硅基芯片和磁納米粒子表面DNA生物傳感器的構(gòu)建及其在熒光分析中的應(yīng)用.pdf

1、近年來(lái)，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，DNA檢測(cè)技術(shù)變得越來(lái)越重要。傳統(tǒng)的凝膠電泳法勞動(dòng)強(qiáng)度大，消耗時(shí)間長(zhǎng)。在這種情況下，以堿基配對(duì)為基礎(chǔ)的DNA生物傳感器應(yīng)運(yùn)而生。其中，DNA熒光傳感器由于其高靈敏度、低成本及簡(jiǎn)便性等特點(diǎn)受到了越來(lái)越多的關(guān)注。
　　基于此，我們構(gòu)建了四種DNA熒光傳感器。第一種是將共價(jià)連接到硅基芯片表面的嗎啉寡核苷酸作為捕獲探針，與DNA片段雜交后，利用鋯離子的配位作用，將羅丹明B連接到DNA骨架上，通過(guò)熒光成像分析的方

2、法實(shí)現(xiàn)DNA片段的檢測(cè)。
　　第二種是將共價(jià)連接到磁納米粒子表面的嗎啉寡核苷酸作為捕獲探針，與較長(zhǎng)鏈的待測(cè)DNA片段雜交后，待測(cè)DNA的未雜交段再與生物素?；男盘?hào)探針DNA雜交，利用親和素-生物素相互作用，將堿性磷酸酶結(jié)合到信號(hào)探針DNA末端，堿性磷酸酶催化L-抗壞血酸2-磷酸鹽生成L-抗壞血酸，L-抗壞血酸再還原刃天青形成強(qiáng)熒光的試鹵靈，通過(guò)熒光光譜分析的方法實(shí)現(xiàn)DNA片段的檢測(cè)。
　　第三種是將嗎啉寡核苷酸固定到磁納米

3、粒子表面，與目標(biāo)DNA片段雜交后，利用鋯離子的配位作用，將1-芘丁酸連接到DNA骨架上，再利用金絲桃素與1-芘丁酸之間的π-π堆積作用引入熒光較強(qiáng)的金絲桃素。
　　第四種是將捕獲DNA的3'端固定到磁納米粒子表面，與目標(biāo)DNA片段雜交后，末端轉(zhuǎn)移酶對(duì)目標(biāo)DNA的3'端進(jìn)行加尾，生成聚胸腺嘧啶，銅離子可以與聚胸腺嘧啶相互作用，抗壞血酸鈉將二價(jià)銅還原成一價(jià)銅，一價(jià)銅再歧化形成熒光銅納米粒子附著在DNA模板上，以上幾種體系均具有較高的靈