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文檔簡介
1、目的:
體外實驗細胞水平檢測IGF-1R單克隆抗體對人體非小細胞肺癌細胞增殖及侵襲力的影響;大體標本免疫組化水平檢測IGF-1R在人體非小細胞肺癌不同病理分型、不同分期、不同分化程度表達的差異,對人體非小細胞肺癌的早期診斷提供新的方法,針對IGF-1R通路進行基因靶向治療的理論和實踐基礎進行了充分的論證。
方法:
本研究分為兩個部分:在實驗室內培養(yǎng)人肺鱗狀細胞癌細胞的細胞株和人肺腺癌細胞的細胞株,并進行顯微
2、鏡觀察和免疫組化鑒定。MTT方法檢測人體肺鱗狀細胞癌的細胞和肺腺癌的細胞的影響,分別以用IGF-1R單克隆抗體100μg/ml、10μg/ml、5μg/ml、1μg/ml的 IGF-IR單克隆抗體作用人肺腺癌細胞的人肺鱗癌細胞48小時,檢測IGF-1R單克隆抗體人非小細胞癌細胞增殖的影響并繪制曲線。Transwell小室法檢測空白對照組、IGF-1R單克隆抗體組兩組細胞的遷移和侵襲能力,觀察對人肺腺癌細胞的人肺鱗癌細胞侵襲力的影響,并繪
3、制曲線;通過對48例肺癌鱗狀細胞癌、35例肺腺癌大體標本,采用免疫組織化學方法進行IGF-1R檢測,比較IGF-1R在肺鱗狀細胞癌、肺腺癌不同分期、不同分化程度表達中表達的差異。
結果:
人非小細胞癌細胞培養(yǎng)48h后,肺癌細胞喪失正常的接觸抑制,呈多層性生長,生長代謝極其旺盛,倍增的時間大大縮短,飽和密度變大,分裂指數(shù)較正常細胞增高,具有無限增殖能力,并且細胞的浸潤能力較正常細胞強;免疫組織化學方法檢測非小細胞肺癌細
4、胞中IGF-IR的表達,結果顯示,非小細胞肺癌細胞株普遍表達IGF-IR,以細胞膜和細胞漿的混合型表達為主,免疫組化著色后呈現(xiàn)棕黃色或棕色;MTT檢測顯示用100μg/ml、10μg/ml、5μg/ml、1μg/ml的 IGF-IR單克隆抗體作用非小細胞肺癌細胞48小時,細胞的增殖受到抑制,抑制率分別為:(8.24±1.02)%、(12.58±0.94)%、(18.41±1.15)%、(21.02±0.87)%,隨著IGF-IR單克隆抗
5、體濃度的增加,細胞的增殖的被抑制率也隨之增加,不同單克隆抗體濃度組的組間兩兩相比較,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);Transwell小室法檢測空白對照組、IGF-1R單克隆抗體組細胞細胞遷移和侵襲能力,IGF-1R單克隆抗體組細胞的遷移和侵襲至Transwell小室濾膜下表面的癌細胞數(shù)均明顯低于空白對照組細胞(P<0.01)。IGF-1R特異性表達于人體肺鱗狀細胞癌,表達特異性和敏感性分別為57.1%、97.8%,與IGF-1R在
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