 與IgG結合后的復合物具有抗吞噬、促細胞分裂、引起超敏反應、損傷血小板等多種生物學活性。,17,莢膜：體內的大多數(shù)金黃色葡萄球菌有莢膜，有粘附作用，與細菌侵襲力有關。多糖抗原：具有群特異性，存在于細胞壁。,18,5、抵抗力,葡萄球菌在無芽胞菌中抵抗力最強。60℃ 1h或80℃

6、30分鐘才被殺死。對堿性染料敏感，龍膽紫可抑制其生長。對許多抗生素敏感，但易產生耐藥性。近年來出現(xiàn)的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）已成為醫(yī)院感染最常見的致病菌。,19,根據色素與生化反應根據噬菌體：分為5個噬菌體群和26個噬菌體型。,,金黃色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,腐生葡萄球菌,6、分類,20,二、致病性與免疫性,,致病物質所致疾病,21,（一）致病物質,毒素 細胞毒素（?、?、?、?、殺白細胞素）

7、、表皮剝脫毒素、毒性休克綜合征毒素-1、腸毒素等。酶 凝固酶、纖維蛋白溶酶、耐熱核酸酶、透明質酸酶、脂酶等。其他 粘附素、莢膜、胞壁肽聚糖等。,22,凝固酶（coagulase）,能使含有枸櫞酸鈉或肝素抗凝劑的人或兔血漿發(fā)生凝固的酶類物質。作用：抗吞噬作用（纖維蛋白沉積細菌表面）保護病菌不受血清中殺菌物質的破壞使感染易于局限化和形成血栓意義：鑒別葡萄球菌有無致病性的重要指標。,23,葡萄球

8、菌溶素（膜損傷毒素）：損傷細胞膜的毒素，主要是?溶素。?溶素對多種哺乳動物RBC有溶血作用。對白細胞、血小板、肝細胞、成纖維細胞、血管平滑肌細胞等均有損傷作用。?溶素是一種外毒素，可制成類毒素。殺白細胞素：攻擊中性粒細胞和巨噬細胞，能抗吞噬和增強病菌的侵襲力。,24,腸毒素（enterotoxin）,約1/3臨床分離的金黃色葡萄球菌可產生腸毒素。耐熱的外毒素引起急性胃腸炎即食物中毒。作用機制：到達中樞神經系統(tǒng)后刺激嘔吐中樞

9、而導致以嘔吐為主要癥狀的食物中毒。,25,表皮剝脫毒素（exfoliatin）,蛋白質外毒素，使表皮和真皮脫離?？梢馉C傷樣皮膚綜合征（staphylococcal scalded skin syndrome, SSSS），又稱剝脫性皮炎，多見于新生兒、幼兒和免疫功能低下的成人。,26,毒性休克綜合征毒素-1（ TSST-1）,TSST-1可引起機體發(fā)熱，增加對毒素的敏感性；可引起機體多個器官系統(tǒng)的功能紊亂或毒性休克綜合征（TSS

10、）。,27,其他,耐熱核酸酶（heat-stable nuclease）致病性葡萄球菌能產生該酶。耐熱，經100℃15min或60℃ 2h不被破壞；能較強的降解DNA和RNA。 耐熱核酸酶可作為測定葡萄球菌有無致病性的重要指標之一。,28,（二）所致疾病,1、化膿性感染: 化膿性炎癥大多由致病性較強的金葡菌引起。（1）局部感染：癤、癰、毛囊炎、甲溝炎、蜂窩組織炎、膿胸、傷口化膿（2）全身感染：敗血癥、膿毒血癥 特點：膿液稠厚

11、，不易擴散,29,化膿性感染,癤,癰,:,30,化膿性感染,31,2、毒素性疾病食物中毒 由葡萄球菌腸毒素引起。為毒素性食物中毒，1～6h出現(xiàn)癥狀，以嘔吐為主要癥狀，大多于1～2d內恢復。,32,,假膜性腸炎 是一種菌群失調性腸炎。主要表現(xiàn)為腹瀉。病理特點是腸粘膜被一層炎性假膜覆蓋?，F(xiàn)認為主要由艱難梭菌所致，金黃色葡萄球菌僅為伴隨菌。,33,,燙傷樣皮膚綜合征 由表皮剝脫毒素引起，導致

