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文檔簡(jiǎn)介
1、本文利用固相有機(jī)合成法制備熒光DNA探針:即以CdTe量子點(diǎn)為能量供體,金納米粒子為能量受體,利用固相有機(jī)合成技術(shù),使用表面具有功能基的聚合物微球作為載體,通過自組裝固載與切割的方法合成DNA探針,對(duì)其合成條件和檢測(cè)性能進(jìn)行了研究,并初步探討了探針的微觀結(jié)構(gòu)。
首先,在固相載體方面,采用蒸餾沉淀聚合法制備了不同交聯(lián)度、不同功能基的有機(jī)聚(二甲基丙烯酸乙二醇酯-4-乙烯基吡啶)(Poly(EGDMA-co-Vpy))和.聚(
2、二甲基丙烯酸乙二醇酯-甲基丙烯酸β-羥乙酯)(Poly(EGDMA-co-HEMA))微球,利用Stober法制備無(wú)機(jī)SiO2微球,并在這三種微球表面分別連接CdTe量子點(diǎn)和金納米粒子,通過對(duì)微球功能基含量、自組裝時(shí)間以及切割微球表面納米粒子難易程度等因素的考察,得出氨基改性的SiO2微球是一種優(yōu)良的載體,自組裝于其表面的無(wú)機(jī)納米粒子能夠較容易的被切割下來(lái)。
其次,將負(fù)載在氨基改性的SiO2微球表面分別完成了CdTe量子點(diǎn)
3、與5,端為氨基標(biāo)記的單鏈DNA(CdTe-DNA1)的連接、金納米粒子與3’端為巰基標(biāo)記的單鏈DNA(Au-DNA2,其堿基序列與DNA1完全互補(bǔ))的連接,在pH=14時(shí)將二者從微球切割下來(lái),并通過DNA雜交技術(shù)合成了熒光DNA探針。探針對(duì)堿基序列完全互補(bǔ)的單鏈目標(biāo)DNA與單堿基錯(cuò)配的單鏈DNA有良好的識(shí)別檢測(cè)效果。
最后,對(duì)探針的微結(jié)構(gòu)進(jìn)行了初步研究。由于CdTe量子點(diǎn)粒徑較小,大量的細(xì)小的CdTe量子點(diǎn)覆蓋于微球表面,
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