胰島素受體-胰島素樣生長(zhǎng)因子受體激活誘導(dǎo)HER-2陽(yáng)性胃癌細(xì)胞對(duì)拉帕替尼的耐藥.pdf

1、背景:HER-2基因擴(kuò)增或過表達(dá)見于20％的胃癌。針對(duì)HER-2的靶向治療不但在乳腺癌獲得了成功，在胃癌也開展了一系列的臨床研究。例如抗HER-2的曲妥珠單抗在晚期胃癌中的Ⅲ期臨床試驗(yàn)獲得成功，證明在胃癌中靶向HER-2治療具有良好的臨床應(yīng)用前景。拉帕替尼是一個(gè)靶向HER-2和EGFR的雙靶點(diǎn)小分子抑制劑，在晚期胃癌的Ⅱ期試驗(yàn)中，證實(shí)能明顯延長(zhǎng)HER-2陽(yáng)性病人的生存時(shí)間。但是，Ⅲ期臨床試驗(yàn)雖然有延長(zhǎng)生存的趨勢(shì)，但沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的顯著性

2、。在獲得疾病控制患者中，部分又很快進(jìn)展。因此，探索原發(fā)耐藥和獲得性耐藥是提高拉帕替尼療效和個(gè)體化治療的重要參考。既往許多證據(jù)表明，酪氨酸激酶受體旁通路激活引起下游PI3K/AKT/mTOR或Ras/Raf/MAPK通路激活可導(dǎo)致靶向HER-2的治療耐藥。本課題在高通量慢病毒篩選的基礎(chǔ)上，從幾個(gè)可能的耐藥相關(guān)基因中挑選了胰島素受體(insulin receptor，IR)和胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(insulin-likegrowth fa

3、ctor1 receptor，IGF1R)進(jìn)行深入研究，探討IR和IGF1R在HER-2陽(yáng)性胃癌細(xì)胞對(duì)拉帕替尼耐藥過程中所起的作用及其機(jī)制。
　　方法:N87、SNU216是HER-2陽(yáng)性的人胃癌細(xì)胞系，均對(duì)拉帕替尼敏感。siRNA驗(yàn)證IR下調(diào)是否增加拉帕替尼在N87和SNU216中的毒性作用。藥物協(xié)同試驗(yàn)用于驗(yàn)證抑制HER-2和抑制IR/IGF1R是否有協(xié)同作用?？寺⌒纬稍囼?yàn)用于驗(yàn)證胰島素激活I(lǐng)R可否引起拉帕替尼在N87和SNU

4、216中耐藥。Western Blot用于驗(yàn)證胰島素激活I(lǐng)R/IGF1R引起拉帕替尼耐藥的原理。
　　結(jié)果:用siRNA下調(diào)IR可增強(qiáng)拉帕替尼的抑制作用。同時(shí)抑制HER-2和IR/IGF1R有協(xié)同作用。胰島素可引起兩個(gè)胃癌細(xì)胞系對(duì)拉帕替尼耐藥，western blotting表明該耐藥效果是由于激活I(lǐng)R/IGF1R，繼而激活下游被拉帕替尼抑制的AKT。
　　結(jié)論:IR/IGF1R能引起HER-2陽(yáng)性胃癌細(xì)胞對(duì)拉帕替尼耐藥，機(jī)