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1、目前,國(guó)際上公認(rèn)和普遍采用的原核生物分類系統(tǒng)是根據(jù)16S rRNA序列同源性建立的系統(tǒng)發(fā)育體系。在當(dāng)前的分類系統(tǒng)中,高等級(jí)分類階元的界定尚無(wú)明確標(biāo)準(zhǔn),主要依據(jù)其能否在16S rRNA系統(tǒng)發(fā)育樹中形成獨(dú)立分枝。然而隨著新物種的發(fā)現(xiàn)及研究的深入,僅根據(jù)16S rRNA系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果,當(dāng)前細(xì)菌域多個(gè)高等級(jí)分類階元間的關(guān)系無(wú)法準(zhǔn)確界定。大規(guī)模基因組測(cè)序的完成及系統(tǒng)發(fā)育基因組學(xué)研究方法的出現(xiàn),為從新的角度進(jìn)行細(xì)菌域系統(tǒng)學(xué)的研究提供了前所未有的機(jī)
2、會(huì)。因此,在基因組水平尋找新的具有分類學(xué)意義的系統(tǒng)發(fā)育標(biāo)記分子,同時(shí)利用系統(tǒng)發(fā)育基因組學(xué)的研究策略,重建更能反應(yīng)細(xì)菌域自然進(jìn)化關(guān)系的分類體系是當(dāng)前細(xì)菌系統(tǒng)學(xué)發(fā)展的必然要求。
本研究通過篩選細(xì)菌基因組內(nèi)206個(gè)核心基因編碼蛋白,得到域水平系統(tǒng)發(fā)育標(biāo)記分子56個(gè),門水平標(biāo)記分子108個(gè)。其中,近半數(shù)的標(biāo)記分子為核糖體蛋白??紤]到該類蛋白質(zhì)分子間相互作用,并與rRNA共同構(gòu)成核糖體,且已有研究表明,該類蛋白分子與rRNA進(jìn)化相關(guān),甚
3、至可以反映基因組的進(jìn)化,因此,本研究將核糖體蛋白與篩選得到的其他核心蛋白分別作為一個(gè)整體用于系統(tǒng)發(fā)育分析。同時(shí),將該結(jié)果與基于16S rRNA構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹相比較,探討當(dāng)前細(xì)菌域高等級(jí)分類階元之間的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。
系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果顯示,基于核糖體蛋白和其他核心蛋白構(gòu)建的細(xì)菌域高等級(jí)分類階元間的關(guān)系與當(dāng)前細(xì)菌域分類系統(tǒng)基本一致,且系統(tǒng)發(fā)育樹各節(jié)點(diǎn)有高自薦值支持,拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)穩(wěn)定,受不同分析方法影響較小。而基于16S rRNA構(gòu)建的
4、系統(tǒng)發(fā)育樹局部拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)高度不穩(wěn)定,因此,無(wú)法推導(dǎo)出相應(yīng)分枝處高等級(jí)分類階元間可靠的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。核心蛋白系統(tǒng)發(fā)育組學(xué)方法的應(yīng)用,為細(xì)菌域高等級(jí)分類階元間關(guān)系的確定提供重要依據(jù),其優(yōu)勢(shì)在物種多樣性豐富的放線菌門、變形桿菌門和厚壁菌門中表現(xiàn)尤為突出。
作為傳統(tǒng)的系統(tǒng)發(fā)育分析方法的重要補(bǔ)充,特征序列研究在細(xì)菌進(jìn)化中表現(xiàn)出了明顯的優(yōu)勢(shì)。本研究發(fā)現(xiàn)了α-變形桿菌綱、擬桿菌門、綠屈擾菌門的特征性插入/缺失序列(indel序列),為相應(yīng)類群
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