腦脊液知多少

1、腦脊液常規(guī)檢查標(biāo)準(zhǔn)操作手冊(cè)1.目的：建立腦脊液常規(guī)檢查的標(biāo)準(zhǔn)化操作；2.范圍：適用于腦脊液的常規(guī)檢查(物理檢查、蛋白定性、細(xì)胞檢查)；3.標(biāo)本采集：3.1標(biāo)本種類(lèi)：腦脊液，由臨床醫(yī)師進(jìn)行腰椎穿刺采集，必要時(shí)可從小腦延腦池或側(cè)腦室穿刺獲得。3.2標(biāo)本要求：將腦脊液分別收集于3個(gè)無(wú)菌試管中，第一管作細(xì)菌培養(yǎng)，第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查，第三管作一般性狀及顯微鏡檢查。每管收集12毫升。3.3遇高蛋白標(biāo)本時(shí)可采用EDTAK2抗凝。4.標(biāo)本儲(chǔ)存

2、：立即送檢。5.標(biāo)本運(yùn)輸：室溫運(yùn)輸。5.標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：污染，久置標(biāo)本。6.器材試劑：5%苯酚溶液：取純苯酚25ml加蒸餾水至500ml，用力振搖，置37℃溫箱內(nèi)12天，待完全溶解后，置棕色瓶?jī)?nèi)保存。細(xì)胞計(jì)數(shù)板；顯微鏡。7.物理檢查：7.1目測(cè)腦脊液顏色與透明度:(1)觀察顏色。(2)觀察透明度。(3)觀察凝塊或薄膜：收集腦脊液于試管內(nèi)，靜置1224小時(shí)，正常腦脊液不形成薄膜、凝塊和沉淀物。7.2結(jié)果判斷與分析：7.2.1顏色：正常腦脊液

3、是無(wú)色透明的液體。在病理情況下，腦脊液可呈不同顏色改變:(1)紅色：常由于各種出血引起。腦脊液中出現(xiàn)多量的紅細(xì)胞，主要由于穿刺損傷出血、蛛網(wǎng)膜下腔或腦室出血引起。前者在留取三管標(biāo)本時(shí)，第一管為血性，以后兩管顏色逐漸變淡，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果也依次減少，經(jīng)離心后上清液呈無(wú)色透明。當(dāng)蛛網(wǎng)膜下腔或腦室出血時(shí)，三管呈均勻紅色，離心后上清液顯淡紅色或黃色。紅細(xì)胞在某些腦脊液中5分鐘后，即可出現(xiàn)皺縮現(xiàn)象，因此紅細(xì)胞皺縮現(xiàn)象不能用以鑒別陳舊性或新鮮出血。(

4、2)黃色：可因出血、梗阻、郁滯、黃疸等引起。陳舊性蛛網(wǎng)膜下腔或腦室出血，由于紅細(xì)胞缺乏蛋白質(zhì)和脂類(lèi)對(duì)膜穩(wěn)定性的保護(hù)，很易破壞、溶解，出血48小時(shí)即可出現(xiàn)黃色。停止出血后，這種黃色仍可持續(xù)3周左右。椎管梗阻如髓外腫瘤，格林巴利綜合征，當(dāng)腦脊液蛋白質(zhì)量超過(guò)1.5gL時(shí)，顏色變黃，其黃色程度與蛋白質(zhì)含量呈正比?；撔阅X膜炎、重癥結(jié)核性腦膜炎時(shí)，因腦脊液蛋白質(zhì)含量明顯增加而呈淡黃色或黃色。重癥如核黃疸、新生兒溶血病時(shí)腦脊液也呈黃染。(3)白色或

5、灰白色：多因白細(xì)胞增加所致常見(jiàn)于化膿性腦膜炎。(4)褐色或黑色：常見(jiàn)于腦膜黑色素瘤。7.2.2透明度：正常腦脊液應(yīng)清晰透明。病毒性腦炎、神經(jīng)梅毒等疾病的腦脊液也可呈透明外觀。腦脊液中白細(xì)胞如超過(guò)300106L時(shí)可變?yōu)榛鞚?；蛋白質(zhì)含量增加或含有大量細(xì)菌、真菌等也可使其混濁；結(jié)核性腦膜炎常呈毛玻璃樣微混；而化膿性腦膜炎常呈明顯混濁。填寫(xiě)報(bào)告時(shí)用“清晰透明”、“微渾”、“渾濁”等描述。7.2.3凝塊或薄膜：正常腦脊液不形成薄膜、凝塊和沉淀物。

6、若腦脊液內(nèi)蛋白質(zhì)包括纖維蛋白質(zhì)多于10gL即可出現(xiàn)凝塊或沉淀物，結(jié)核性腦膜炎的腦脊液靜置1224小時(shí)后，可見(jiàn)表面有纖維的網(wǎng)膜形成，取此膜涂片檢查結(jié)核桿菌，陽(yáng)性率較高。蛛網(wǎng)膜下隙梗阻時(shí)，由于阻塞，遠(yuǎn)端的腦脊液蛋白質(zhì)含量常高達(dá)15gL，此時(shí)腦脊液呈黃色膠凍狀。填寫(xiě)報(bào)告百可用“無(wú)凝塊”、“有凝塊”、“有薄膜”、“膠凍狀”等描述。8.蛋白定性試驗(yàn)(潘氏法)：8.1實(shí)驗(yàn)原理：腦脊液中球蛋白與苯酚結(jié)合，可形成不溶性蛋白鹽而下沉，產(chǎn)生白色渾濁或沉淀。

