紅景天聯合黨參對小鼠急性酒精性肝損傷的保護作用.pdf

1、目的：隨著經濟的迅猛發(fā)展，我國已經成為酒類消費大國，而由此引發(fā)的一系列酒精性肝病已成為嚴重的公共衛(wèi)生問題。由于酒精性肝病的治療方法仍然有限，中草藥被認為是重要的替代方法，開發(fā)具有保護酒精性肝損傷的中藥類保健食品，具有重要的社會意義。本實驗根據前期血清藥理學實驗確定紅景天和黨參配伍的最佳比例，通過正交試驗優(yōu)選出紅景天和黨參提取液噴霧干燥的最佳工藝條件，并測定其噴霧干燥前后活性成分及抗氧化損失率。通過白酒誘導的小鼠急性酒精性肝損傷模型，比較

2、不同劑量的紅景天和黨參復方制劑保護肝臟的作用及其作用機制。為紅景天和黨參復方制劑保健功能的開發(fā)提供理論依據。
　　方法：
　　1.采用70％乙醇混合提取紅景天和黨參。通過正交試驗，優(yōu)選其噴霧干燥的最佳工藝條件。
　　2.采用HPLC法測定噴霧干燥后紅景天和黨參復方制劑中紅景天苷和黨參炔苷的含量及計算損失率，通過對DPPH自由基清除能力計算抗氧化損失率。
　　3.體內實驗，取小鼠80只，隨機分空白組、模型組、陽性對

3、照組、紅景天組、黨參組、紅景天和黨參復方制劑低、中、高劑量組，每組10只。根據前期的血清藥理學實驗和動物體內實驗結果確定紅景天和黨參以1g·60kg-1（生藥）和1.5g·60kg-1（生藥）為人體每日最佳推薦劑量，以5倍、10倍和20倍為小鼠低、中、高劑量，即紅景天中劑量為0.167g·kg-1（生藥），黨參中劑量為0.25g·kg-1(生藥)。通過紅景天和黨參藥物提取液得率計算出，紅景天和黨參復方制劑以0.0895g·kg-1、0.

4、179g·kg-1、0.358g·kg-1（粉末）為小鼠低、中、高劑量。陽性藥物選擇凱西萊（50mg·kg-1）。空白組和模型組灌胃蒸餾水（0.1mL·10g-1），其余給藥組灌胃相應藥物（0.1mL·10g-1），每天1次，連續(xù)5天。末次給藥30min后，除空白組灌胃等量蒸餾水，其余組一次性灌胃56度紅星二鍋頭16mL·kg-1，禁食不禁水。禁食12h后稱重，摘眼球取血取上清液待測，并根據試劑盒測定血清中AST和ALT水平。頸椎脫臼處

5、死小鼠后，迅速取出肝臟，記錄肝臟重量，計算肝臟系數，計算公式：肝臟系數=肝臟重量（mg）/小鼠體重（g）。稱取適量肝組織，制備肝組織勻漿液，取上清液待測。并根據試劑盒測定肝勻漿中TG、GSH、SOD和MDA含量。
　　結果：
　　1.正交試驗結果表明：紅景天和黨參提取液噴霧干燥最佳工藝條件：進風溫度160℃，提取液相對密度1.09，輔料添加量50%，進行噴霧干燥，計算粉末收率為28.95%，含水量4.02%。
　　2.

6、有效成分含量測定結果表明：噴霧干燥前紅景天苷含量為(3.400±0.015)mg·g-1，噴霧干燥后紅景天苷含量為(3.209±0.019)mg·g-1，損失率為5.56%；噴霧干燥前紅景天苷含量為(0.304±0.0016)mg·g-1，噴霧干燥后紅景天苷含量為(0.288±0.0016)mg·g-1，損失率為5.26%。
　　3.DPPH自由基清除實驗結果表明：噴霧干燥前IC50值為(0.681±0.061)mg·mL-1，噴

7、霧干燥后IC50值為（0.718±0.022）mg·mL-1，抗氧化損失率為5.43%。
　　4. HPLC方法學考察結果表明:考察的有效成分分別為紅景天苷和黨參炔苷，精密度RSD分別為1.43%和1.46%;穩(wěn)定性RSD分別為1.37%和1.61%.；重復性RSD分別為1.36%和1.36%；加樣回收率RSD分別為1.79%和1.77%。
　　5.拆方實驗結果表明：各組指標與模型組相比，差異均有統(tǒng)計學意義。其中復方制劑中劑

8、量組與黨參組相比，復方制劑中劑量組能顯著降低ALT水平（P<0.01）；與紅景天組相比，復方制劑中劑量組能顯著降低MDA含量，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。
　　6.最佳劑量篩選實驗結果表明：模型組各指標與空白組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；除復方制劑低劑量組AST水平與模型組無統(tǒng)計學差異，其余各給藥組指標均與模型組均有統(tǒng)計學差異（P<0.05）；與復方制劑低劑量組相比，復方制劑中劑量組能顯著升高SOD含量，差異有

9、統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　7.肝臟系數結果表明：各組間比較差異均無統(tǒng)計學意義。
　　結論：
　　1.紅景天和黨參提取液噴霧干燥最佳工藝條件為：進風溫度160℃，提取液相對密度1.09，輔料添加量50%。
　　2.紅景天和黨參復方制劑中紅景天苷含量為（3.209±0.019）mg·g-1，黨參炔苷含量為（0.288±0.0016）mg·g-1。
　　3.紅景天聯合黨參對小鼠急性酒精性肝損傷具有保護作用