進(jìn)展期乳腺浸潤性導(dǎo)管癌HER-2-neu基因及蛋白表達(dá)的穩(wěn)定性分析.pdf

1、目的：探討進(jìn)展期乳腺浸潤性導(dǎo)管癌原發(fā)灶和同期腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中人表皮生長因子受體2(HER-2/neu)蛋白表達(dá)和基因擴(kuò)增狀態(tài)，分析其異同與特點(diǎn)，指導(dǎo)臨床檢測標(biāo)本的選擇以及對病理檢測報告的分析與應(yīng)用。
　　方法：收集紹興市人民醫(yī)院病理科女性浸潤性導(dǎo)管癌伴有同期腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的石蠟存檔標(biāo)本100例，選取每個病例的腫瘤原發(fā)灶5個典型位點(diǎn)及其所有鏡下可視腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶位點(diǎn)制備全信息組織芯片，采用免疫組織化學(xué)法(IHC)檢測HER-2/

2、neu蛋白表達(dá)，熒光原位雜交法(FISH)檢測HER-2/neu基因擴(kuò)增狀態(tài)，分析并對比其蛋白表達(dá)與基因擴(kuò)增的特點(diǎn)及穩(wěn)定性。
　　結(jié)果：IHC檢測結(jié)果顯示，本組69％的病例顯示蛋白均質(zhì)性標(biāo)記模式，31％為非均質(zhì)性標(biāo)記模式。原發(fā)灶HER-2/neu蛋白均質(zhì)陰性病例同期腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶HER-2/neu蛋白也呈均質(zhì)陰性的病例比例最高，即一致性最強(qiáng);原發(fā)灶均質(zhì)陽性病例次之;原發(fā)灶均質(zhì)不確定組最差;三者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.0001)

3、。HER-2/neu蛋白在原發(fā)灶和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的分布狀況無明顯差別(P=0.947)且一致性較高(κ=0.618)。在蛋白異質(zhì)性病例中，33.33％(4/12)原發(fā)灶含有陽性位點(diǎn)的病例發(fā)現(xiàn)HER-2/neu陰性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶位點(diǎn);12.50％(2/16)原發(fā)灶不確定或既有不確定位點(diǎn)又有陰性位點(diǎn)的病例出現(xiàn)陽性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶;原發(fā)灶陰性病例出現(xiàn)不確定表達(dá)轉(zhuǎn)移灶，沒有陽性表達(dá)淋巴結(jié)。
　　FISH檢測結(jié)果顯示，本組病例96％呈基因均質(zhì)

4、性模式，4％的病例顯示異質(zhì)性。HER-2/neu基因在原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶中的均質(zhì)分布基本相同(P=0.218)，二者顯示出極好的一致性(κ=0.92)。無論是原發(fā)灶均質(zhì)擴(kuò)增還是均質(zhì)未擴(kuò)增病例，其相應(yīng)轉(zhuǎn)移中均有2例出現(xiàn)與原發(fā)灶不一致的位點(diǎn)。
　　兩種方法綜合比較:顯示無論是以病例為單位還是以位點(diǎn)為單位進(jìn)行分析，蛋白均質(zhì)陽性病例或陽性位點(diǎn)均以基因均質(zhì)擴(kuò)增狀態(tài)為主，但也檢測到均質(zhì)非擴(kuò)增病例或位點(diǎn);蛋白均質(zhì)陰性病例或陰性位點(diǎn)以基因均質(zhì)非擴(kuò)增狀

5、態(tài)為主，但也檢測到均質(zhì)擴(kuò)增病例或位點(diǎn);而在含有蛋白不確定表達(dá)的病例或位點(diǎn)中，分別有55.56％的病例和42.62％的位點(diǎn)顯示基因均質(zhì)擴(kuò)增;在所有蛋白與基因均為均質(zhì)狀態(tài)的病例中（63例），IHC與FISH的檢測結(jié)果一致性較好(κ=0.803)。CEP17呈非二倍體信號的病例在均質(zhì)擴(kuò)增病例中更為常見(P＜0.0001)，擴(kuò)增病例以非二倍體為主，非擴(kuò)增病例以散在分布的二倍體信號居多。以5個淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶為界進(jìn)行分類，可知HER-2/neu蛋白均

6、質(zhì)陽性病例在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)≥5個組中更為多見(P=0.001)，而HER-2/neu蛋白均質(zhì)陰性病例在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)＜5個者更為常見(P＜0.0001);無論淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)多少，HER-2/neu基因的均質(zhì)擴(kuò)增率與均質(zhì)非擴(kuò)增率均無明顯差別(P=0.202，P=0.100)。
　　結(jié)論：1、進(jìn)展期乳腺浸潤性導(dǎo)管癌HER-2/neu蛋白表達(dá)在腫瘤原發(fā)灶和同期腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶之間穩(wěn)定性較高，尤以陰性病例最穩(wěn)定。
　　2、除4％的病

7、例呈基因異質(zhì)性狀態(tài)外，HER-2/neu基因在腫瘤原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶中的一致性極高，表現(xiàn)出極好的穩(wěn)定性。
　　3、所有蛋白表達(dá)異質(zhì)性病例都含有不確定表達(dá)位點(diǎn)，F(xiàn)ISH檢測顯示近一半的病例HER-2/neu拷貝呈連接成簇的基因擴(kuò)增。
　　4、病例分析與位點(diǎn)分析均證實(shí)IHC蛋白檢測與FISH基因檢測存在一定程度的不同步。
　　5、CEP17呈現(xiàn)非二倍體狀態(tài)的病例在均質(zhì)擴(kuò)增病例中更為常見。
　　6、應(yīng)用組織芯片技術(shù)行多點(diǎn)取