營養(yǎng)調控綠僵菌產孢模式轉換機制的初步研究.pdf

1、產孢是絲狀真菌繁殖和適應環(huán)境的重要過程，大多數(shù)真菌有兩種產孢方式：正常產孢和微循環(huán)產孢。溫度、營養(yǎng)、pH等多種條件可以引起產孢方式發(fā)生變化，其中營養(yǎng)是最為普遍的影響因素之一。但是，營養(yǎng)調控產孢方式轉變的分子機制還不清楚。因此，篩選與產孢模式轉變相關的基因以及不同營養(yǎng)物質調控產孢模式轉變的相關基因對于闡明產孢轉變的分子機制、提高產孢量具有重要意義。
　　采用數(shù)字基因表達譜測序的方法，分析改變培養(yǎng)基營養(yǎng)成分引起昆蟲病原真菌“綠僵菌(M

2、etarhizium acridum)”產孢方式變化過程中基因轉錄本的變化，得到了產孢模式轉變的相關文庫；通過差減比對分析，獲得了1,040個產孢模式轉變相關基因。其中，有137個基因參與正常產孢過程，436個基因參與微循環(huán)產孢過程，83個基因參與碳源對產孢模式轉換機制的調控過程，216個基因參與氮源對產孢模式轉換機制的調控過程，168個基因參與磷源對產孢模式轉換的機制的調控過程。對差異表達基因的功能分析表明：不同的營養(yǎng)物質通過調節(jié)細胞

3、生長、細胞增殖、營養(yǎng)物質的吸收與轉運過程相關的基因和途徑，實現(xiàn)對綠僵菌產孢方式轉變的調控。利用基因敲除和基因回復的方法對產孢模式相關基因 pp5基因（一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶基因）的功能研究發(fā)現(xiàn)：pp5基因對綠僵菌的產孢量、抗?jié)駸崮芰?、抗紫外能力起負調控作用，對孢子的形態(tài)均一性起正調控作用，對綠僵菌的毒力沒有顯著影響。研究成果為闡明絲狀真菌產孢模式轉變的分子機制奠定堅實的基礎。
　　主要研究結果如下：
　?、倥囵B(yǎng)基中的單

4、一營養(yǎng)物質變化（C、N、P）可以改變綠僵菌的產孢方式；
　　②573個基因在綠僵菌產孢方式變化中轉錄水平發(fā)生明顯變化。其中，137個基因在正常產孢方式上調表達，436個基因在微循環(huán)產孢方式上調表達；
　?、?67個基因與不同的營養(yǎng)物質對產孢方式轉變的調控相關。其中，83個基因與碳源對產孢方式轉變的調控相關，216個基因與氮源對產孢方式轉變的相關，168個基因與磷源對產孢方式轉變的調控相關；
　　④隨機選取217個在微循