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1、本實(shí)驗(yàn)用黑龍江水產(chǎn)研究所生物技術(shù)室首批合成篩選出的14對銀鯽微衛(wèi)星引物對方正銀鯽的生殖機(jī)制及進(jìn)化機(jī)制進(jìn)行探討?! ∮昧魇郊?xì)胞儀(FCM)測定黑龍江方正縣雙龍水庫的銀鯽的倍性,從已確定為三倍體行雌核發(fā)育的銀鯽中檢測具有雜合位點(diǎn)的個(gè)體,并用同源親魚繁育子代,分析雜合位點(diǎn)在子代中的分離情況。用2%瓊脂糖凝膠電泳和8%非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分別對所篩選的兩組父母本及其繁育的子代進(jìn)行檢測分析。除個(gè)別樣本外,篩選出的14對微衛(wèi)星引物在88尾子代
2、個(gè)體及4尾親本中均能重復(fù)穩(wěn)定地?cái)U(kuò)增出相應(yīng)的同源序列,隨引物不同,各等位基因數(shù)在瓊脂糖凝膠電泳圖譜上,為1~3個(gè),大小在141~301bp之間;在聚丙烯酰胺凝膠電泳圖譜上,則表現(xiàn)出更多的多態(tài)性,等位基因數(shù)為1~12個(gè),大小在116~459bp。通過對微衛(wèi)星等位基因和基因型分析發(fā)現(xiàn),兩組子代的基因型基本與母本的基因型是一致的,從而從分子水平證明銀鯽行雌核發(fā)育的特性。但在第一組的22尾個(gè)體中檢測到一尾特異個(gè)體,此個(gè)體在所檢測的14個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)
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