食管鱗癌組織中BTG1 mRNA和蛋白的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：食管癌是起源于食管上皮組織的惡性腫瘤，起病隱匿，早期癥狀輕且特異性低，僅在吞咽硬質(zhì)食物時(shí)可能會(huì)有輕重不一的不適感覺，且時(shí)輕時(shí)重反復(fù)出現(xiàn)，易于食管炎相混淆，難以引起患者注意而延誤最佳治療時(shí)機(jī)，所以多數(shù)病人就診時(shí)已進(jìn)入中晚期。據(jù)統(tǒng)計(jì)，食管癌的發(fā)病率在全國(guó)各類型惡性腫瘤中排名第5，死亡率排名第4，由于發(fā)病率高、死亡率高、早期診斷率低，食管癌已成為嚴(yán)重危害人類身心健康的惡性疾病，原國(guó)家衛(wèi)生部將食管癌確立為我國(guó)臨床十大惡性腫瘤之一。早期食管

2、癌經(jīng)積極治療后5年生存率較高，然而中晚期食管癌的5年生存率極低，最主要的原因是易發(fā)生浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。食管癌的組織學(xué)分型包括鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、未分化癌、癌肉瘤、小細(xì)胞癌等，其中以鱗狀細(xì)胞癌最常見，約占食管癌的90％以上。目前食管癌的具體發(fā)病機(jī)制仍不清楚，但基因異常學(xué)說已逐漸得到大部分學(xué)者的認(rèn)可，因此從基因水平探討食管癌的發(fā)病機(jī)制、尋求食管癌的易感基因及新的診療手段已成為腫瘤研究領(lǐng)域的大趨勢(shì)。B細(xì)胞轉(zhuǎn)位基因1（B-cell translocat

3、ion gene1，BTG-1）是BTG/Tob抗增殖基因家族中的一員，最早是在研究慢性B型淋巴細(xì)胞白血病中MYC定位時(shí)發(fā)現(xiàn)的[3]，其易位點(diǎn)為t（8；12）（q24；q22），進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)BTG1定位于人類第12號(hào)染色體上，含有5620個(gè)堿基對(duì)，能編碼171個(gè)氨基酸，分子量為19027[4]。BTG1具有強(qiáng)大的抑制細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞凋亡等功能，在多種腫瘤組織中出現(xiàn)表達(dá)下調(diào)或缺失現(xiàn)象，且參與調(diào)控許多相關(guān)蛋白的表達(dá)，進(jìn)而影響細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)

4、胞周期調(diào)控、細(xì)胞分化、發(fā)育、凋亡等多種細(xì)胞進(jìn)程，與許多惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系緊密，如非小細(xì)胞肺癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、肝癌、胃癌、甲狀腺癌、前列腺癌、乳腺癌、淋巴瘤等。而 BTG1在食管癌發(fā)生、發(fā)展中的作用目前鮮少見報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)采用原位雜交、免疫組織化方法檢測(cè)BTG1mRNA及蛋白在169例食管鱗狀細(xì)胞癌（Esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）組織、50例食管正常粘膜組織中的表達(dá)情況，分析 B

5、TG1mRNA及其蛋白之間的關(guān)系，及它們與ESCC臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。
　　方法：從2012年3月至2015年7月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院存檔的手術(shù)蠟塊中隨機(jī)選取169例 ESCC標(biāo)本，查閱所有病例患者的病歷資料證實(shí)術(shù)前無放化療、生物治療等積極治療史。分別取無壞死癌組織和遠(yuǎn)端正常食管粘膜組織，經(jīng)多聚甲醛（40g/L）固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋，連續(xù)切片，切片厚度4～6μm，分別用于HE、免疫組織化學(xué)及原位雜交染色。全部169例標(biāo)本均

6、經(jīng)組織學(xué)證實(shí)為食管鱗狀細(xì)胞癌。根據(jù)組織學(xué)分級(jí)分為三組：其中Ⅰ級(jí)47例，Ⅱ級(jí)71例，Ⅲ級(jí)51例；根據(jù)有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分為兩組：伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者67例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者102例；根據(jù)浸潤(rùn)深度分為兩組：浸潤(rùn)深度達(dá)黏膜下層或淺肌層者54例（淺層），浸潤(rùn)深度達(dá)肌層或外膜層者115例（深層）；根據(jù)臨床分期分為兩組TNM分期（UICC1997）：Ⅰ-Ⅱ期128例，Ⅲ-Ⅳ期41例。采用原位雜交和免疫組織化學(xué)方法分別檢測(cè)了169例ESCC組織和50例正常食管粘

7、膜組織中BTG1mRNA和蛋白的表達(dá)情況，應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，應(yīng)用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行組間表達(dá)差異，應(yīng)用spearman檢驗(yàn)進(jìn)行BTG1mRNA與蛋白的相關(guān)分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05，P<0.05時(shí)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：⑴BTG1mRNA主要存在于細(xì)胞質(zhì)中，為藍(lán)紫色顆粒樣物質(zhì)，主要分布于食管正常粘膜組織中。BTG1 mRNA在ESCC組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為24.9%，在食管正常組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為76.0

8、%，兩組間比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。⑵BTG1蛋白主要存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，為淺黃色至棕黃色顆粒樣物質(zhì)，主要分布于食管正常粘膜組織中。BTG1蛋白在ESCC組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為23.7%，在食管正常粘膜組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為62.0%，兩組間比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。⑶BTG1 mRNA及其蛋白的表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)無關(guān)（P>0.05）、與腫瘤浸潤(rùn)深度、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期有關(guān)（P＜0.05）。⑷BTG1 mR