貞芪扶正膠囊對(duì)慢性苯中毒小鼠認(rèn)知能力及中樞神經(jīng)遞質(zhì)5-HT、Ach的影響.pdf

1、目的：觀察貞芪扶正膠囊對(duì)慢性苯中毒小鼠外周血象、認(rèn)知能力和中樞神經(jīng)遞質(zhì)5-HT、Ach的影響，探討其改善認(rèn)知能力的可能機(jī)制。
　　方法：將8-12周齡健康雄性昆明種小鼠，共70只，按隨機(jī)數(shù)字表法分為正常對(duì)照組、模型組、貞芪扶正聯(lián)合西藥組、貞芪扶正組以和西藥組5組，每組14只。將小鼠置于人工模擬高苯濃度（苯濃度=2000mg/m3）環(huán)境喂養(yǎng)，每天10小時(shí)，連續(xù)造模3周，小鼠外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)低于6×109/L，血小板低于200×109

2、/L，血紅蛋白低于98g/L，制備慢性苯中毒小鼠模型。造模成功后，根據(jù)血常規(guī)和行為學(xué)指標(biāo)，將得分相近的小鼠按隨機(jī)數(shù)字表法重新分為正常對(duì)照組、模型組、貞芪扶正聯(lián)合西藥組、貞芪扶正組以及西藥組5組，每組10只。貞芪扶正組給予貞芪扶正混懸液0.068g/g.d，相當(dāng)于臨床用量的9.1倍。西藥組給予利血生0.08mg/g.d，鯊肝醇0.2mg/g.d，維生素B40.08mg/g.d灌胃，也相當(dāng)于臨床用量的9.1倍。貞芪扶正聯(lián)合西藥組是將貞芪扶正

3、混懸液和西藥同時(shí)灌胃。每組均每天給藥1次，連續(xù)3周。正常對(duì)照組和模型組正常喂養(yǎng)。給藥期間除正常對(duì)照組外，其余各組均繼續(xù)在高苯環(huán)境下喂養(yǎng)。分別于造模成功后和藥物干預(yù)后用敞箱實(shí)驗(yàn)和Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠的認(rèn)知能力；用Q-PCR法檢測(cè)小鼠腦組織中TPH2 mRNA、AchE mRNA的表達(dá)；最后檢測(cè)海馬神經(jīng)元的形態(tài)。
　　結(jié)果：（1）各組小鼠外周血象的比較：靜室吸入式苯染毒3周后，模型組的白細(xì)胞、血小板和血紅蛋白明顯降低，與正常

4、對(duì)照組差別明顯（P<0.05）。經(jīng)干預(yù)治療3周后，與模型組對(duì)比，治療組各指標(biāo)均升高（P<0.05）。與西藥組和貞芪扶正組對(duì)比，貞芪扶正聯(lián)合西藥組的白細(xì)胞、血紅蛋白較西藥組和貞芪扶正組升高明顯（P<0.05）。與西藥組比較，貞芪扶正組的白細(xì)胞和血小板也有升高，但差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在血紅蛋白方面，貞芪扶正組較西藥組有明顯升高（P<0.05）。
　?。?）各組小鼠敞箱實(shí)驗(yàn)的比較：造模3周后,模型組小鼠水平運(yùn)動(dòng)得分和垂直運(yùn)

5、動(dòng)得分均低于正常對(duì)照組(P<0.05)。治療3周后，與模型組和西藥組比較，貞芪扶正組和貞芪扶正聯(lián)合西藥組可顯著增加慢性苯中毒小鼠水平運(yùn)動(dòng)得分和垂直運(yùn)動(dòng)得分（P<0.05）；與模型組比較，西藥組不能增加慢性苯中毒小鼠的水平運(yùn)動(dòng)得分和垂直運(yùn)動(dòng)得分（P>0.05）；與貞芪扶正組和西藥組比較，貞芪扶正聯(lián)合西藥組明顯提高慢性苯中毒小鼠的水平運(yùn)動(dòng)得分和垂直運(yùn)動(dòng)得分（P<0.05）。
　　（3）各組小鼠Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)的比較：在定位導(dǎo)航實(shí)

6、驗(yàn)中，造模3周后，模型組小鼠定位導(dǎo)航實(shí)驗(yàn)逃避潛伏期較正常對(duì)照組長(zhǎng)（P<0.05）。經(jīng)3周藥物干預(yù)后，貞芪扶正組、貞芪扶正聯(lián)合西藥組逃避潛伏期明顯低于模型組（P<0.05）；西藥組和模型組的逃避潛伏期接近，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在空間搜索實(shí)驗(yàn)中，造模成功后，模型組跨臺(tái)次數(shù)較正常對(duì)照組少，目標(biāo)區(qū)域游泳時(shí)間較正常對(duì)照組明顯縮短（P<0.05）。治療3周后，貞芪扶正組、貞芪扶正聯(lián)合西藥組跨臺(tái)次數(shù)和在目標(biāo)區(qū)域游泳時(shí)間均明顯高于模型組和

7、西藥組（P<0.05）。
　　（4）各組小鼠腦組織中TPH2 mRNA、AchE mRNA表達(dá)的比較：模型組小鼠腦組織中TPH2 mRNA和AchE mRNA較正常對(duì)照組比較表達(dá)下調(diào)(P<0.05)；與模型組和西藥組比較，貞芪扶正聯(lián)合西藥組、貞芪扶正組小鼠腦組織中TPH2mRNA和AchEmRNA表達(dá)上調(diào)且接近正常對(duì)照組水平(P<0.05)。
　　（5）各組小鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)的比較：模型組和西藥組小鼠海馬CA1、CA3區(qū)神

8、經(jīng)元數(shù)目減少，脫失現(xiàn)象明顯，神經(jīng)纖維稀疏，排列紊亂，神經(jīng)細(xì)胞核固縮、濃染、碎裂、溶解，染色質(zhì)邊集。貞芪扶正聯(lián)合西藥組和貞芪扶正組與正常對(duì)照組接近，神經(jīng)元排列整齊，呈多層，細(xì)胞核圓而大，核仁清晰。
　　結(jié)論：1、采用靜室吸入式苯染毒的方法在高苯濃度(2000mg/m3)環(huán)境喂養(yǎng)小鼠3周后，小鼠認(rèn)知能力減退。2、貞芪扶正膠囊可改善慢性苯中毒小鼠的外周血象。3、貞芪扶正膠囊可提高慢性苯中毒小鼠的認(rèn)知能力，其機(jī)制可能與貞芪扶正膠囊調(diào)節(jié)腦組