姜黃中活性成分的提取及系統(tǒng)分析研究.pdf

1、姜黃為姜科姜黃屬的多年生草本植物，含有多種化學(xué)成分，具有良好的藥用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)前景。國(guó)內(nèi)外科研人員對(duì)姜黃中化學(xué)活性成分分析、純化及藥理性等方面的研究已有報(bào)道，但對(duì)姜黃中重要的成分之一——黃酮類物質(zhì)的研究還未見報(bào)道，且對(duì)姜黃中活性成分的系統(tǒng)研究也鮮見報(bào)道。本論文采用分光光度法、高效液相色譜法、氣相色譜法和氣質(zhì)聯(lián)用法等現(xiàn)代分析檢測(cè)手段，對(duì)姜黃中的主要成分黃酮類化合物、姜黃素類物質(zhì)及姜黃油做了系統(tǒng)的分析研究，為進(jìn)一步有效開發(fā)利用姜黃藥材提供了重

2、要參考。
　　本論文重點(diǎn)研究了以下幾方面內(nèi)容:
　　1.比較研究了不同提取方法對(duì)姜黃中黃酮得率的影響。重點(diǎn)研究了溶劑回流提取法、超聲提取法和索氏提取法等三種不同方法提取姜黃中的總黃酮，通過單因素實(shí)驗(yàn)及正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化條件，確定了總黃酮最高得率對(duì)應(yīng)的最佳提取方法和最佳提取條件。三種方法對(duì)比發(fā)現(xiàn)溶劑回流提取法所得總黃酮得率最高(1.54％)。
　　2.姜黃中總黃酮的分析。采用鋁鹽顯色分光光度法測(cè)定姜黃中總黃酮的含量，在波長(zhǎng)50

3、8nm條件下，以亞硝酸鈉—硝酸鋁為顯色劑，常溫顯色，15min后，分光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)溶液在4μg/mL～40μg/mL內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為y=11.751x+0.0024，相關(guān)系數(shù)R2=0.9999;測(cè)得姜黃中總黃酮含量的RSD=1.84％，說明方法的精密度良好;加標(biāo)回收率在97.10％～103.75％范圍，平均為99.45％，說明該方法用于姜黃中總黃酮含量的測(cè)定，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。
　　3.姜黃中總姜黃素的分析

4、研究。采用紫外-可見分光光度法和HPLC法分析姜黃素類化合物，對(duì)這兩種現(xiàn)代儀器分析方法進(jìn)行了綜合比較，并通過流動(dòng)相種類、流動(dòng)相比例及離子調(diào)節(jié)劑含量的改變，探討并確定了姜黃素類化合物分離檢測(cè)的最佳色譜條件，發(fā)現(xiàn)HPLC法的精密度好、加標(biāo)回收率高。結(jié)果顯示，分離姜黃素、去甲氧基姜黃素和雙去甲氧基姜黃素三種化合物的最佳色譜條件為:色譜柱:Eclipse XDB-C18(250mm×4.6mm，5μm);柱溫:35℃;流動(dòng)相:乙腈∶水(1.0％

5、冰醋酸)=55∶45，流速:1.0mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):424nm;進(jìn)樣量:10μL，在此條件下測(cè)定超聲、回流和索氏三種不同提取方法所得總姜黃素得率分別為:3.02％、2.74％、1.69％，四種不同溶劑甲醇、乙醇、丙酮和乙酸乙酯提取所得總姜黃素的得率分別為:2.97％、2.44％、1.89％、1.67％。結(jié)果表明，HPLC法不僅可以將姜黃素中三種目標(biāo)成分很好的分離，而且還可以通過外標(biāo)法進(jìn)一步分別計(jì)算三種目標(biāo)物的得率及姜黃素類化合物的

6、總得率。
　　4.姜黃油的成分鑒定。采用氣相色譜法優(yōu)化了不同提取方法及不同溶劑提取姜黃所得揮發(fā)油的色譜條件，確定了姜黃油分離效果最佳的色譜條件為:FID檢測(cè)器溫度:280℃;進(jìn)樣口溫度:260℃;分流比:30∶1;進(jìn)樣體積:1.0μL;載氣，N2流速:1mL/min;程序升溫:80℃10℃/min——→180℃4℃/min——→260℃。進(jìn)一步采用氣質(zhì)聯(lián)用法對(duì)姜黃油化學(xué)成分進(jìn)行分離和鑒定。鑒定結(jié)果顯示，含量最高的8種成分三種不同提

7、取方法——超聲、回流和索氏提取的相對(duì)含量分別為:α-姜黃烯(6.69％、6.43％、5.96％)、α-香檸檬烯(5.06％、4.52％、4.92％)、β-沒藥烯(2.23％、2.02％、0.89％)、β-倍半水芹烯(8.03％、7.87％、7.74％)、芳姜黃酮(12.45％、12.12％、11.73％)、姜黃酮(7.94％、7.62％、6.34％)、吉瑪酮(8.36％、0.00％、8.15％)、莪術(shù)二酮(12.55％、12.20％、1

8、1.69％);三種不同溶劑——丙酮、正己烷和石油醚提取所得姜黃油中含量最高的8種化合物的相對(duì)含量分別為:α-姜黃烯(6.71％、6.43％、6.09％)、α-香檸檬烯(4.88％、4.52％、4.88％)、β-沒藥烯(1.89％、2.04％、2.02％)、β-倍半水芹烯(6.86％、7.87％、6.38％)、芳姜黃酮(10.85％、12.12％、10.72％)、姜黃酮(6.67％、7.62％、6.41％)、吉瑪酮(6.97％、0.00％