12、表皮上層脫落。,34,,,,毒性休克綜合征 由毒性休克綜合征毒素-1引起，主要表現(xiàn)為急性高熱、低血壓、腥紅熱樣皮疹伴脫屑。嚴重時出現(xiàn)休克。,35,（三）免疫性,人類對葡萄球菌有一定的天然免疫力?；疾『螅塬@得一定的免疫力，但不強。,36,幼貓試驗,三、微生物學檢查法,標本,膿汁、血液、腦脊液、剩余食物、嘔吐物等,分離培養(yǎng)與鑒定,觸酶血漿凝固酶發(fā)酵甘露醇耐熱核酸酶,直接涂片鏡檢,,革蘭陽性葡萄球菌,,,生長現(xiàn)象,,色素

13、、溶血等,,生化反應,,毒素檢查,,,,37,致病性葡萄球菌的主要鑒別依據,金黃色色素?溶血凝固酶陽性耐熱核酸酶陽性分解甘露醇,38,,四、防治原則,,,防,,,注意消毒隔離,注意個人衛(wèi)生,,,防止醫(yī)源性感染,防止耐藥性產生,,,治,,,抗菌素藥敏試驗,自身菌苗療法,39,第二節(jié) 鏈球菌屬（Streptococcus）,對人類致病的主要是A群鏈球菌和肺炎鏈球菌。,40,1、形態(tài)與染色球形或橢圓形，呈鏈狀排列。無

14、芽胞，無鞭毛。培養(yǎng)早期（2~4h）形成透明質酸的莢膜。細胞壁外有菌毛樣結構，含有型特異性M蛋白。革蘭染色陽性。,一、生物學性狀,41,42,2、培養(yǎng)特性,營養(yǎng)要求較高，需補充血液、血清、葡萄糖等。在血清肉湯中易形成長鏈，管底呈絮狀沉淀。在血瓊脂平板上形成灰白色半透明、表面光滑、邊緣整齊的菌落，不同菌株溶血不一。,43,3、生化反應,分解葡萄糖，產酸不產氣。觸酶陰性。鏈球菌一般不分解菊糖，不被膽汁溶解，這兩特性可用來鑒別甲型溶

15、血性鏈球菌和肺炎鏈球菌。,44,4、抗原結構,蛋白質抗原：或稱表面抗原。具有型特異性。A群鏈球菌有M、T、R和S不同性質的蛋白質抗原，與致病性有關的是M抗原。多糖抗原：或稱C抗原。是群特異性抗原，是細胞壁的多糖組分。核蛋白抗原：或稱P抗原。無特異性。,45,5、分類,根據溶血現(xiàn)象分類根據抗原結構的分類,46,根據溶血現(xiàn)象分類,甲型溶血性鏈球菌：草綠色溶血環(huán)，稱甲型溶血或?溶血，?溶血環(huán)中的紅細胞并未完全溶解。多為條件致病菌。乙型

16、溶血性鏈球菌：完全透明溶血環(huán)，稱乙型溶血或?溶血，?溶血環(huán)中的紅細胞完全溶解，致病力強。丙型鏈球菌：無溶血環(huán)，又稱不溶血性鏈球菌。一般不致病。,47,,48,根據抗原結構的分類,按多糖抗原，可分成20群。對人致病的鏈球菌菌株，90%左右屬A群。A群根據其M抗原不同，可分為100個型。,49,6、抵抗力,抵抗力比較弱。對常用消毒劑敏感。對青霉素、紅霉素，四環(huán)素和磺胺藥都很敏感。青霉素是治療首選藥物，極少發(fā)現(xiàn)有耐藥菌株。,50,二、

17、致病性與免疫性,51,（一）致病物質,鏈球菌溶素（streptolysin）致熱外毒素（pyrogenic exotoxin） 透明質酸酶,脂磷壁酸M蛋白 鏈激酶（streptokinase; SK） 鏈道酶（streptodornase; SD）,52,1、毒素,致熱外毒素（紅疹毒素／猩紅熱毒素）是人類猩紅熱的主要毒性物質。由A群鏈球菌溶原菌菌株產生。,53,根據對氧的穩(wěn)定性可分為：SLO (鏈球菌溶素O)：對O2

18、敏感，氧化后即失去溶血活性。抗原性強，可刺激機體產生SLO抗體（即抗“O”）， 常用于風濕熱活動性及腎小球腎炎的輔助診斷。（>1:400）SLS (鏈球菌溶素S)：對O2穩(wěn)定破壞紅細胞無免疫原性，不產生抗體。,鏈球菌溶素:,54,2、侵襲性酶,透明質酸酶又名擴散因子能分解細胞間質的透明質酸，使病菌易在組織中擴散。,55,鏈激酶（streptokinase; SK）,能使血液中纖維蛋白酶原變成纖維蛋白酶，可溶解

