雙歧桿菌乳桿菌三聯活菌片通過提高腸道防御功能預防大腸桿菌K1株感染.pdf

1、目的：
　　大腸桿菌引起的菌血癥和腦膜炎是導致新生兒死亡的嚴重感染性疾病。抗生素是目前預防及治療細菌性感染最主要的方法，但是隨著廣譜抗生素的不合理使用，耐藥性大腸桿菌發(fā)生率不斷增多。尋找一種有效的預防方法顯得越來越重要。益生菌作為一種對人體有益的細菌，其研究越來越受到人們的關注。將益生菌應用于早期新生兒菌血癥及細菌性腦膜炎的預防，可有效克服上述缺點。前期實驗中發(fā)現雙歧桿菌乳桿菌三聯活菌片（三聯活菌片）能夠有效預防新生乳鼠菌血癥及細

2、菌性腦膜炎，但是對于其具體機制卻不清楚。本實驗將分別從體內和體外證明E44是否對腸道屏障具有破壞作用及三聯活菌片是否能夠通過增強腸屏障功能抑制E44引起的菌血癥及腦膜炎。
　　方法：
　　本實驗用HT-29細胞構建體外腸屏障模型，新生SD大鼠乳鼠模擬體內腸屏障模型，將其分成四個不同的處理組:PBS組、三聯活菌片組、三聯活菌片加E44組、E44組。
　　結果：
　　1、體外競爭抑制實驗證明三聯活菌片對E44黏附侵襲

3、HT-29細胞的影響。實驗中發(fā)現三聯活菌片能夠抑制E44對HT-29細胞的黏附侵襲作用，且具有濃度依賴性;另一方面也發(fā)現三聯活菌片提前作用效果較三聯活菌片與E44共同作用效果更好。
　　2、細胞毒性及細胞凋亡檢測結果表明E44可以損傷細胞，增加細胞毒性及凋亡率，三聯活菌片可以降低E44引起的細胞損傷。
　　3、運用PAS染色法對HT-29細胞及乳鼠腸道染色發(fā)現，E44能夠降解粘蛋白(Mucin)，三聯活菌片可以抑制E44對M

4、ucin的降解;同時三聯活菌片還可以促進乳鼠體內Mucin的表達。
　　4、腸道屏障完整性檢測表明E44可以破壞細胞間緊密連接，從而增加腸屏障滲透性;加入三聯活菌片處理可以有效的抑制E44對緊密連接蛋白破壞，從而降低腸屏障滲透性。
　　5、體內實驗發(fā)現E44處理組中腸道分泌的IgA及ki67陽性細胞明顯降低，加入三聯活菌片可以改善上述情況;同時還發(fā)現三聯活菌片可以促進腸道IgA的表達及ki67陽性細胞增加。
　　結論：