NO和H2O2介導(dǎo)薏苡仁油誘導(dǎo)靈芝三萜合成的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制.pdf

1、靈芝是具有廣闊應(yīng)用前景的藥用原材料，其關(guān)鍵活性成分三萜化合物具有重要藥理作用。但靈芝細(xì)胞中三萜含量和產(chǎn)量均較低，限制了其規(guī)?；瘧?yīng)用。本論文采用液體深層發(fā)酵（細(xì)胞培養(yǎng)）技術(shù)，研究了外源誘導(dǎo)子薏苡仁油對靈芝深層發(fā)酵過程中三萜合成的影響，發(fā)現(xiàn)適宜濃度的薏苡仁油可顯著提高靈芝三萜的合成量和產(chǎn)量;進(jìn)一步從信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的角度分析了薏苡仁油誘導(dǎo)靈芝三萜合成的基本作用機制。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　1.誘導(dǎo)子（薏苡仁油）在1.5g/L濃度下，可顯

2、著促進(jìn)靈芝菌絲體生長和靈芝三萜的合成量，且誘導(dǎo)子在菌絲體細(xì)胞指數(shù)生長末期到穩(wěn)定期早期加入表現(xiàn)最為敏感，這種作用可在較長時間內(nèi)誘導(dǎo)靈芝菌絲體細(xì)胞產(chǎn)次級代謝產(chǎn)物。
　　2.添加薏苡仁油可有效誘導(dǎo)靈芝細(xì)胞中NO濃度、PAL活性和CYP450含量的增加，且NO可以作為PAL活化和CYP450產(chǎn)生的上游信號分子起作用，它是薏苡仁油誘導(dǎo)靈芝菌絲體細(xì)胞中PAL活化和CYP450產(chǎn)生信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、靈芝三萜合成積累途徑中必定產(chǎn)生、但不是唯一的信號分子。

3、
　　3.H2O2位于PAL活化和CYP450產(chǎn)生的上游，薏苡仁油誘導(dǎo)靈芝三萜合成通過H2O2所介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，但H2O2途徑并不是薏苡仁油誘導(dǎo)靈芝三萜合成唯一的途徑。
　　4.通過對照實驗發(fā)現(xiàn)NO和H2O2均參與了薏苡仁油誘導(dǎo)的靈芝三萜合成的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，且NO和H2O2作為信號分子在介導(dǎo)薏苡仁油的誘導(dǎo)過程中具有協(xié)同作用。另外，SNP+H2O2+DMTU+IMD和SNP+H2O2+cPITO+L-NNA處理組中PAL活