熒光DNA探針在微球表面的自組裝及其結(jié)構(gòu)變化.pdf

1、熒光DNA探針在研究基因相互作用、基因快速識別與疾病診斷領(lǐng)域有良好的應(yīng)用前景。傳統(tǒng)方法的熒光DNA探針存在兩個(gè)問題，一個(gè)是探針結(jié)構(gòu)的不確定性，另一個(gè)是在制備過程中需要繁瑣的提純步驟。
　　 本文針對目前熒光DNA探針在組成結(jié)構(gòu)、制備方法以及實(shí)際檢測中所遇問題，提出從表面帶有功能基的聚合物微球入手，以半導(dǎo)體納米晶（量子點(diǎn)）為能量供體，金納米粒子為能量受體，利用固相有機(jī)合成技術(shù)，使用表面具有功能基的聚合物微球作為載體，通過自組裝固載

2、與切割的方法合成結(jié)構(gòu)可控的DNA探針。
　　 首先合成不同交聯(lián)度，不同功能基的聚合物微球，修飾其表面功能基團(tuán)以負(fù)載CdTe量子點(diǎn)。通過對微球功能基含量、負(fù)載量子點(diǎn)后熒光強(qiáng)度，并結(jié)合切割微球表面量子點(diǎn)難易的情況的綜合考察，選取交聯(lián)度40：1的PAAM微球，交聯(lián)度40:1的PNIPAM微球，交聯(lián)度5：1的P4VP微球作為固相有機(jī)載體連接氨基修飾的DNA。同樣方法選取負(fù)載AuNPs粒子的固相有機(jī)載體連接巰基修飾的DNA。并通過自組裝固

3、載與切割的方法合成DNA探針。與傳統(tǒng)方法合成的DNA探針相比，傳統(tǒng)方法合成的DNA探針結(jié)構(gòu)存在不確定性，而固相有機(jī)合成技術(shù)的DNA探針，其結(jié)構(gòu)是可控的，PAAM和PNIPAM作為固相載體時(shí)供受體之間的比例為1：1，而P4VP作為固相載體時(shí)供受體之間的比例為1：2。
　　 聚合物微球作為固相載體的使用不但徹底避免了DNA探針在傳統(tǒng)合成方法中繁瑣的提純步驟，極大的提高制備效率，解決了這類利用無機(jī)納米粒子構(gòu)建的DNA探針在結(jié)構(gòu)上的不確