霧化吸入母牛分枝桿菌預防小鼠支氣管哮喘的效果觀察.pdf

1、目的:
　　探討霧化吸入母牛分枝桿菌對小鼠支氣管哮喘的預防作用及相關機制。
　　方法:
　　40只雌性BALB/C小鼠按隨機數字表法分為5組，每組8只，（22.5ug預防組（A組）、45.0ug預防組（B組）、67.5ug預防組（C組）、正常對照組（D組）和哮喘模型組（E組））。用雞卵清蛋白(ovalbumin，OVA)腹腔注射致敏和霧化吸入激發(fā)制作小鼠支氣管哮喘模型，每只小鼠每周腹腔注射1次OVA混合試劑致敏，連續(xù)3

2、周，第4周開始予OVA·PBS液霧吸激發(fā)，每次30分鐘，隔日1次，連續(xù)5次。預防組（A、B、C組）在哮喘模型制作前2周連續(xù)5天霧化吸入母牛分枝桿菌混合液10ml，每天1次。所有小鼠在模型制作后24小時內予無創(chuàng)肺功能儀檢測小鼠氣道反應性，隨后處死小鼠，收集標本。病理HE染色、AB-PAS染色觀察肺臟炎癥情況，并進行半定量分析;液相芯片法檢測血清及肺泡灌洗液中IL-4、IL-5、IL-17A、IFN-γ表達水平;免疫組織化學染色法檢測肺IL

3、-4、IL-5、IL-17A、IFN-γ及γδ-TCR表達水平。
　　結果:
　　與哮喘模型組比較，母牛分枝桿菌霧化吸入預防組小鼠氣道反應性降低，肺組織炎癥減輕，肺IL-4、IL-5、IL-17A、γδ-TCR表達水平降低(P值均＜0.05)，IFN-γ表達水平升高(P＜0.05)，三個預防組中以67.5ug預防組效果最明顯(P＜0.05)。各預防組免疫組化結果:IL-4、IL-5、γδ-TCR表達水平，67.5ug預防組明

4、顯低于22.5ug、45.0ug預防組（P值均＜0.05）;IL-17A表達水平呈量-效負相關，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);IFN-γ表達水平67.5ug預防組明顯高于22.5ug、45ug預防組(P＜0.05)。
　　結論:
　　霧化吸入母牛分枝桿菌可以明顯降低支氣管哮喘小鼠氣道反應性，減輕氣道炎癥，用于支氣管哮喘的預防，其機制可能與其減少支氣管哮喘小鼠肺部γδ-T細胞聚集，糾正Th1/Th2失衡，抑制Th17型優(yōu)勢