胰島素樣生長因子-1受體在人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞及組織中的表達(dá).pdf

1、目的：
　　體外實(shí)驗(yàn)細(xì)胞水平檢測IGF-1R單克隆抗體對人體非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖及侵襲力的影響；大體標(biāo)本免疫組化水平檢測IGF-1R在人體非小細(xì)胞肺癌不同病理分型、不同分期、不同分化程度表達(dá)的差異，對人體非小細(xì)胞肺癌的早期診斷提供新的方法，針對IGF-1R通路進(jìn)行基因靶向治療的理論和實(shí)踐基礎(chǔ)進(jìn)行了充分的論證。
　　方法：
　　本研究分為兩個(gè)部分：在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)培養(yǎng)人肺鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞的細(xì)胞株和人肺腺癌細(xì)胞的細(xì)胞株，并進(jìn)行顯微

2、鏡觀察和免疫組化鑒定。MTT方法檢測人體肺鱗狀細(xì)胞癌的細(xì)胞和肺腺癌的細(xì)胞的影響，分別以用IGF-1R單克隆抗體100μg/ml、10μg/ml、5μg/ml、1μg/ml的 IGF-IR單克隆抗體作用人肺腺癌細(xì)胞的人肺鱗癌細(xì)胞48小時(shí)，檢測IGF-1R單克隆抗體人非小細(xì)胞癌細(xì)胞增殖的影響并繪制曲線。Transwell小室法檢測空白對照組、IGF-1R單克隆抗體組兩組細(xì)胞的遷移和侵襲能力，觀察對人肺腺癌細(xì)胞的人肺鱗癌細(xì)胞侵襲力的影響，并繪

3、制曲線；通過對48例肺癌鱗狀細(xì)胞癌、35例肺腺癌大體標(biāo)本，采用免疫組織化學(xué)方法進(jìn)行IGF-1R檢測，比較IGF-1R在肺鱗狀細(xì)胞癌、肺腺癌不同分期、不同分化程度表達(dá)中表達(dá)的差異。
　　結(jié)果：
　　人非小細(xì)胞癌細(xì)胞培養(yǎng)48h后，肺癌細(xì)胞喪失正常的接觸抑制，呈多層性生長，生長代謝極其旺盛，倍增的時(shí)間大大縮短，飽和密度變大，分裂指數(shù)較正常細(xì)胞增高，具有無限增殖能力，并且細(xì)胞的浸潤能力較正常細(xì)胞強(qiáng)；免疫組織化學(xué)方法檢測非小細(xì)胞肺癌細(xì)

4、胞中IGF-IR的表達(dá)，結(jié)果顯示，非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株普遍表達(dá)IGF-IR，以細(xì)胞膜和細(xì)胞漿的混合型表達(dá)為主,免疫組化著色后呈現(xiàn)棕黃色或棕色；MTT檢測顯示用100μg/ml、10μg/ml、5μg/ml、1μg/ml的 IGF-IR單克隆抗體作用非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞48小時(shí)，細(xì)胞的增殖受到抑制，抑制率分別為：（8.24±1.02）％、（12.58±0.94）%、（18.41±1.15）%、（21.02±0.87）%，隨著IGF-IR單克隆抗

5、體濃度的增加，細(xì)胞的增殖的被抑制率也隨之增加,不同單克隆抗體濃度組的組間兩兩相比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；Transwell小室法檢測空白對照組、IGF-1R單克隆抗體組細(xì)胞細(xì)胞遷移和侵襲能力，IGF-1R單克隆抗體組細(xì)胞的遷移和侵襲至Transwell小室濾膜下表面的癌細(xì)胞數(shù)均明顯低于空白對照組細(xì)胞(P<0.01)。IGF-1R特異性表達(dá)于人體肺鱗狀細(xì)胞癌，表達(dá)特異性和敏感性分別為57.1%、97.8%，與IGF-1R在