膠原交聯(lián)對(duì)兔角膜穿通傷瘢痕愈合的生物力學(xué)影響.pdf

1、目的：
　　探討核黃素聯(lián)合紫外光A（Ultraviolet-A，UVA）誘導(dǎo)兔眼角膜穿通傷膠原交聯(lián)（corneal collagen crosslinking,CXL）后對(duì)角膜瘢痕的生物力學(xué)的影響，為預(yù)防外傷性角膜葡萄腫的形成探索新方法。
　　方法：
　　選86只健康家兔。80只隨機(jī)分為正常對(duì)照組（A組）和實(shí)驗(yàn)組（B、C、D3組，均制作角膜全層穿通傷模型），B組（單純縫合組）、C組（縫合+術(shù)后即刻CXL）、D組（縫合+

2、第7天CXL），B、C、D每組又根據(jù)不同處死時(shí)間（4周、6周、8周）分為a、b、c3組，即Ba、Bb、Bc；Ca、Cb、Cc；Da、Db、Dc組，每組8只。在相應(yīng)的時(shí)間統(tǒng)一取4mm×10mm角膜試件在生物力學(xué)實(shí)驗(yàn)機(jī)上進(jìn)行角膜拉伸，記錄每個(gè)角膜瘢痕試件所拉伸的應(yīng)力、應(yīng)變，然后計(jì)算在10％應(yīng)變時(shí)的楊氏模量（Young's modulus,E），繪制應(yīng)力-應(yīng)變曲線。根據(jù)所測(cè)出的CXL組及單純縫合組中生物力學(xué)特性最強(qiáng)組，按相應(yīng)的處理方法再次建模

3、，每組3只，通過(guò)蛋白免疫印跡（Western Boltting,WB）檢測(cè)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（Alpha smooth muscle action，α-SMA）表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　?。?）角膜瘢痕最大的應(yīng)力：A組為5.71±1.29MPa, B組：Ba、Bb、Bc組分別為1.37±0.62MPa，2.21±0.30MPa，3.14±0.74MPa；C組：Ca、Cb、Cc組分別為1.87±0.56MPa，2.83±0.5

4、4MPa，3.26±0.83MPa；D組：Da、Db、Dc組分別為2.17±0.52MPa，2.92±0.63MPa，4.21±0.68MPa。與A組比較，各組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.00），即穿通傷后所形成的瘢痕的應(yīng)力較正常角膜明顯降低。楊氏模量：A組為：16.37±4.06MPa；B組：Ba、Bb、Bc組分別為4.64±1.69MPa，7.75±0.82MPa，9.02±0.87MPa；C組：Ca、Cb、Cc組分別為9.67±2.4

5、2MPa，10.67±2.07MPa，11.08±1.61MPa；D組：Da、Db、Dc組分別為10.94±1.57MPa，11.16±2.50MPa，13.36±2.10MPa。除了Dc組與A組織比較（P=0.007），其余與A組比較，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.00），即穿通傷后所形成的瘢痕的楊氏模量明顯降低。
　?。?）組內(nèi)最大應(yīng)力比較：隨時(shí)間推移，應(yīng)力明顯增加。Ba與Bb相比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.026），Bb與Bc3組相

6、比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.015）；Ca與Cb相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.010）,而Cb與Cc組無(wú)明顯差異（P=0.235）；Da與Db相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.042），Db與Dc相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.01）。
　　（3）組內(nèi)楊氏模量比較：隨時(shí)間推移，單純縫合組楊氏模量在增加，在第6周后增加緩慢，縫合后第7天CXL在第8周最強(qiáng)，而縫合后即刻CXL雖呈增加趨勢(shì)，但變化較為緩慢。Ba、Bb、Bc3組相比，Ba與Bb有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異

7、（P=0.008）, Bb相比Bc相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.264）；Ca、Cb、Cc3組相比，Ca與Cb相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.364），Cb與Cc相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.707）；Da與Db相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.842），Db與Dc相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.047）。
　?。?）組間最大應(yīng)力比較：總體上看，單純縫合后形成的瘢痕的應(yīng)力低于縫合后第7天CXL后的應(yīng)力。Ba、Ca、Da3組相比，Ba與Ca比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（

8、P=0.181）， Ca與Da相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.405），Ba與Da相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.034）；Bb、Cb、Db3組相比，Bb與Cb相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.094），Cb與Db相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.805）；Bc、Cc、Dc3組相比，除Bc與Cc組對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.764），Cc與Dc相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.010），Bc與Dc相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.005）。
　?。?）組間楊氏模量比較：總

9、體上看，單純縫合后所形成的瘢痕的抗變形能力低于縫合后第7天CXL的。Ba、Ca、Da3組相比，Ba與Ca及Da相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P值均=0.000），Ca與Da組對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.249）；Bb、Cb、Db3組相比， Bb與Cb及Da對(duì)比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P分別為0.009、0.003），Cb與Db對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.654）；Bc、Cc、Dc3組相比，Bc與Cc組對(duì)比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.072），Cc及Dc相比有統(tǒng)計(jì)

10、學(xué)差異（P=0.040）。
　　（6）WB的結(jié)果顯示：兔角膜穿通傷單純縫合組與縫合+第7天CXL的α-SMA的表達(dá)比率分別為0.28±0.11和0.65±0.20，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.048）。
　　結(jié)論：
　　（1）兔角膜穿通傷縫合術(shù)后所形成的瘢痕的生物力學(xué)特性隨時(shí)間延長(zhǎng)而增強(qiáng)，本次實(shí)驗(yàn)在第8周最強(qiáng)。
　?。?）CXL可以增強(qiáng)兔角膜穿通傷形成瘢痕的生物力學(xué)特性，隨時(shí)間推移抗生物力學(xué)特性逐漸增強(qiáng)，在兔角膜穿