Toll樣受體3對(duì)胰島β細(xì)胞增殖及胰島素分泌的影響.pdf

1、Toll樣受體(Toll like receptors，TLRs)是一種模式識(shí)別受體，廣泛分布于多種細(xì)胞（如多形核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等）。TLRs樣受體可激活體內(nèi)天然免疫系統(tǒng)，誘導(dǎo)炎性介質(zhì)釋放，進(jìn)而導(dǎo)致某些疾病的發(fā)生。近年來(lái)，大量研究表明1型和2型糖尿病患者血糖水平及胰島素抵抗指數(shù)與Toll樣受體過(guò)度活化密切相關(guān)，推測(cè)其在1型糖尿病和2型糖尿病β細(xì)胞衰竭中發(fā)揮著重要作用。
　　到目前為止，已在哺乳動(dòng)物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)至少13種TLR

2、s[1]，其中TLR3在機(jī)體抗病毒免疫中發(fā)揮著重要作用，它可識(shí)別病毒來(lái)源的dsRNA及其類似物聚肌胞(polyinosinic polycytidylic acid，PIC)，誘導(dǎo)抗病毒效應(yīng)，但同時(shí)也可免疫損傷自身機(jī)體功能。TLR3在心、腦、肺、肌肉、胎盤和胰腺組織中都有表達(dá)，而在胎盤和胰腺組織中的表達(dá)水平較高[2]。有報(bào)道稱[3-4]TLR3的激活能顯著抑制內(nèi)皮細(xì)胞及神經(jīng)祖細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;有文獻(xiàn)報(bào)道[5]TLR3激活能促進(jìn)胰

3、島β細(xì)胞凋亡，然而TLR3的激活對(duì)胰島β細(xì)胞增殖及其生物學(xué)功能調(diào)節(jié)的影響尚不明確。
　　目的：
　　研究選用小鼠胰島β細(xì)胞株（NIT-1）為研究對(duì)象，用Toll樣受體3(Toll like receptors，TLR3)激動(dòng)劑Poly(I∶C)刺激小鼠胰島β細(xì)胞，旨在探討該刺激對(duì)細(xì)胞增殖，炎性因子表達(dá)及胰島素分泌的影響。
　　方法：
　　用小鼠胰島β細(xì)胞株NIT-1為研究對(duì)象，首先測(cè)定胰島素釋放以鑒定胰島β細(xì)胞生

4、物學(xué)活性，再將實(shí)驗(yàn)分為不同濃度PIC(0.1，1，10ug/ml)處理組及空白對(duì)照組，檢測(cè)如下指標(biāo):
　　1.CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖;
　　2.酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測(cè)炎性因子IL-1β，IL-6及TNF-α表達(dá)1
　　3.葡萄糖刺激下的胰島素釋放試驗(yàn)(glucose stimulatedinsulin secretion，GSIS)測(cè)定NIT-1細(xì)胞胰島素分泌功能。
　　結(jié)果：
　　1.NIT-1細(xì)

5、胞株呈貼壁、成簇及多邊形生長(zhǎng)。胰島β細(xì)胞生物學(xué)活性較好;
　　2.與對(duì)照組相比，用不同濃度PIC(0.1，1，10ug/ml)刺激時(shí)，NIT-1細(xì)胞增殖明顯受到抑制，且呈劑量依耐性(P＜0.05);
　　3.與對(duì)照組相比，PIC刺激組炎性因子（IL-1β，IL-6及TNF-α）表達(dá)明顯高于對(duì)照組（P＜0.05）;
　　4.對(duì)照組相比，PIC刺激組可顯著抑制高糖介導(dǎo)下的NIT-1細(xì)胞分泌胰島素(P＜0.05)。