宮頸癌組織中FR-α與Ki-67的表達(dá)及其相關(guān)性研究.pdf

1、目的:宮頸癌(Cervical Cancer)是最常見的婦科惡性腫瘤之一，發(fā)病率居女性惡性腫瘤的第二位，僅次于乳腺癌，其病理類型常見的有鱗癌、腺癌、腺鱗癌，其發(fā)病原因主要與以下因素有關(guān):1.高危型HPV感染;2.性行為及分娩次數(shù);3.沙眼衣原體、單純皰疹病毒Ⅱ型、滴蟲等病原體的感染起著協(xié)同作用;4.吸煙以及營養(yǎng)不良、衛(wèi)生條件差等。發(fā)病早期的宮頸癌常無明顯的癥狀和體征，宮頸光滑或難與宮頸柱狀上皮異位相鑒別。頸管型患者因?qū)m頸外觀正常易漏診或

2、誤診。其轉(zhuǎn)移途徑主要為直接蔓延及淋巴轉(zhuǎn)移，血行轉(zhuǎn)移較少見。在細(xì)胞代謝、DNA合成和修復(fù)以及癌細(xì)胞快速增殖分裂過程中葉酸發(fā)揮著重要作用，快速分裂癌細(xì)胞的DNA合成對于葉酸有很高的需求，所以近年來轉(zhuǎn)運葉酸進入細(xì)胞內(nèi)的葉酸受體α成為人們的研究熱點。葉酸受體是一種膜結(jié)合蛋白，它在結(jié)合運輸生理水平的葉酸到細(xì)胞內(nèi)的過程中發(fā)揮著重要的作用，其在正常組織中低表達(dá)，在腫瘤細(xì)胞膜表面高度表達(dá)，葉酸受體(FR)分為FR-α、FR-β、FR-γ，其中FR-α高

3、表達(dá)于黏液腺癌中，包括卵巢腺癌、子宮腺癌、宮頸腺癌、睪丸絨毛膜癌和某些腦腫瘤中，并且少量地表達(dá)于腎、結(jié)腸及心臟等癌癥中。Ki-67是存在于增殖細(xì)胞核的與細(xì)胞增殖密切相關(guān)的核蛋白，作為評價細(xì)胞增殖的標(biāo)記物，現(xiàn)已廣泛地應(yīng)用于腫瘤的研究和探討中。本實驗用免疫組織化學(xué)法（immunohistochemistry）檢測宮頸癌組織中FR-α蛋白及Ki-67的表達(dá)，探討二者的關(guān)系及其臨床意義。
　　方法:采用免疫組織化學(xué)PV法檢測正常宮頸組織、

4、宮頸上皮內(nèi)瘤變組織以及宮頸癌組織中FR-α蛋白表達(dá)及Ki-67的表達(dá)。分實驗組:宮頸癌33例（其中宮頸癌Ⅰ期11例，宮頸癌Ⅱ期12例，宮頸癌Ⅲ期10例）。對照組:正常宮頸組織30例，宮頸上皮內(nèi)瘤變組織42例，陽性表達(dá)判斷:細(xì)胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為準(zhǔn)，參考Soslow RA和劉祖國等[1][2]提到的方法，采用免疫組化評分法來判定結(jié)果，先按染色強度評分:未見染色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分;再按陽性細(xì)胞所占百分比評分

5、:隨機選取高倍鏡(×200)下觀察5個視野，每個視野計數(shù)100個細(xì)胞，進行陽性細(xì)胞數(shù)分級，0-1％=0，1-10％=1，10-50％=2，50-80％=3，80-100％=4)。兩項評分乘積所得總分(IHS)進行結(jié)果判定:IHS0分為(-)，IHS1～4分為(+)，IHS5～8分為(++)，IHS9～12分為(+++)。Ki-67結(jié)果判斷:細(xì)胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為準(zhǔn)，參考Soslow RA和劉祖國等[1][2]提到的方法，采用免疫組化

