胰島素樣生長因子-1聯(lián)合外源性轉錄因子誘導小鼠iPS細胞的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分，胰島素樣生長因子-1聯(lián)合四因子(OSKM)誘導小鼠iPS細胞的研究
　　目的:研究胰島素樣生長因子-1(IGF-1)在iPS細胞重編程過程中的作用。
　　方法:1.利用含IGF-1的成纖維細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)小鼠成纖維細胞3天,此為實驗組。
　　2.利用不含IGF-1成纖維細胞培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)小鼠成纖維細胞3天,此為對照組。
　　3.分別對兩組成纖維細胞用含Oct4,Sox2,Klf4和c-Myc因子的

2、四種逆轉錄病毒顆粒進行感染,對形成的iPS細胞進行鑒定。
　　結果:對照組感染病毒后第21天出現(xiàn)類似胚胎干(embryonicstem;ES)細胞形態(tài)的克隆,共計4個克隆出現(xiàn),誘導效率約為0.01％。IGF-1處理后的實驗組感染病毒后第18天出現(xiàn)類似ES細胞形態(tài)的克隆,共計15個克隆出現(xiàn),誘導效率約為0.05%。實驗組的AP染色及SSEA-1、Oct4染色鑒定均為陽性,且誘導效率較對照組提高近5倍。
　　結論:IGF-1在i

3、PS細胞重編程中發(fā)揮著重要作用,其可以提高四因子體系的誘導效率。
　　第二部分，胰島素樣生長因子-1聯(lián)合三因子(OSK)誘導小鼠iPS細胞的研究
　　目的:研究胰島素樣生長因子-1(IGF-1)在降低iPS細胞致癌性方面的作用。
　　方法:1.利用含IGF-1的成纖維細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)成纖維細胞3天,此為實驗組。
　　2.在相同條件下,用不含IGF-1的成纖維細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)小鼠成纖維細胞3天,此為對照組。
　　

4、3.分別對兩組成纖維細胞用含Oct4,Sox2和Klf4因子的三種逆轉錄病毒顆粒進行感染,對形成的iPS細胞進行鑒定。
　　結果:對照組經病毒感染后未出現(xiàn)具有ES細胞形態(tài)的克隆。IGF-1處理后的實驗組感染病毒后第20天出現(xiàn)類似ES細胞形態(tài)的克隆,共計3個克隆出現(xiàn),誘導效率約為0.01%。實驗組的iPS細胞AP染色及SSEA-1、Oct4染色鑒定均為陽性。
　　結論:IGF-1在降低iPS細胞的致癌性方面起著重要作用,且聯(lián)合

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