19、血塊或阻止血漿凝固，有利于病菌在組織中擴散。,鏈道酶（streptodornase; SD）,亦稱鏈球菌DNA酶。能降解膿液中具有高度粘稠性的DNA，使膿液稀薄，促進病菌擴散。,56,3、細胞壁成分,脂磷壁酸（LTA） 圍繞在M蛋白外層，與M蛋白共同組成鏈球菌的菌毛樣結構。與人類多種細胞膜上的受體結合，使細菌能定植在皮膚和粘膜表面。M蛋白,有抗吞噬和抵抗吞噬細胞內的殺菌作用與某些超敏反應疾病有關,57,58,（二）所致疾病,A群

20、鏈球菌為主，占90%化膿性（淋巴管炎、淋巴結炎、扁桃體炎、咽炎、中耳炎等）中毒性猩紅熱超敏反應性風濕熱急性腎小球腎炎,59,猩紅熱皮疹,小兒猩紅熱,60,61,（三）免疫性,可獲得對同型鏈球菌的特異性免疫力。但因其型別多，各型間無交叉免疫力，故?？煞磸透腥??；夹杉t熱后能建立牢固的同型抗毒素免疫。,62,三、微生物學檢查法,標本：膿液、咽拭子 直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定 接種在血瓊脂平板如

21、有?溶血菌落，應與葡萄球菌區(qū)別?溶血菌落，要和肺炎鏈球菌鑒別,63,血清學診斷,抗鏈球菌溶血素O試驗（antistreptolysin O test, ASO test） SLO+RBC 溶血 SLO+患者血清+RBC 不溶血,,,結果：效價大于400單位意義：風濕熱及其活動性的輔助診斷,64,四、防治原則,減少傳染源注意消毒治療患者以青霉素G為首選

22、藥物，須治療徹底，防止超敏反應性疾病的發(fā)生。,65,第三節(jié) 肺炎鏈球菌（S.pneumoniae）,,66,G+雙球菌，呈矛尖狀培養(yǎng)：營養(yǎng)要求高。在血平板上的菌落細小、圓形略扁、灰白色半透明，菌落周圍出現(xiàn)草綠色溶血環(huán)，培養(yǎng)時間 >48小時，菌落呈臍狀生化反應：與甲型鏈球菌的鑒別－－菊糖發(fā)酵試驗、膽汁溶菌試驗,一、生物學性狀,67,肺炎球菌,68,肺炎鏈球菌菌落---扁平狀,69,肺炎鏈球菌落---臍狀,70,二、致病性,致

23、病物質莢膜肺炎鏈球菌溶素O脂磷壁酸 神經氨酸酶 所致疾病大葉性肺炎化膿性中耳炎、胸膜炎、膿胸、腦膜炎或敗血癥,71,三、微生物學檢查法,標本：取痰液、膿汁、血液或腦脊液等 直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定：（與甲型溶血性鏈球菌鑒別）膽汁溶菌試驗 Optochin試驗 莢膜腫脹試驗動物試驗：少量具有毒力的肺炎鏈球菌注入小鼠腹腔內，一般24h內死亡。,72,右側：肺炎鏈球菌（澄清、透明）左側：甲型溶血性鏈球菌（渾濁）,

24、膽汁溶菌試驗,73,四、防治原則,莢膜多糖多價疫苗治療前作常規(guī)藥物敏感試驗,74,第四節(jié) 奈瑟菌屬（Neisseria）,,75,概述,革蘭陰性雙球菌。無鞭毛。無芽胞。有莢膜和菌毛。種類腦膜炎奈瑟菌（N.meningitidis）淋病奈瑟菌（N. gonorrhoeae）干燥奈瑟菌（N. sicca）、淺黃奈瑟菌（N. subflava）、金黃奈瑟菌（N. flavescens）、粘膜奈瑟菌（N. mucosa）等,76,

25、一、腦膜炎奈瑟菌（meningococcus）,,77,（一）生物學性狀,形態(tài)與染色：腎形或豆形革蘭陰性雙球菌，新分離菌株大多有莢膜和菌毛。培養(yǎng)特性：營養(yǎng)要求較高，常用巧克力（色）培養(yǎng)基。專性需氧，5% CO2 條件下生長更佳。菌落為圓形光滑似露滴狀。血平板上不溶血。抵抗力：很弱。對干燥、熱力、消毒劑等均敏感。,78,腦膜炎雙球菌,79,A B,A.腦膜炎奈瑟菌在血瓊脂平板上的

