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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:通過體外培養(yǎng)小鼠胰島細(xì)胞,研究脂聯(lián)素對(duì)胰島β細(xì)胞分泌胰島素的影響,探討脂聯(lián)素糖尿病發(fā)病中的可能作用機(jī)制。
方法:采用膠原酶消化法提取胰島細(xì)胞培養(yǎng)。膠原酶v從膽總管逆行灌注胰腺進(jìn)行消化,體視顯微鏡下進(jìn)行手挑純化。細(xì)胞分2組,脂聯(lián)素組和對(duì)照組。脂聯(lián)素組中加入100ug/L的重組小鼠脂聯(lián)素,其余成分同對(duì)照組。在胰島素釋放試驗(yàn)中,各組再按緩沖液葡萄糖濃度分為葡萄糖2.8mmol/L組、5.6mmol/L組、11.2mmol/
2、L組和16.7mmol/L組,收集上清液,應(yīng)用ELISA測(cè)定胰島素濃度。
結(jié)果:胰島細(xì)胞在2.8mmol/L和5.6mmol/L葡萄糖濃度時(shí)培養(yǎng)1h、12h、24h,與對(duì)照組比較,脂聯(lián)素組胰島細(xì)胞培養(yǎng)24h的胰島素分泌量明顯下降,具有顯著差異(P<0.05);與對(duì)照組比較,在11.2mmol/L與16.7mmol/L葡萄糖濃度時(shí),脂聯(lián)素組胰島細(xì)胞培養(yǎng)1h胰島素分泌量顯著下降,(P<0.05)。在16.7mmol/L葡萄糖濃
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