7、離現(xiàn)象，臨床上稱(chēng)為Froin綜合征，是蛛網(wǎng)膜下腔梗阻性腦脊液的特征。常見(jiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的腦脊液檢查特點(diǎn)壓力（kpa）外觀蛋白質(zhì)定性定量（gL）葡萄糖(mmolL)氯化物(mmolL)細(xì)胞總數(shù)及分類(lèi)細(xì)菌正常人臥位0.781.67無(wú)色透明0.20.42.54.4120130(010)106L多為淋巴細(xì)胞無(wú)化膿性腦膜炎↑↑↑混濁有凝塊↑↑2以上↓↓↓↓顯著增加，以中性粒細(xì)胞為主可發(fā)現(xiàn)致病菌結(jié)核性腦膜炎↑↑↑毛玻璃樣混濁有薄膜形成↑～2↓↓↓

8、↓增加，早期以中性粒細(xì)胞為主，其后以淋巴細(xì)胞為主找到抗酸性桿菌或結(jié)核培養(yǎng)陽(yáng)性病毒性腦膜炎↑清晰或微混↑正常正常增加以淋巴細(xì)胞為主無(wú)新型隱球菌腦膜炎↑清晰或微混↑↓↓增加以淋巴細(xì)胞為主新型隱球菌腦室及珠網(wǎng)膜下腔出血腦瘤↑↑血性↑↑～2↑正常增加以紅細(xì)胞為主無(wú)腦脊髓梅毒↑↑～↑清晰↑正常正常增加以淋巴細(xì)胞為主無(wú)11.2中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病時(shí)腦脊液根據(jù)細(xì)胞病理學(xué)變化分三個(gè)不同時(shí)期：①急性炎性滲出期，呈粒細(xì)胞反應(yīng)；②亞急性增殖期，呈激活淋巴細(xì)

9、胞或單核巨噬細(xì)胞反應(yīng)；③修復(fù)期呈淋巴細(xì)胞反應(yīng)?；撔阅X膜炎的急性期變化最突出，持續(xù)時(shí)間最長(zhǎng)；此期腦脊液細(xì)胞數(shù)每微升可高達(dá)數(shù)千，以中性粒細(xì)胞為主，當(dāng)用抗生素治療后，腦脊液細(xì)胞數(shù)迅速下降。梅毒性腦炎亞急性期出現(xiàn)較早，持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，腦脊液中細(xì)胞數(shù)輕度增加，以淋巴細(xì)胞為主，在單純皰疹病毒性腦炎的腦脊液淋巴樣細(xì)胞中可發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)內(nèi)包涵體，結(jié)核性腦膜炎時(shí)其腦脊液細(xì)胞數(shù)可增加，但超過(guò)500106L者較為罕見(jiàn)，在發(fā)病初期以中性粒細(xì)胞為主，但很快下降，由于患

10、者多在發(fā)病數(shù)天后才來(lái)診治，因此首次腰穿時(shí)，腦脊液中中性粒細(xì)胞已趨下降而淋巴細(xì)胞為多。粒細(xì)胞、淋巴及漿細(xì)胞同時(shí)存在是結(jié)核性腦膜炎的特點(diǎn)。新型隱球菌性腦膜炎可在腦脊液中直接發(fā)現(xiàn)隱球菌，必要時(shí)用印度墨汁染色予以確診。11.3中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤腦脊液細(xì)胞總數(shù)可正常或稍高，以淋巴細(xì)胞為主。腦脊液中能否找到腫瘤細(xì)胞取決于腫瘤位置及惡性程度、穿刺部位和采集標(biāo)本的多少。同時(shí)也與檢查者技術(shù)水平有關(guān)，采用細(xì)胞正玻片離心沉淀儀可提高檢出率。腦脊液找到白血病細(xì)胞

11、是白血病腦膜轉(zhuǎn)移的證據(jù)。11.4腦血管病腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查有助于鑒別腦出血或腰穿損傷性出血。前者在早期病后數(shù)小時(shí)可見(jiàn)大量紅細(xì)胞和明顯中性粒細(xì)胞增多，23天內(nèi)達(dá)高峰，在腦脊液中可發(fā)現(xiàn)吞噬細(xì)胞，出血后數(shù)小時(shí)至第3天可出現(xiàn)含有紅細(xì)胞的吞噬細(xì)胞，5天后可見(jiàn)含鐵血黃素吞噬細(xì)胞。如為穿刺損傷性出血?jiǎng)t不會(huì)有上述反應(yīng)。11.5腦寄生蟲(chóng)病不僅腦脊液細(xì)胞數(shù)升高，并可見(jiàn)嗜酸性粒細(xì)胞增多，約占白細(xì)胞的60%或更高。漿細(xì)胞增多為另一特點(diǎn)。如將腦脊液離心沉淀物全傾倒

12、在玻片上，在顯微鏡下檢查可發(fā)現(xiàn)血吸蟲(chóng)卵、阿米巴原蟲(chóng)、弓形體、旋毛蟲(chóng)的幼蟲(chóng)等，甚至還可找至細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的頭節(jié)或頭鉤。11.6紅斑狼瘡有時(shí)可在腦脊液中找到紅斑狼瘡細(xì)胞。劉云的永生不死鍛煉方法，真是凈化增強(qiáng)“腦脊液”。12.方法學(xué)評(píng)價(jià)：潘氏試驗(yàn)所需標(biāo)本量少，靈敏度高，試劑易得，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果易于觀察，其沉淀多少與蛋白質(zhì)含量成正經(jīng)比，部分正常腦脊液亦可出現(xiàn)極弱陽(yáng)性結(jié)果。RossJine試驗(yàn)主要沉淀的是球蛋白，但敏感性較弱，NoneApett試驗(yàn)