酒精對胰島β細胞胰島素分泌及凋亡影響的研究.pdf

1、本課題擬在體外觀察酒精直接對胰島β細胞胰島素分泌功能和凋亡的影響并探討相關機制，以期揭示酒精與糖尿病患病危險性之間關系的機理，為指導人們合理消費酒精飲料提供科學依據。本研究主要包括三部分，現將結果報告如下： 第一部分:大鼠胰島的原代培養(yǎng)及小鼠胰島瘤細胞(NIT-1細胞)培養(yǎng)方法的建立 一.大鼠胰島的原代培養(yǎng)及鑒定 目的:建立大鼠胰島的原代培養(yǎng)方法，為本課題研究提供足夠純凈、存活且具有良好功能的胰島。 結論

2、:通過對胰島分離純化方法的摸索和改進，我們認為本實驗使用單一的Histopaque-1077進行純化，是一種能夠獲得大量純度較高且活性好的胰島的高效簡便的分離方法，為深入進行相關研究奠定了基礎。 二.小鼠胰島瘤細胞(NIT-1細胞)培養(yǎng)及胰島素分泌功能鑒定 目的:分泌胰島素的細胞為胰島β細胞，為了更深入研究酒精對胰島β細胞功能和凋亡的影響，我們把一種胰島β細胞系即小鼠胰島瘤細胞(NIT-1細胞)亦作為研究對象。對NIT-

3、1細胞分泌胰島素功能進行鑒定并選擇最適合的培養(yǎng)條件是本部分的研究目的。 結論:NIT-1最適宜的培養(yǎng)條件為含5.6mmol/L葡萄糖濃度的DMEM培養(yǎng)基。用于本實驗研究的NIT-1細胞具有良好的胰島素分泌功能和對不同濃度葡萄糖刺激的良好的反應能力。 第二部分:酒精對胰島β細胞分泌胰島素功能的影響及相關機制研究 一.酒精對胰島β細胞分泌胰島素功能影響的研究 目的:觀察不同劑量酒精作用不同時間后，葡萄糖刺激的

4、胰島素分泌(GSIS)情況從而揭示酒精對胰島β細胞分泌胰島素功能影響的規(guī)律。 結論:酒精對胰島β細胞胰島素分泌的影響與酒精作用時間、劑量有關。 二.酒精對NIT-1細胞胰島素(INS)、細胞色素氧化酶Ⅱ(CytochromeoxidaseⅡ，COXⅡ)以及大鼠原代培養(yǎng)胰島INSmRNA表達的影響 目的:選取在葡萄糖刺激胰島素分泌過程中的兩個關鍵環(huán)節(jié)即胰島素基因和細胞色素氧化酶Ⅱ基因mRNA表達的變化探討酒精對胰島

5、β細胞分泌胰島素功能影響的機理。 結論:酒精對胰島β細胞INSmRNA、COXⅡmRNA表達改變可能是其影響胰島素分泌功能改變的有關機制。 第三部分酒精對NIT-1細胞凋亡作用 一.酒精對NIT-1細胞凋亡的影響 目的:觀察酒精對NIT-1細胞凋亡的影響. 結論：酒精可以誘導NIT-1細胞發(fā)生凋亡。 二.酒精對NIT-1細胞凋亡機制的探討 目的:從氧化應激的角度探討酒精誘導NIT-