兩株海洋真菌次級代謝產(chǎn)物的研究.pdf

1、海洋微生物是海洋天然產(chǎn)物的主要來源之一，三分之一以上的海洋新天然產(chǎn)物來源于海洋微生物。海洋微生物同時也是現(xiàn)代海洋藥物的真正來源之一，有十幾種上市和臨床研究的海洋藥物之實(shí)際生物來源皆為海洋微生物。內(nèi)生真菌是一類特殊生境的微生物，一般指在其生活史中的某一段時期生活在宿主組織內(nèi)對宿主沒有引起明顯病害癥狀的微生物。軟珊瑚體內(nèi)存在豐富的微生物，這些共生互助的微生物是軟珊瑚共生體活性天然產(chǎn)物的主要生產(chǎn)者，從中發(fā)現(xiàn)結(jié)構(gòu)新穎、活性顯著的藥源分子是國際研

2、究的前沿和熱點(diǎn)。
　　在國內(nèi)，目前還沒有短指軟珊瑚的共附生真菌及其代謝產(chǎn)物的研究報道。本研究組在2012年夏季從海南三亞西島附近的珊瑚礁海區(qū)采集了一批短指軟珊瑚樣品，第二章研究的海洋真菌Scedosporium boydii是從其中分離得到的，目前還沒有關(guān)于來自S.boydii代謝產(chǎn)物的報道。綜合運(yùn)用正相硅膠柱層析、葡聚糖Sphadex LH-20凝膠柱層析和制備高效液相色譜以及重結(jié)晶等方法進(jìn)行分離純化，從S.boydii發(fā)酵產(chǎn)物

3、的乙酸乙酯相及其菌體的甲醇相中分離獲得單體化合物，利用核磁共振譜、質(zhì)譜、紅外、旋光、X射線單晶衍射、圓二色譜等方法并結(jié)合文獻(xiàn)檢索方法共鑒定了37個化合物:pseuboydone A(2-1a),pseuboydone B(2-1b),pseuboydone C(2-2),cyclo-(2,2′-dim ethylthio-Phe-Phe)(2-3),cyclo-(Phe-Phe)(2-4),phomazine B(2-5),bisdet

4、hiobis(met hylthio)gliotoxin(2-6),boydine A(2-7),boydine B(2-8),ditryptophenaline(2-9),β-aflatrem(2-10),pseuboydone C(2-11),cyclopiamide E(2-12),speradineC(2-13),p seuboydone D(2-14),monohydroxyisoaflavinine(2-15),monohy

5、droxyaflavinine(2-16),pseudofischerine(2-17),pyripyropeneA(2-18),O-methylsterigmatocystin(2-19),4-(1-hydroxy-1-methylpropyl)-2-isobutylpyrazin-2(1H)-one(2-20),4-(1-hydroxy-1-methylpropyl)-2-secbutylpyrazin-2(1H)-one(2-21

6、),asperfuran(2-22),2-hydroxy-3,5-dimethy l-6-(1-methyl-1-propenyl)-4H-Pyran-4-one(2-23),4-hydroxy-3-methyl-6-(1-methyl-1-propenyl)-2H-Pyran-2-one(2-24)。phomaligol A(2-25),diorcinol(2-26),octalactin C(2-27),5-tetradecylox

7、olan-2-one(γ-Octadecalactone)(2-28),吲哚-3-甲酸(2-29),吲哚-3-乙酸(2-30),methyl-2-(1H-indol-3-yl)acetate(2-31),吲哚-3-甲醛(2-32),tryptophol(2-33)。Nb-acetyltryptamine(2-34),N-(2-hydroxyphenyl)-acetamide(2-35),N-(2-hydroxy-4-methylphen

8、yl)-acetamide(2-36)。化合物2-23是首次從天然產(chǎn)物中獲得，其中pseuboydone A(2-1a)。pseuboydone B(2-1b)。pseuboydone C(2-2)。pseuboydone D(2-14)為新化合物，通過X射線單晶衍射確定pseuboydone A(2-1a)的絕對構(gòu)型，通過圓二色譜技術(shù)(CD)、ECD確定其他3個化合物的絕對構(gòu)型。對化合物2-1a，2-4，2-10，2-11，2-12，

9、2-15~2-18進(jìn)行體外細(xì)胞毒性測試，結(jié)果表明：化合物2-1a，2-4，2-11，2-15，2-16對昆蟲S.frugiperda. Sf9細(xì)胞具有明顯的抑制作用，其抑制率分別為91.50％，92.38%，90.43%，97.04%，97.51%(陽性對照品是rotenone)。分析探討了paspalinine類化合物，aflavinine類化合物，CPA類化合物，二酮哌嗪類化合物，萜類化合物和吡嗪酮類化合物的生源合成途徑。
　

10、　第三章以一株豆莢軟珊瑚(Lobophytum)共生真菌Trichoderma asperellum為研究對象，該真菌在葡萄糖-蛋白胨-酵母膏(GPY)培養(yǎng)基中靜置培養(yǎng)60天，菌體生長迅速，呈黃綠色。對真菌Trichoderma asperellum.發(fā)酵液的乙酸乙酯提取物進(jìn)行分離，從中分離鑒定了13個化合物：rhodolamprometrin(3-1)，melanoxazal(3-2)，1-(2-furanyl)-1-penten-3

11、-ol(3-3)，4-acetyl-3-hydroxy-6-methyl-pyran-2-one(3-4)，4-acetyl-3-hydroxy-6-methyl-pyran-2-one(3-5)，N-acetyltyramine(3-6),4-hydroxy-N-(2-oxoethyl)-benza mide(3-7)，環(huán)（苯丙-丙）二肽(3-8)，環(huán)（酪-苯丙）二肽(3-9)，環(huán)（纈-苯丙）二肽(3-10)，環(huán)（纈-亮）二肽(3-1