基于納米顆粒的分子展示應(yīng)用于超靈敏檢測(cè).pdf

1、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)在疾病預(yù)防與診斷中具有重要作用,而基于納米顆粒的功能性分子展示技術(shù)為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)提供強(qiáng)大的技術(shù)手段,能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)低豐度檢測(cè)指標(biāo)的檢驗(yàn)。
　　目的:以乙型肝炎病毒(HBV)病毒樣納米顆粒和鐵蛋白籠形結(jié)構(gòu)納米顆粒為研究對(duì)象,將檢測(cè)相關(guān)的功能性分子分別展示在這兩種納米顆粒上,構(gòu)建出可用于超靈敏檢測(cè)的功能性納米顆粒復(fù)合結(jié)構(gòu);并將其應(yīng)用到Ⅰ型人類免疫缺陷病毒(HIV-1)的P24抗原蛋白的分子檢測(cè),實(shí)現(xiàn)對(duì)其的高靈敏度檢測(cè)。
　　

2、方法:主要采用分子生物學(xué)的手段,將能夠與抗體廣譜性結(jié)合的金黃色葡萄球菌Protein G(SPG)展示在 HBV病毒樣納米顆粒上,構(gòu)建出具有抗體廣譜性結(jié)合能力的HBV病毒樣納米顆粒復(fù)合體,并將其應(yīng)用到HIV-1的P24抗原蛋白酶連免疫吸附分析(ELISA)檢測(cè)中,檢驗(yàn)其相對(duì)的檢測(cè)靈敏度;將生物素結(jié)合肽(BAP)展示在鐵蛋白籠形結(jié)構(gòu)納米顆粒上,并經(jīng)生物素化,構(gòu)建出具有鏈霉親和素特異性結(jié)合能力的鐵蛋白籠形納米顆粒復(fù)合體,并將其應(yīng)用到HIV-

3、1的P24抗原蛋白的ELISA檢測(cè)中,檢驗(yàn)其相對(duì)的檢測(cè)靈敏度。
　　結(jié)果:成功的構(gòu)建出具有抗體廣譜性結(jié)合能力的HBV病毒樣納米顆粒復(fù)合體,并將其應(yīng)用到HIV-1的P24抗原檢測(cè)中,其檢測(cè)下限能夠達(dá)到1ng/mL,較商業(yè)HIV-1 P24 ELISA試劑盒檢測(cè)下限10ng/mL,檢測(cè)靈敏度具有顯著提高;成功的構(gòu)建出具有鏈霉親和素特異性結(jié)合能力的鐵蛋白籠形納米顆粒復(fù)合體,并將其應(yīng)用到HIV-1的P24抗原檢測(cè)中,其檢測(cè)下限能夠達(dá)到1n