膠原交聯(lián)對(duì)兔角膜堿燒傷新生血管影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本研究擬通過(guò)觀察兔眼堿燒傷誘導(dǎo)角膜新生血管模型經(jīng)核黃素聯(lián)合紫外光A行角膜膠原交聯(lián)(corneal collagen cross linking，CXL)后新生血管的生長(zhǎng)，探索CXL對(duì)角膜新生血管的影響及機(jī)制。
　　方法：健康家兔60只，隨機(jī)分為6組，每組10只，右眼為實(shí)驗(yàn)眼；A組為單純堿燒傷對(duì)照組，B、C、D、E、F組為實(shí)驗(yàn)組，其中B組為堿燒傷后即刻標(biāo)準(zhǔn)CXL（標(biāo)準(zhǔn)CXL方法為紫外光光照30分鐘）、C組為堿燒傷后即刻CXL紫

2、外光光照時(shí)間15分鐘、D組為堿燒傷后即刻CXL紫外光光照時(shí)間45分鐘、E組為堿燒傷后1天標(biāo)準(zhǔn)CXL、F組為堿燒傷后3天標(biāo)準(zhǔn)CXL，表麻下予1 mol/L的氫氧化鈉建立堿燒傷模型及膠原交聯(lián)干預(yù)各組模型。堿燒傷模型建成后分別于第4、7、10、14天觀察并記錄角膜新生血管面積、角膜水腫、感染、潰瘍，于第7、14天分別各取5只家兔角膜組織，采用Western-Blotting分析VEGF、MMP-2、MMP-9、TIMP-1的表達(dá)量。
　

3、　結(jié)果：1.術(shù)后裂隙燈觀察：第14天處死各組家兔，單純堿燒傷對(duì)照組10眼中有5只眼（50％）發(fā)生角膜中央基質(zhì)溶解、后彈力層膨出；實(shí)驗(yàn)組共50只眼，其中有7只眼（14%）出現(xiàn)角膜中央變薄，3只眼（6%）出現(xiàn)角膜溶解，各組均未發(fā)生角膜穿孔。
　　2.角膜新生血管（CRNV）面積比較：第4天：各組間比較無(wú)顯著差異（P>0.05）；第7天：各組間比較有顯著差異（P<0.05），其中以A組CRNV面積最大、D組CRNV面積最??；第10天：A

4、與D組、A與E組間相比有顯著差異（P<0.05），D、E組CRNV面積較A組顯著減小。第14天：A與D組、B與D組間及F與D組間相比較有顯著差異（P<0.05），D組較A、B、F組的CRNV面積顯著減小。
　　3.Werstern-Blotting檢測(cè)VEGF、MMP-2、MMP-9和TIMP-1表達(dá)量的比較：在兔眼角膜堿燒傷后第7天，對(duì)照組與各實(shí)驗(yàn)組之間VEGF、MMP-2在角膜組織中的表達(dá)量無(wú)顯著差異（P＞0.05）；MMP-

5、9的表達(dá)量在A組顯著低于各個(gè)實(shí)驗(yàn)組（P<0.05）；TIMP-1的表達(dá)量比較中A組顯著低于D、F組（P<0.05）；在角膜堿燒傷后第14天，對(duì)照組A組角膜組織中VEGF、MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表達(dá)量均較前上升，其中對(duì)照組A組VEGF表達(dá)量顯著高于各個(gè)實(shí)驗(yàn)組（P<0.05），A組角膜中MMP-2表達(dá)量顯著高于B、D、E組（P<0.05）；A組角膜組織中MMP-9、TIMP-1表達(dá)量均高于各個(gè)實(shí)驗(yàn)組，但未達(dá)到顯著差異水平（P