ICT熒光試劑應(yīng)用于分子識(shí)別.pdf

1、以熒光作為輸出信號(hào)的分子識(shí)別具有高靈敏度、高選擇性和快速簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，近年來(lái)得到了極大的重視與快速的發(fā)展，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、環(huán)境科學(xué)和信息科學(xué)等領(lǐng)域。本文分五個(gè)部分介紹熒光識(shí)別的發(fā)展?fàn)顩r，闡述本論文所建立的熒光化學(xué)傳感體系及相關(guān)理論模式。 第一章文獻(xiàn)綜述，簡(jiǎn)單闡述四種主要的熒光識(shí)別原理，總結(jié)了國(guó)內(nèi)外近年來(lái)在陰離子、陽(yáng)離子及生物分子識(shí)別方面的研究進(jìn)展。根據(jù)ICT熒光分子傳感器對(duì)介質(zhì)環(huán)境極為敏感的光學(xué)特性，擬定利用ICT熒光受體實(shí)現(xiàn)

2、對(duì)過(guò)渡金屬離子及生物大分子的識(shí)別。 第二章利用紫外可見(jiàn)分光光度法及熒光光度法研究了ICT熒光受體一硫脲衍生物與血清白蛋白的相互作用，并探討其作用機(jī)理。ICT受體與白蛋白之間發(fā)生了非輻射共振能量轉(zhuǎn)移，白蛋白的熒光猝滅，受體熒光顯著增強(qiáng)。并采用同步熒光技術(shù)考察受體對(duì)血清白蛋白構(gòu)象的影響，結(jié)果顯示受體引入使蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，色氨酸殘基所處的環(huán)境的疏水性增強(qiáng)。 第三章應(yīng)用熒光法和紫外可見(jiàn)分光光度法研究硫脲衍生物對(duì)Hg<'

3、2+>的識(shí)別作用，Hg<'2+>的加入使主體的熒光明顯增強(qiáng)。選擇性、干擾性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明此化合物對(duì)Hg<'2+>具有很好的選擇識(shí)別作用。質(zhì)譜與紅外譜圖證實(shí)主體與Hg<'2+>形成不穩(wěn)定的1:1絡(luò)合物，加熱后脫去HgS，形成穩(wěn)定的五元環(huán)化合物。I<'->干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果與作用機(jī)理推測(cè)的結(jié)果一致。 第四章應(yīng)用紫外可見(jiàn)分光光度法及熒光法研究了硫脲衍生物對(duì)Zn<'2+>的熒光識(shí)別作用。主體與Zn<'2+>形成了1:1絡(luò)合物后，在長(zhǎng)波長(zhǎng)處出現(xiàn)一

4、個(gè)新熒光峰、原熒光峰強(qiáng)度減弱，兩峰強(qiáng)度比值與Zn<'2+>濃度的在一定的濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)線性關(guān)系，是典型的Zn<'2+>比值熒光傳感器。利用比值熒光法能避免由光源不穩(wěn)定及背景引起的誤差，適用于生理?xiàng)l件下鋅離子的檢測(cè)。最后，結(jié)合質(zhì)譜與紅外譜圖對(duì)整個(gè)識(shí)別機(jī)理進(jìn)行了探討，確定Zn<'2+>與主體結(jié)合形成了六元環(huán)絡(luò)合物。 第五章采用熒光光譜法和紫外可見(jiàn)分光光度法研究了硫脲鋅配合物與血清白蛋白的相互作用。在pH 8.0 Tris-HCl緩沖