鯉鯽雜交和鯉魚(yú)雌核發(fā)育子代的同工酶及DNA的遺傳分析.pdf

1、本研究進(jìn)行了四個(gè)組合的鯉鯽雜交試驗(yàn),應(yīng)用同工酶檢測(cè)技術(shù)對(duì)子代進(jìn)行分析,推測(cè)了分別以鯉魚(yú)和鯽魚(yú)為母本、烏龍?chǎng)a二倍體和四倍體為父本產(chǎn)生三倍體的原因;應(yīng)用遠(yuǎn)緣雜交誘導(dǎo)鯉魚(yú)雌核發(fā)育以及用紫外線滅活精子使鯉魚(yú)卵受精、人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育,應(yīng)用微衛(wèi)星DNA和RAPD分子標(biāo)記鑒定雌核發(fā)育是否成功,并判斷所誘導(dǎo)的雌核發(fā)育屬于阻止第二極體排出型還是阻止第一次卵裂型雌核發(fā)育二倍體。1、利用水平式淀粉凝膠電泳法對(duì)烏克蘭鱗鯉(♀)×烏龍?chǎng)a四倍體(♂)、紅鯽(♀)×

2、烏龍?chǎng)a四倍體(♂)、紅鯽(♀)×烏龍?chǎng)a二倍體(♂)和白鯽(♀)×墨龍鯉(♂)四組鯉鯽雜交子代的背側(cè)肌肉組織的天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AAT)、α-甘油醛磷酸脫氫酶(a-GPD)、葡萄糖磷酸異構(gòu)酶(GPI)、異檸檬酸脫氫酶(IDH)、乳酸脫氫酶(LDH)、蘋(píng)果酸脫氫酶(MDH)、磷酸葡萄糖變位酶(PGM)和肌漿蛋白(PROT)進(jìn)行了電泳分析,并測(cè)量了紅細(xì)胞長(zhǎng)徑。紅細(xì)胞測(cè)量結(jié)果表明烏克蘭鱗鯉(♀)×烏龍?chǎng)a四倍體(♂)、紅鯽(♀)×烏龍?chǎng)a四倍體(♂)

3、、紅鯽(♀)×烏龍?chǎng)a二倍體(♂)雜交子代為三倍體,白鯽(♀)×墨龍鯉(♂)雜交子代為二倍體。四組雜交子代GPI同工酶的基因組成結(jié)果表明,父本烏龍?chǎng)a四倍體和父本烏龍?chǎng)a二倍體都產(chǎn)生二倍體配子,且二倍體配子中一套為鯉染色體組,一套為鯽染色體組。2、應(yīng)用大口胭脂魚(yú)雄魚(yú)精子為遠(yuǎn)緣精子誘導(dǎo)了六個(gè)雌性鯉魚(yú)(分別為禾花烏鯉雌核發(fā)育Fl(禾花烏鯉(♀)×大口胭脂魚(yú)(♂)、烏克蘭鱗鯉雌核發(fā)育F1代(烏克蘭鱗鯉(♀)×大口胭脂魚(yú)(♂)、貝爾湖鯉、松浦鯉、禾花

4、烏鯉和烏克蘭鱗鯉)的雌核發(fā)育,應(yīng)用紫外線照射后遺傳失活的精子誘導(dǎo)一組津新鯉雌核發(fā)育。其中禾花烏鯉雌核發(fā)育F1(♀)×大口胭脂魚(yú)(♂)組、烏克蘭鱗鯉雌核發(fā)育F1代(♀)×大口胭脂魚(yú)4(♂)組、貝爾湖鯉(♀)×大口胭脂魚(yú)(♂)組及津新鯉雌核發(fā)育組均獲得了正常二倍體子代。利用8對(duì)微衛(wèi)星引物,對(duì)三個(gè)鯉魚(yú)為母本的遠(yuǎn)緣雜交雌核發(fā)育組和津新鯉雌核發(fā)育組的正常二倍體子代及親本進(jìn)行分析,并計(jì)算重組率。檢測(cè)結(jié)果表明,四組雌核發(fā)育子代的基因均來(lái)自母本,均為母

5、本的雌核發(fā)育類(lèi)型;且四個(gè)雌核發(fā)育組合的幼苗部分個(gè)體都存在雜合,表明基因座位與著絲粒間有交叉交換現(xiàn)象。津新鯉雌核發(fā)育組(分析了48個(gè)個(gè)體)的8個(gè)基因座位上,MFW19座位上的重組率最低,重組率為1.20％,HLJ1118座位的重組率最高,重組率為85.70%。由此可以認(rèn)為MFW19座位與著絲粒的距離最近,HLJ1118座位與著絲粒的距離最遠(yuǎn)。微衛(wèi)星DNA分析結(jié)果表明兩種方法誘導(dǎo)的雌核發(fā)育均屬于阻止第二極體排出型雌核發(fā)育二倍體。利用20個(gè)隨