不同體色萍鄉(xiāng)紅鯽皮膚組織學(xué)、黑色素濃集激素受體及細(xì)胞色素b基因的研究.pdf

1、本研究對(duì)四種表型(全黑、半黑、花斑、全紅)萍鄉(xiāng)紅鯽的鱗片及皮膚色素細(xì)胞進(jìn)行了光學(xué)顯微鏡觀察，并對(duì)其皮膚進(jìn)行了組織學(xué)研究，克隆了萍鄉(xiāng)紅鯽黑色素濃集激素受體基因的部分片段，并對(duì)其在組織中的分布和表達(dá)情況進(jìn)行了研究，同時(shí)克隆了萍鄉(xiāng)紅鯽的Cytb基因，分析比較了萍鄉(xiāng)紅鯽在進(jìn)化上的地位。 主要內(nèi)容如下： 1.利用光學(xué)顯微鏡對(duì)四種表型萍鄉(xiāng)紅鯽鱗片及皮膚進(jìn)行了觀察，發(fā)現(xiàn)其鱗片都只含有三種色素細(xì)胞，即黑色素細(xì)胞、黃色素細(xì)胞和虹彩細(xì)胞；而

2、其皮膚都只含有黑色素細(xì)胞和黃色素細(xì)胞；不同表型的萍鄉(xiāng)紅鯽鱗片和皮膚色素細(xì)胞的分布存在差異，主要表現(xiàn)在黑色素細(xì)胞的形態(tài)和分布上。通過(guò)常規(guī)石蠟切片技術(shù)，對(duì)全紅萍鄉(xiāng)紅鯽的皮膚進(jìn)行了組織學(xué)觀察，發(fā)現(xiàn)其色素細(xì)胞不僅存在于表皮層與真皮層之間、真皮層與皮下層之間，在腺層和皮下層中也有分布： 2.克隆了全紅萍鄉(xiāng)紅鯽MCHR2基因編碼區(qū)的部分cDNA序列，長(zhǎng)度為366bp，編碼122個(gè)氨基酸；用熒光定量PCR檢測(cè)了MCHR2基因在全紅萍鄉(xiāng)紅鯽組織

3、中的分布以及四種表型紅鯽大腦和皮膚組織中的分布，結(jié)果發(fā)現(xiàn)MCHR2在全紅萍鄉(xiāng)紅鯽肝臟中表達(dá)量最高，在。腎中表達(dá)量最低，其次依次是眼、肌肉、鰓、大腦、腸和心臟；在四種表型紅鯽大腦組織中，MCHR2的表達(dá)量無(wú)顯著差異；而在皮膚組織中，全紅表型與全黑表型的MCHR2表達(dá)量都存在顯著差異，而與花斑表型及半黑表型間無(wú)顯著差異。 3.克隆了萍鄉(xiāng)紅鯽MCHR1a和MCHR1b基因部分cDNA序列，通過(guò)BALST比對(duì)發(fā)現(xiàn)，其間有96％的同源性；

4、利用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)MCHR1a和MCHR1b在組織中的分布和表達(dá)量基本一致，因此，認(rèn)為萍鄉(xiāng)紅鯽MCHR1a和MCHR1b基因是同一個(gè)基因，改名為MCHR1，即萍鄉(xiāng)紅鯽MCHR1基因并未發(fā)生分化，經(jīng)拼接獲得了其編碼區(qū)的部分cDNA序列，長(zhǎng)度為481bp，編碼160個(gè)氨基酸； 4.克隆了四種表型紅鯽線粒體細(xì)胞色素b基因完整編碼區(qū)，發(fā)現(xiàn)其序列完全一致，長(zhǎng)度為1140bp，編碼380個(gè)氨基酸。表明萍鄉(xiāng)紅鯽群體盡管部分個(gè)體在表型