26、菌落特征(18-24h)B.腦膜炎奈瑟菌在巧克力瓊脂平板上的菌 落特征(18-24h),80,（二）致病性,致病物質侵襲力：莢膜和菌毛毒素：內毒素，是腦膜炎奈瑟菌的主要致病物質。所致疾病流行性腦脊髓膜炎（簡稱流腦） 主要經飛沫傳播：鼻咽部炎癥-敗血癥-腦膜炎,81,標本,分離培養(yǎng)與鑒定,腦脊液、血液、出血點滲出液、鼻咽拭子保暖、保濕、立即送檢，培養(yǎng)基預溫。最好床邊接種。,直接涂片鏡檢,中性粒細胞內、外有革蘭陰性雙球菌

27、，可作出初步診斷。,巧克力（色）培養(yǎng)基，5% CO2氣體。生化反應和玻片凝集試驗鑒定。,快速診斷,對流免疫電泳，SPA協(xié)同凝集試驗,（三）微生物學檢查法,82,（四）防治原則,流腦莢膜多糖疫苗（A+C）進行特異性預防。注意隔離治療流腦患者，控制傳染源。流行期間兒童可口服磺胺藥物等預防。,83,二、淋病奈瑟菌（gonococcus）,,84,（一）生物學性狀,形態(tài)與染色：革蘭陰性雙球菌，似一對咖啡豆。無芽胞。無鞭毛。有莢膜和菌毛。

28、培養(yǎng)特性：專性需氧，初次分離培養(yǎng)時需供給5% CO2。營養(yǎng)要求高，巧克力（色）血瓊脂平板是適宜培養(yǎng)基。抵抗力：熱、冷、干燥和消毒劑極敏感，1%石炭酸 3 min或1:4000硝酸銀2 min即死亡。,85,Neisseria gonorrhoeae Gram stain of pure culture,Neisseria gonorrhoeae Gram stain of a pustular exudate,Neisseria

29、gonorrhoeae,淋病奈瑟菌,86,致病物質菌毛：粘附作用；抵抗吞噬。外膜蛋白Ⅱ：有助于粘附。IgA蛋白酶：能破壞黏膜表面sIgA。內毒素：損害人體黏膜的重要因素。,87,人類是淋病奈瑟菌的唯一宿主。主要通過性接觸引起泌尿道和生殖系統(tǒng)炎癥。,,,淋病,新生兒淋菌性結膜炎,新生兒由產道感染,,所致疾病,,88,,（三）微生物學檢查法,標本,用無菌棉拭沾取,直接涂片鏡檢,在中性粒細胞內發(fā)現(xiàn)有革蘭陰性雙球菌時，有診斷價值,

30、分離培養(yǎng)與鑒定,標本采集后應注意保暖保濕，立即送檢接種,泌尿生殖道膿性分泌物子宮頸口表面分泌物,巧克力色平板，5~10% CO2氣體,89,（四）防治原則,,防,開展防治性病的知識教育,防止不正當?shù)膬尚躁P系,,治,新生兒1%硝酸銀滴眼。,,,,抗生素。參考體外藥敏試驗。對青霉素、頭孢胺噻肟鈉、環(huán)丙沙星、壯觀霉素等多種抗生素敏感，近年報告耐藥菌株增多。,,90,Purulent conjunctivitisOphthalmia n

31、eonatorum Infection in newborns during vaginal delivery,91,第五節(jié) 假單胞菌屬Pseudomonas,,92,,一類G-桿菌，種類繁多，其中銅綠假單胞菌是一種常見的條件致病菌，也是院內感染常見菌。因在生長過程中產生綠色水溶性色素，感染后的膿汁或敷料上出現(xiàn)綠色，故俗稱綠膿桿菌。,93,直或微彎G－桿菌，有莢膜，單端有1～3根鞭毛，運動活潑。,革蘭染色,熒光染色,電鏡圖,形

32、態(tài)特征,94,需氧，4℃不生長，42℃生長。可產生帶熒光的 綠色水溶性色素，有溶血環(huán)。,血平板上細菌生長,普通培養(yǎng)基上細菌生長,培養(yǎng)特性,95,臨床表現(xiàn),多見于皮膚粘膜受損部位（燒傷和創(chuàng)傷等）與機體免疫力下降病人，表現(xiàn)為局部化膿性炎癥和全身感染。引起中耳炎、角膜炎、尿道炎、胃腸炎、 心內膜炎、膿胸，也可引起菌血癥、敗血癥及引起嬰兒嚴重的流行性腹瀉。醫(yī)源性感染。,96,本章主要內容小結,葡萄球菌和鏈球菌的生物學性狀、致病性、微生物學