核黃素-紫外線(xiàn)A膠原交聯(lián)對(duì)角膜膠原纖維重塑及生物力學(xué)穩(wěn)定性的影響.pdf

1、目的：以核黃素-紫外線(xiàn)A角膜膠原交聯(lián)（cornealcollagencross-linking，CXL）術(shù)后兔眼角膜基質(zhì)細(xì)胞和膠原纖維作為觀(guān)察對(duì)象，通過(guò)了解CXL術(shù)后角膜基質(zhì)細(xì)胞和膠原纖維的變化規(guī)律，探討角膜膠原纖維重塑在CXL術(shù)后生物力學(xué)穩(wěn)定性的作用；初步評(píng)價(jià)CXL治療進(jìn)展期圓錐角膜的安全性、有效性。
　　方法：1.健康新西蘭白兔15只，隨機(jī)分為3組，右眼行CXL手術(shù)，左眼為正常對(duì)照，分別于術(shù)后1d、7d、4w取兔眼角膜，行HE

2、和a-SMA染色、TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡。2.對(duì)CXL術(shù)后角膜行苦味酸天狼星紅染色和角膜應(yīng)力-應(yīng)變測(cè)量，記錄CXL術(shù)后膠原蛋白成分的變化、最大載荷、最大應(yīng)力和彈性模量。3.選擇13例(22只眼)進(jìn)展期圓錐角膜,接受CXL治療，于術(shù)前和術(shù)后1月、3月、6月和12個(gè)月復(fù)查，檢查指標(biāo)包括視力、角膜地形圖、角膜活體共焦鏡和角膜內(nèi)皮計(jì)數(shù)等。
　　結(jié)果：1.正常角膜基質(zhì)主要為致密結(jié)締組織，角膜基質(zhì)細(xì)胞散在分布于其中。CXL術(shù)后1d，術(shù)區(qū)基質(zhì)

3、中僅偶見(jiàn)基質(zhì)細(xì)胞，角膜上皮細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞均可見(jiàn)大量凋亡細(xì)胞。術(shù)后7d，角膜基質(zhì)細(xì)胞水腫、數(shù)量減少，角膜基質(zhì)細(xì)胞和上皮細(xì)胞凋亡數(shù)量均較術(shù)后1d減少。術(shù)后4w，角膜基本保持正常厚度，角膜基質(zhì)細(xì)胞和上皮細(xì)胞凋亡數(shù)量顯著減少。術(shù)后7d和4w，角膜基質(zhì)見(jiàn)部分細(xì)胞a-SMA染色呈陽(yáng)性。2.正常角膜基質(zhì)可見(jiàn)分布均勻、以紅色為主的I型膠原，其間可見(jiàn)少量纖細(xì)、綠色的Ⅲ型膠原；術(shù)后7d，Ⅲ型膠原纖維明顯增多，且纖維明顯變粗；術(shù)后4w，Ⅲ型膠原纖維顯著增多粗

4、大，與I型膠原間雜分布。CXL術(shù)后不同觀(guān)察時(shí)期角膜的彈性模量均較正常對(duì)照組增加。CXL術(shù)后1d橫向比縱向彈性模量增加的量有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。3.圓錐角膜患者接受CXL術(shù)后12個(gè)月裸眼視力和最佳矯正視力分別較術(shù)前提高0.115±0.158LogMAR單位和0.114±0.218LogMAR單位。術(shù)后12個(gè)月Kmax值和散光分別較術(shù)前降低1.893±3.713D和0.117±1.488D。角膜厚度術(shù)后1月時(shí)減少27.5±26.8μm，術(shù)后12個(gè)月

5、時(shí)角膜厚度與術(shù)前相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。術(shù)后角膜內(nèi)皮、眼壓、晶狀體和眼底無(wú)明顯變化。
　　結(jié)論：1.CXL術(shù)后兔眼角膜基質(zhì)細(xì)胞主要通過(guò)凋亡途徑明顯減少，周?chē)|(zhì)細(xì)胞通過(guò)增殖補(bǔ)充凋亡的基質(zhì)細(xì)胞的丟失，新生基質(zhì)細(xì)胞通過(guò)活化形成成肌纖維細(xì)胞參與到角膜基質(zhì)的重塑。2.CXL術(shù)后角膜各型膠原比例、分布發(fā)生改變，提示角膜基質(zhì)膠原纖維發(fā)生重塑，CXL可以長(zhǎng)期增加角膜的生物力學(xué)強(qiáng)度，其效應(yīng)的維持可能與膠原纖維的重塑有關(guān)。3.CXL可以阻止進(jìn)展期圓