脂聯(lián)素對高糖環(huán)境下胰島細胞分泌功能及胰島素抵抗的影響.pdf

1、目的：(1)觀察脂聯(lián)素對胰島細胞分泌胰島素的影響，以探討脂聯(lián)素保護胰島β細胞的可能機制。(2)建立3T3-L1脂肪細胞胰島素抵抗模型，觀察脂聯(lián)素對腺苷酸活化蛋白激酶(Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase，AMPK) Thr-172磷酸化水平和胰島素受體底物-1(insulin receptor substrate-1，IRS-1)酪氨酸磷酸化水平的影響，以探討脂聯(lián)素在胰島素抵抗

2、中的可能作用機制，為2型糖尿病的治療提供理論和實驗依據(jù)。
　　方法：(1)選擇體外培養(yǎng)胰島細胞INS-1，細胞傳至第3代，隨機分為4組:正常組（NG組）、正常組+脂聯(lián)素(100ug/L)、高糖組（HG組）、高糖組+脂聯(lián)素(100ug/L)。分別檢測脂聯(lián)素干預24、48、72h后胰島細胞分泌胰島素含量的變化。(2)將3T3-L1前脂肪細胞誘導分化為成熟的脂肪細胞，做為正常對照組，將上述誘導分化成熟的脂肪細胞換用軟脂酸繼續(xù)培養(yǎng)24小時

3、，制備3T3-L1脂肪細胞胰島素抵抗(IR)模型，脂聯(lián)素進行干預，分為正常對照組、IR模型組（不加任何藥物）、模型干預組（加入脂聯(lián)素100ug/L），分別測定葡萄糖含量，細胞內(nèi)糖原含量的變化以及westernblot檢測AMPK Thr-172磷酸化，IRS-1酪氨酸磷酸化的變化。
　　結(jié)果：(1)與正常組（5.5mmol/l）相比，經(jīng)脂聯(lián)素干預后的胰島細胞，其胰島素分泌量變化不明顯(P＞0.05);與高糖組(25.6mmol/l

4、)相比，經(jīng)脂聯(lián)素干預后的胰島細胞，其胰島素分泌持續(xù)增加(P＜0.05)。(2)與正常對照組相比，IR模型組培養(yǎng)液中葡萄糖含量明顯升高，細胞內(nèi)糖原含量顯著減少(P＜0.01);與IR模型組相比，模型干預組培養(yǎng)液中葡萄糖含量顯著降低，細胞內(nèi)糖原含量升高(P＜0.01)。與正常對照組相比，IR模型組AMPK Thr-172磷酸化水平，IRS-1酪氨酸磷酸化水平均明顯降低（P＜0.05）;與IR模型組相比，模型干預組AMPKThr-172磷酸化