6、評分法來判定結(jié)果，先按染色強度評分:未見染色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分;再按陽性細(xì)胞所占百分比評分:隨機選取高倍鏡(×200)下觀察5個視野，每個視野計數(shù)100個細(xì)胞，行陽性細(xì)胞數(shù)分級，0-1％=0，1-10％=1，10-50％=2，50-80％=3，80-100％=4)。兩項評分乘積所得總分(IHS)進行結(jié)果判定:IHS0分為（-），IHS1～4分為(+)，IHS5～8分為(++)，IHS9～12分為（+++）。

7、所有數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理。計數(shù)資料采用x2(PearsonChi-Square Test)或Fish確切概率法;兩組變量間的相關(guān)分析采用Spearman等級相關(guān)分析。所有檢驗均為雙側(cè)，P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1.正常宮頸組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變組織、宮頸癌組織中FR-α蛋白表達(dá)正常宮頸組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變組織、宮頸癌組織中FR-α蛋白表達(dá)于細(xì)胞漿中，呈棕黃色顆粒。在本實驗中，正常宮頸組織FR

8、-α蛋白表達(dá)陽性率為6.7％，宮頸上皮內(nèi)瘤變組織FR-α蛋白表達(dá)陽性率為76.2％，宮頸癌組織FR-α蛋白表達(dá)陽性率為81.7％，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見table1。宮頸上皮內(nèi)瘤變組織與正常組織中FR-α的表達(dá)陽性率相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見table1。宮頸癌組織與宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中FR-α蛋白表達(dá)陽性率相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見table1。
　　2.不同病理類型中FR-α蛋白表

9、達(dá)CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ中FRα蛋白表達(dá)有差異，三者相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見table2。宮頸癌Ⅰ期、宮頸癌Ⅱ期、宮頸癌Ⅲ期蛋白表達(dá)有差異，三者差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見Table3。
　　3.FR-α蛋白表達(dá)與宮頸癌危險因素的相關(guān)性在宮頸癌組織及宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中，F(xiàn)R-α蛋白表達(dá)與年齡因素?zé)o關(guān)，年齡＞40與年齡≤40兩組差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，見Table4。在兩組中，F(xiàn)R-α蛋白表達(dá)與

10、HPV感染均有關(guān)，HPV感染陽性與HPV感染陰性兩組差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見Table4。
　　4.正常宮頸組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變組織、宮頸癌組織中Ki-67表達(dá)正常宮頸組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變組織、宮頸癌組織中Ki-67表達(dá)于細(xì)胞核中，呈棕黃色顆粒。在正常宮頸組織中未見Ki-67表達(dá)（見Fig.4），宮頸上皮內(nèi)瘤變組織及宮頸癌組織中Ki-67表達(dá)升高（見Fig.5，F(xiàn)ig.6），正常宮頸組織中Ki-67陽性率0％，宮頸上皮

11、內(nèi)瘤變組織中Ki-67陽性率71.4％，宮頸癌病變組織中Ki-67陽性率84.8％，三者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見table5，正常宮頸組織與宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中Ki-67蛋白表達(dá)陽性率相比，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，宮頸上皮內(nèi)瘤變組織與宮頸癌病變組織中Ki-67蛋白表達(dá)陽性率相比，兩者差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見Table5。
　　5.不同病理類型中Ki-67表達(dá)CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ蛋白表達(dá)

12、有差異，三者相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見table6。宮頸癌Ⅰ期、宮頸癌Ⅱ期、宮頸癌Ⅲ期Ki-67蛋白表達(dá)有差異，三者差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，見Table7。
　　6.Ki-67蛋白表達(dá)與宮頸癌危險因素的相關(guān)性在宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中，Ki-67蛋白表達(dá)與年齡因素?zé)o關(guān)，年齡＞40與年齡≤40兩組差別無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見Table8。在兩組中Ki-67蛋白表達(dá)與HPV感染無關(guān)，HPV感染陽性與

13、HPV感染陰性兩組差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，見Table8。
　　7.宮頸上皮內(nèi)瘤變組織及宮頸癌組織中FR-α蛋白表達(dá)與Ki-67的關(guān)系:
　　宮頸癌組織中二者呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=0.532，p=0.000，有相關(guān)性，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中，F(xiàn)R-α蛋白表達(dá)與Ki-67蛋白表達(dá)呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=0.504，p=0.003，有相關(guān)性，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論: