參芪止皰顆粒豚鼠體內(nèi)抗HSV-2實(shí)驗研究.pdf

1、目的：本課題通過建立動物模型，檢測對比正常健康豚鼠、HSV-2感染模型豚鼠和HSV-2感染模型治療組各細(xì)胞因子的血清含量測定、蛋白測定及基因表達(dá)情況，分析細(xì)胞因子在生殖器皰疹發(fā)病過程中的作用。并進(jìn)行了病毒滴度的分析、組織病理及外陰皮膚上皮細(xì)胞和神經(jīng)節(jié)超微結(jié)構(gòu)的觀察等研究，探討參芪止皰顆粒豚鼠體內(nèi)對HSV-2的抑制作用機(jī)制,為中醫(yī)藥臨床實(shí)踐提供可靠的客觀依據(jù)，同時為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)開發(fā)利用中醫(yī)藥提供科學(xué)實(shí)驗依據(jù)。
　　方法：本研究以Dunk

2、in Hartly白化雌性豚鼠為實(shí)驗對象，建立HSV-2感染豚鼠生殖道模型，隨機(jī)分為正常對照組、模型組、參芪止皰顆粒組和阿昔洛韋（ACV）組，各組給予相應(yīng)藥物治療（模型組、正常對照組給予生理鹽水）。利用顯微鏡觀察對比各組豚鼠外陰皮膚癥狀，細(xì)胞培養(yǎng)測定豚鼠陰道組織內(nèi)病毒滴度，HE染色制作子宮、輸卵管、卵巢組織病理切片、電鏡觀察并記錄病理結(jié)果及外陰皮膚組織上皮細(xì)胞及脊髓神經(jīng)節(jié)超微結(jié)構(gòu)的變化。用RT-PCR法測定各組豚鼠子宮、卵巢組織中IL-

3、2、IL-6、IFN-γ、TNF-α、NF-κB mRNA表達(dá)情況。用ELISA法檢測血清中IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α因子含量，用蛋白印跡法檢測豚鼠子宮NF-κB蛋白表達(dá)。以上各組數(shù)據(jù)均進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。
　　結(jié)果：治療結(jié)束時，將各組豚鼠陰道內(nèi)病毒滴度，外陰皮膚癥狀評分，子宮、輸卵管、卵巢組織病理及外陰皮膚上皮細(xì)胞和脊髓神經(jīng)節(jié)超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行對比，參芪止皰顆粒組與阿昔洛韋組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），各治療組與

4、模型組比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。與模型組比較，參芪止皰顆粒組豚鼠子宮、卵巢組織中IL-2、IFN-γmRNA表達(dá)上調(diào)，IL-6和TNF-α、NF-κBmRNA表達(dá)下調(diào)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；血清中IL-2、IFN-γ含量高，IL-6和TNF-α含量低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；豚鼠子宮NF-kB蛋白表達(dá)下調(diào)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。參芪止皰顆粒組與阿昔洛韋比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。