單寧酸對(duì)布氏田鼠下丘腦黑色素濃集激素和食欲素表達(dá)的影響.pdf

1、單寧為重要的植物次生化合物，影響動(dòng)物的取食行為。動(dòng)物下丘腦是調(diào)節(jié)取食的主要中樞，其中食欲素(Orexin)和黑色素濃集激素（melanin concentrating hormone，MCH）是下丘腦中的兩種重要神經(jīng)肽，它們是影響嚙齒動(dòng)物取食的關(guān)鍵食欲因子。布氏田鼠為內(nèi)蒙古草原主要植食性動(dòng)物。本研究以室內(nèi)繁殖的布氏田鼠為研究對(duì)象，在布氏田鼠舌表面滴灌不同劑量（0、3％及6％，分別為對(duì)照、低劑量及高劑量組）的單寧酸溶液2h后或連續(xù)滴灌5d

2、、10d和20d后，用熒光實(shí)時(shí)定量PCR方法測(cè)定其下丘腦MCH前體蛋白(precursorsprotein of MCH，pp-MCH)和Orexin前體蛋白(precursors protein of Orexin，pp-Orexin)及相關(guān)受體mRNA轉(zhuǎn)錄水平;用Western blot方法檢測(cè)定它們的蛋白表達(dá)量;并定期測(cè)定其日取食量、體重及囤積脂肪。探討植物次生化合物影響嚙齒動(dòng)物下丘腦食欲肽表達(dá)的神經(jīng)機(jī)制，闡明植物次生化合物在調(diào)控

3、動(dòng)物取食行為中的重要作用，為草原動(dòng)植物間的協(xié)同進(jìn)化提供理論依據(jù)。研究結(jié)果如下:
　　1、在5d、10d和20d的單寧酸處理后，各處理組布氏田鼠體重與對(duì)照組之間沒(méi)有顯著差異。
　　2、在處理10d后，單寧酸降低布氏田鼠的取食量;而處理20d后，單寧酸又會(huì)增加布氏田鼠的取食量。
　　3、在單寧酸處理5d和10d后，布氏田鼠的脂肪囤積指數(shù)與對(duì)照組之間沒(méi)有差異，而到第20d時(shí)，單寧酸降低布氏田鼠的脂肪囤積。
　　4、基因

4、與蛋白表達(dá)的結(jié)果顯示，單寧酸處理2h后，處理組雌雄布氏田鼠pp-MCHmRNA轉(zhuǎn)錄水平和蛋白含量與對(duì)照組間沒(méi)有顯著差異。受體基因MCHR1(typeⅠ receptor ofMCH)的mRNA轉(zhuǎn)錄水平在雄性布氏田鼠的處理組和對(duì)照組間也沒(méi)有差異，而在雌性布氏田鼠中，單寧酸卻抑制了MCHR1基因的mRNA轉(zhuǎn)錄水平。在5d、10d和20d各處理組中，單寧酸均抑制了雌雄布氏田鼠pp-MCH基因、受體基因MCHR1 mRNA轉(zhuǎn)錄水平和pp-MCH

5、蛋白的表達(dá)。
　　單寧酸處理處理2小時(shí)后，單寧酸促進(jìn)雌雄性布氏田鼠pp-Orexin基因和受體OX1R（typeⅠ receptor of Orexin）基因的mRNA的轉(zhuǎn)錄，對(duì)pp-Orexin蛋白表達(dá)卻無(wú)影響;處理5d后，單寧酸抑制雌雄田鼠pp-Orexin基因、受體OX1R基因mRNA轉(zhuǎn)錄和pp-Orexin蛋白的表達(dá);但在連續(xù)處理10d和20d后，單寧酸使雄性田鼠的pp-Orexin基因、OX1R基因mRNA轉(zhuǎn)錄水平和pp

6、-Orexin蛋白的表達(dá)增加;但單寧酸仍然抑制雌性布氏田鼠pp-Orexin基因mRNA轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)以及OX1R基因mRNA的轉(zhuǎn)錄。受體OX2R(typeⅡ receptor ofOrexin)基因mRNA轉(zhuǎn)錄水平在雌雄布氏田鼠中表達(dá)趨勢(shì)相同，在處理2h后，單寧酸促進(jìn)了OX2R基因mRNA轉(zhuǎn)錄，而在處理5d、10d和20d后，單寧酸抑制了OX2R基因的轉(zhuǎn)錄。
　　以上結(jié)果表明，單寧酸在較短的時(shí)間內(nèi)能抑制布氏田鼠的取食，而隨著處理