紅皮云杉球果原花青素分離純化、配合物及體外抗氧化研究.pdf

1、原花青素是一類多酚物質(zhì)，具有特殊醫(yī)療保健功能，有廣泛的藥效和很小的副作用，在化妝品、保健品、藥品及多種飲料產(chǎn)品等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，開發(fā)應(yīng)用價值很高。本文以紅皮云杉球果鱗片為原料，對球果鱗片中的原花青素進行提取工藝優(yōu)化，研究純化工藝及原花青素一級精制物的抗氧化能力，并利用二次純化提高純度與Fe2+、Zn2+、牛血清蛋白配合性質(zhì)試驗，制備原花青素高聚體并對其進行水解工藝的研究，研究結(jié)果如下:
　　(1)通過采用13種不同極性的提取溶劑對紅

2、皮云杉球果鱗片中多酚類物質(zhì)進行提取，并測定總多酚、黃酮和原花青素的含量和13種粗提物的清除DPPH·能力，清除·OH能力和還原力;并分析活性物質(zhì)含量與抗氧化指標的相關(guān)性，研究表明，一定比例的丙酮和乙醇水溶液可以提高提取能力和抗氧化活性。原花青素是紅皮云杉球果鱗片多酚的主要組成部分，在提取物的整體抗氧化活性起到主導作用。
　　(2)通過單因素和響應(yīng)面方法優(yōu)化紅皮云杉球果原花青素提取工藝:提取劑60％乙醇，提取溫度51℃、提取時間2h

3、、料液比為1∶44(g/mL)，在此最佳條件下，提取紅皮云杉球果原花青素得率為(72.23±0.35)mg/g，
　　(3)通過篩選樹脂及單因素方法優(yōu)化條件，確定紅皮云杉球果原花青素D4020的純化工藝為:上樣濃度:2.5mg/mL;洗脫劑:60％乙醇;流速:2.5mL/min;徑高比:1∶25;最大上樣量:40mL;最大洗脫劑體積:200mL。純化前原花青素純度為(29.45±1.33)％，純化后純度:(60.57±1.78)％

4、，回收率:(88.27±3.18)％。體外抗氧化研究結(jié)果表明紅皮云杉球果原花青素精制物具有較強的自由基清除能力和還原能力，并且還原能力高于陽性對照Trolox。
　　(4)通過樹脂篩選及純化單因素考察，確定紅皮云杉球果原花青素NKA-9的二次純化工藝:上樣濃度:3.0mg/mL;洗脫劑:60％乙醇;徑高比:1∶25;洗脫劑pH:7，最大上樣量:40mL;最大洗脫劑體積:200mL。
　　配合試驗結(jié)果表明，原花青素與Fe2+螯

5、合的最佳條件:原花青素濃度為8mg/mL，溫度為30℃，pH為6。與Zn2+螯合的最佳條件:原花青素濃度為5mg/mL，溫度為40℃，pH為4。與牛血清蛋白絡(luò)合的最佳條件:原花青素濃度為3mg/mL，溫度為40℃，pH為6。配合物體外抗氧化活性研究:原花青素與Fe2+、Zn2+、牛血清蛋白的配合體，清除ABTS+·、DPPH·的能力和還原力較原花青素均有一定程度的增強。
　　(5)紅皮云杉球果鱗片原花青素高聚體水解工藝，亞硫酸為最