果膠-阿霉素大分子前藥基納米膠束傳遞體系的構(gòu)建及表征.pdf

1、目的：設(shè)計、合成大分子前藥果膠-阿霉素偶合物（pectin-doxorubicin conjugates，PDC），并自組裝制備及表征果膠-阿霉素納米膠束體系(PDC-M)，研究其體內(nèi)外緩控釋作用、毒性、生物相容性以及在小鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)。
　　方法：
　　1.PDC的合成：通過酰胺縮合反應(yīng)將果膠化學(xué)鍵和到阿霉素上，得到目標(biāo)產(chǎn)物PDC偶合物，通過H1NMR和FTIR對結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征；
　　2.PDC-M的制備和表征研究

2、：利用果膠的高度親水性以及阿霉素（DOX）的疏水性，自組裝制備PDC-M，并通過單因素分析法研究反應(yīng)條件對納米膠束制備的影響；應(yīng)用掃描電鏡觀察表觀納米膠束形貌，采用納米粒度及Zeta電位分析儀表征納米粒徑大小、分布以及穩(wěn)定情況，紫外分光光度法(UV)表征納米體系的載藥量等；
　　3.PDC-M的體外抗腫瘤及緩控釋研究：研究PDC-M在不同pH模擬條件下的體外釋藥性能；選取人HepG2肝癌細(xì)胞為細(xì)胞模型，采用CCK8法觀察DOX和P

3、DC-M對其的增殖抑制作用；運(yùn)用流式細(xì)胞儀測定人HepG2肝癌細(xì)胞對DOX和PDC-M的攝取情況；
　　4.PDC-M的體外生物相容性研究：采用CCK8法觀察DOX和PDC-M處理ECs內(nèi)皮細(xì)胞后的細(xì)胞存活率；用2％的兔血紅細(xì)胞對DOX和PDC-M進(jìn)行溶血性試驗(yàn)；用牛血清白蛋白（BSA）對DOX和PDC-M進(jìn)行蛋白吸附實(shí)驗(yàn)；
　　5.PDC-M的體內(nèi)藥代動力學(xué)的研究：采用尾靜脈注射給藥的方法，用HPLC測定血藥濃度，得出DO

4、X及PDC-M的血藥濃度-時間曲線，用3P97計算DOX及PDC-M的藥動學(xué)參數(shù)。
　　結(jié)果：所得果膠-阿霉素大分子前藥化學(xué)結(jié)構(gòu)經(jīng)H1NMR和FTIR確證；單因素分析法得出納米膠束最佳反應(yīng)條件：pH5.0，50℃，100rpm。PDC-M為表面光滑、粒徑均一的不規(guī)則球形納米膠束，平均粒徑為140nm左右；PDC-M的zeta電位值為-29.5mv，體系較為穩(wěn)定；UV法測得PDC-M的包封率和載藥率分別是57.82%±3.7%(n=

5、3)以及23.852%±2.3%(n=3)；體外不同pH條件下的釋放結(jié)果表明PDC-M具有一定的緩釋性能，抗增殖和流式結(jié)果進(jìn)一步表明PDC-M有明顯的緩釋效果，且呈時間和劑量依賴性；細(xì)胞存活率實(shí)驗(yàn)表明PDC-M較DOX相比有良好的細(xì)胞相容性和低毒性，此外，BSA吸附實(shí)驗(yàn)以及溶血試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)了這一點(diǎn)。體內(nèi)藥動學(xué)結(jié)果表明PDC-M在機(jī)體內(nèi)具有長循環(huán)效果，能降低毒副作用和提高生物利用度。
　　結(jié)論：成功合成并制備了以果膠為親水外殼，阿