Beclin1、LC3、Atg9a mRNA及氧化應(yīng)激指標(biāo)在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的表達及臨床意義.pdf

1、目的：本研究檢測分析RA患者和健康人群外周血單個核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMCs）中自噬相關(guān)基因Beclin1、LC3、Atg9a的表達；RA患者、健康人群及其他自身免疫性疾病，包括骨性關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis。OA）、強直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）、痛風(fēng)患者血清中氧化應(yīng)激指標(biāo)水平；RA、其他自身免疫性疾病患者關(guān)節(jié)滑液中氧化應(yīng)激指標(biāo)水

2、平，并分析Beclin1、LC3、Atg9a mRNA相對表達量與氧化應(yīng)激指標(biāo)的相關(guān)性。旨在探討自噬、氧化應(yīng)激在RA中的作用及三者之間的關(guān)系，以期發(fā)現(xiàn)有效的藥物治療靶點、診斷標(biāo)志物和監(jiān)測指標(biāo)。
　　方法：選取符合診斷標(biāo)準(zhǔn)的RA患者54例、健康人群44例作為研究對象，采集其空腹外周血，差速密度梯度離心法分離PBMCs后提取總RNA，采用反轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）和實時熒光定量PCR（real-time PCR）方法檢測并分析Bec

3、lin1、LC3、Atg9a mRNA的表達量；選取RA患者54例，健康人群44例，其他自身免疫性疾病患者24例收集血清，另選取RA患者、其他自身免疫性疾病患者各18例收集關(guān)節(jié)滑液，比色法檢測分析研究對象血清、關(guān)節(jié)滑液中氧化應(yīng)激指標(biāo)丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）的水平，并對RA患者這三項氧化應(yīng)激指標(biāo)與自噬相關(guān)基因Beclin1、LC3、Atg9a進行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：⑴real-time PCR

4、結(jié)果：RA組相較健康對照組，LC3 mRNA在PBMCs中相對表達量顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；Beclin1、Atg9a mRNA表達量略有升高，但差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；與RA治療前組相較，治療后組Beclin1、LC3 mRNA相對表達量顯著降低（P<0.05），而Atg9a mRNA治療后相對表達量略有下降但沒有統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）；LC3 mRNA在RA疾病活動期相對表達量升高且在四個活動期

5、亞組間均有差異，活動度越高，LC3 mRNA表達量越高（P<0.05），而Beclin1、Atg9a mRNA在疾病活動期和疾病緩解期無明顯差異（P>0.05）。⑵氧化應(yīng)激檢測結(jié)果：血清中，RA組MDA、NO水平相較健康對照組顯著升高，SOD水平顯著下降（P<0.05）；關(guān)節(jié)滑液中，RA組與其他自身免疫性疾病組MDA、NO二者無統(tǒng)計學(xué)差異；SOD在兩組中水平降低，但無明顯差異（P>0.05）；RA組治療后血清中MDA、NO水平較治療前下

6、降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；治療后SOD水平顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；.MDA水平在RA疾病活動期升高（P<0.05），而在不同活動度組間沒有差異（P>0.05）。SOD水平在RA疾病活動期降低，緩解期升高（P<0.05），且隨疾病活動度的降低，SOD的水平逐漸升高，組間差異明顯（P<0.05）。NO水平在疾病活動期和緩解期無明顯差異（P>0.05）；NO水平與自噬呈正相關(guān)(r=0.389，0.394；P<0