黃芪多糖對兒童扁桃體Treg細胞及其相關因子調控的研究.pdf

1、研究背景：
　　扁桃體肥大是兒童耳鼻喉科常見疾病，是引起兒童睡眠呼吸暫停低通氣綜合癥(Obstructivesleepapnea-hyponeasyndromeOSAHS)的最主要原因之一。目前認為扁桃體肥大的發(fā)生與感染因素、變態(tài)反應因素、局部微環(huán)境改變及功能障礙等因素有關；也有研究認為扁桃體肥大是免疫應答失調的結果，有研究證實調節(jié)性T細胞（regulatoryTcell,Treg）表達下調可能在扁桃體肥大的過程中發(fā)揮了重要作用；

2、黃芪多糖是從中藥黃芪中提取的有效成分之一，具有廣泛的免疫調節(jié)作用。文獻報道在血液系統(tǒng)中，黃芪多糖可通過調控Treg細胞增殖和分化發(fā)揮其免疫治療作用，然而在淋巴組織中，黃芪多糖是否具有類似的作用尚未見文獻報道。
　　目的：
　　應用黃芪多糖（Astragaluspolysaccharides,APS）作用于離體培養(yǎng)的扁桃體肥大組織細胞，觀察培養(yǎng)狀態(tài)APS對Treg細胞及其細胞因子IL-10、TGF-β1以及Treg細胞管家基因

3、FoxP3mRNA表達的影響，從而明確APS對扁桃體Treg細胞調控機制，為藥物治療扁桃體肥大提供新的思路。
　　方法：
　　收集30例扁桃體肥大行手術切除患兒的扁桃體組織，制備扁桃體淋巴細胞懸液，將制備好的單細胞懸液隨機分為實驗組（分別用不同終濃度的黃芪多糖：50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml加入制備的扁桃體單細胞懸液進行培養(yǎng)）和對照組（不加黃芪多糖,加入等量磷酸鹽緩沖液），于培養(yǎng)0h、24h、48h和72

4、h后，分別行流式細胞術（FCM）檢測Treg細胞比例，酶聯(lián)免疫吸附試驗（Elisa）法檢測培養(yǎng)上清液中IL-10、TGF-β1細胞因子水平，反轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）法檢測Treg細胞FoxP3mRNA基因表達。
　　結果：
　　培養(yǎng)24h、48h、72h后，Treg細胞百分率均不同程度升高，與對照組相比，除24h培養(yǎng)下，200μg/mL組（5.03±0.63）與對照組（5.46±0.87）無統(tǒng)計學差異，其他組差異均

5、有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；與50μg/ml、100μg/ml濃度相比，200μg/mL組促進Treg水平升高不明顯；同一濃度黃芪多糖培養(yǎng)下，不同時間點組間比較，50μg/ml組和100μg/ml組差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　培養(yǎng)24h、48h、72h后，F(xiàn)oxp3表達與對照組相比，差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；在同一濃度黃芪多糖培養(yǎng)下，F(xiàn)oxp3mRNA水平在不同時間點組間比較，差異均具有統(tǒng)計學意義（P<

6、0.05）。
　　培養(yǎng)24h、48h、72h后，IL-10及TGF-β1水平均不同程度升高，與對照組相比，50μg/mL組、100μg/mL組差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；在同一濃度黃芪多糖培養(yǎng)下，IL-10、TGF-β1水平在不同時間點組間比較，50μg/ml組和100μg/ml組差異均有統(tǒng)計學意（P<0.05）。
　　結論：
　　50μg/ml、100μg/ml濃度黃芪多糖可上調扁桃體肥大組織Treg細胞及