PtFT基因不同轉(zhuǎn)錄本異位表達(dá)表型鑒定及嫁接信號(hào)轉(zhuǎn)移.pdf

1、目前大多數(shù)人認(rèn)同F(xiàn)T是植物體內(nèi)的成花素，其蛋白產(chǎn)物在植物體內(nèi)可以移動(dòng)并促進(jìn)早花，為果樹花期調(diào)控提供了一條新的途徑。本研究在實(shí)驗(yàn)室前期克隆獲得早實(shí)枳FT基因基礎(chǔ)上，構(gòu)建PtFT∷GUS融合表達(dá)載體，轉(zhuǎn)化煙草和普通枳，同時(shí)對(duì)其不同轉(zhuǎn)錄本的轉(zhuǎn)基因煙草表型進(jìn)行鑒定，并采用嫁接方法觀察PtFT基因的傳導(dǎo)效應(yīng)。主要研究結(jié)果如下所示:
　　1.構(gòu)建了PtFT∷GUS的融合表達(dá)載體，并進(jìn)行了野生型煙草和普通枳轉(zhuǎn)化，得到了11株煙草轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性苗，并

2、對(duì)其表型進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)，轉(zhuǎn)基因普通枳的再生芽目前正在生根。將其與野生型煙草的表型進(jìn)行對(duì)比發(fā)現(xiàn)PtFT∷GUS轉(zhuǎn)基因煙草與WT野生型煙草在株高、莖稈直徑、分枝數(shù)、開花時(shí)間、小花數(shù)以及種子數(shù)這些表型上有很大的差異。PtFT∷GUS轉(zhuǎn)基因煙草比WT野生型煙草的植株高度低、莖稈細(xì)、分枝多、開花早、小花數(shù)少、結(jié)實(shí)率低。并對(duì)PtFT∷GUS轉(zhuǎn)基因煙草進(jìn)行了GUS染色，顯色微弱。
　　2.種植PtFT轉(zhuǎn)基因煙草(PtFTDNA、PtFT1、PtFT

3、2、PtFT3和PtFT4)和野生型煙草(WT)，觀察并統(tǒng)計(jì)它們的表型差異。發(fā)現(xiàn)它們?cè)谌~片數(shù)、莖節(jié)數(shù)、株高、分枝數(shù)、莖稈直徑、開花天數(shù)上有明顯差異。WT與PtFT3和PtFT4的各種表型相同，這可能是PtFT3和PtFT4外顯子結(jié)構(gòu)不完整引起的。PtFT DNA、PtFT1、PtFT2的各種表型差異細(xì)微，幾乎相同，這表明內(nèi)含子對(duì)PtFT的早花功能和煙草的葉片數(shù)、莖節(jié)數(shù)、株高、分枝數(shù)、莖稈直徑幾乎沒(méi)有影響。WT、PtFT3、PtFT4和P

4、tFT DNA、PtFT1、PtFT2在葉片數(shù)、莖節(jié)數(shù)、株高、分枝數(shù)、莖稈直徑和開花天數(shù)方面有明顯的差異，這可能是PtFT DNA、PtFT1、PtFT2基因的插入造成的。
　　3.種植轉(zhuǎn)基因煙草（PtFT DNA和PtFTcDNA）和野生型煙草(WT)并對(duì)他們進(jìn)行相互嫁接和自身嫁接并進(jìn)行表型觀察和mRNA鑒定。WT/WT開花明顯晚于其他六種嫁接類型。說(shuō)明有信號(hào)移動(dòng)在接穗和砧木之間，改變了接穗的開花時(shí)間。其中WT/FTDNA和WT