Toll樣受體3對胰島β細胞增殖及胰島素分泌的影響.pdf

1、Toll樣受體(Toll like receptors，TLRs)是一種模式識別受體，廣泛分布于多種細胞（如多形核細胞、巨噬細胞、淋巴細胞等）。TLRs樣受體可激活體內(nèi)天然免疫系統(tǒng)，誘導炎性介質釋放，進而導致某些疾病的發(fā)生。近年來，大量研究表明1型和2型糖尿病患者血糖水平及胰島素抵抗指數(shù)與Toll樣受體過度活化密切相關，推測其在1型糖尿病和2型糖尿病β細胞衰竭中發(fā)揮著重要作用。
　　到目前為止，已在哺乳動物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)至少13種TLR

2、s[1]，其中TLR3在機體抗病毒免疫中發(fā)揮著重要作用，它可識別病毒來源的dsRNA及其類似物聚肌胞(polyinosinic polycytidylic acid，PIC)，誘導抗病毒效應，但同時也可免疫損傷自身機體功能。TLR3在心、腦、肺、肌肉、胎盤和胰腺組織中都有表達，而在胎盤和胰腺組織中的表達水平較高[2]。有報道稱[3-4]TLR3的激活能顯著抑制內(nèi)皮細胞及神經(jīng)祖細胞的增殖并誘導細胞凋亡;有文獻報道[5]TLR3激活能促進胰

3、島β細胞凋亡，然而TLR3的激活對胰島β細胞增殖及其生物學功能調節(jié)的影響尚不明確。
　　目的：
　　研究選用小鼠胰島β細胞株（NIT-1）為研究對象，用Toll樣受體3(Toll like receptors，TLR3)激動劑Poly(I∶C)刺激小鼠胰島β細胞，旨在探討該刺激對細胞增殖，炎性因子表達及胰島素分泌的影響。
　　方法：
　　用小鼠胰島β細胞株NIT-1為研究對象，首先測定胰島素釋放以鑒定胰島β細胞生

4、物學活性，再將實驗分為不同濃度PIC(0.1，1，10ug/ml)處理組及空白對照組，檢測如下指標:
　　1.CCK-8法檢測細胞增殖;
　　2.酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測炎性因子IL-1β，IL-6及TNF-α表達1
　　3.葡萄糖刺激下的胰島素釋放試驗(glucose stimulatedinsulin secretion，GSIS)測定NIT-1細胞胰島素分泌功能。
　　結果：
　　1.NIT-1細

5、胞株呈貼壁、成簇及多邊形生長。胰島β細胞生物學活性較好;
　　2.與對照組相比，用不同濃度PIC(0.1，1，10ug/ml)刺激時，NIT-1細胞增殖明顯受到抑制，且呈劑量依耐性(P＜0.05);
　　3.與對照組相比，PIC刺激組炎性因子（IL-1β，IL-6及TNF-α）表達明顯高于對照組（P＜0.05）;
　　4.對照組相比，PIC刺激組可顯著抑制高糖介導下的NIT-1細胞分泌胰島素(P＜0.05)。