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1、本論文共分四章內(nèi)容。
第一章分別從資源性化學(xué)成分、藥理作用、資源利用等方面綜述了桑葉的研究進(jìn)展。桑葉中含有黃酮類(lèi)、生物堿類(lèi)、多糖類(lèi)、甾體類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)、核苷類(lèi)、氨基酸類(lèi)等資源性化學(xué)物質(zhì),具有降血糖、降血脂、抗血小板聚集、抗炎、抗氧化等藥理作用。其功能性產(chǎn)品成為研究開(kāi)發(fā)熱點(diǎn),已有桑葉茶、桑葉飲料等功能食品;桑枝、桑椹、桑白皮應(yīng)用也較為廣泛,主要有桑枝培養(yǎng)基質(zhì),桑葚酒、飲料、果醋和桑根酒等。然而,桑葉資源化學(xué)研究卻不夠深入,因此,本
2、論文圍繞桑屬藥用植物中資源性化學(xué)成分的積累動(dòng)態(tài)以及桑葉適宜采收、干燥加工方法等方面開(kāi)展研究,以期為桑葉的系統(tǒng)利用及資源化利用提供科學(xué)依據(jù)。
第二章主要開(kāi)展了11個(gè)桑品種、88個(gè)桑葉樣品中各類(lèi)型資源性化學(xué)成分的積累動(dòng)態(tài)研究。通過(guò)液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)、苯酚-濃硫酸法、凱氏定氮法測(cè)定桑葉中黃酮類(lèi)、生物堿類(lèi)、核苷類(lèi)、氨基酸類(lèi)、多糖類(lèi)和蛋白質(zhì)類(lèi)資源性化學(xué)成分,優(yōu)化了中國(guó)藥典中桑葉含量測(cè)定項(xiàng)下色譜條件,并建立了同時(shí)測(cè)定桑葉中核苷類(lèi)、氨基酸類(lèi)和生物
3、堿類(lèi)成分的UPLC-TQ/MS方法。測(cè)定黃酮類(lèi)成分色譜條件為:Acquity UPLC BEH C18色譜柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流動(dòng)相:A-0.1%甲酸水溶液,B-乙腈,梯度洗脫(0~12.5 min,95%A→5%A;12.5~14min,5%A);流速:0.4 mL·min-1;柱溫:35℃;進(jìn)樣量:1μL。結(jié)果發(fā)現(xiàn),不同品種桑葉中黃酮類(lèi)成分含量差異較大,Y85(廣東桑)中蘆丁含量最高達(dá)2.34 mg/g、Y
4、26(雞桑)中含量最低僅含0.01 mg/g; Y82(廣東桑)中異槲皮苷含量最高達(dá)2.35 mg/g、 Y26中含量最低僅含0.02 mg/g;Y82中紫云英苷含量最高達(dá)1.49 mg/g、Y26中含量最低僅含0.01 mg/g;Y82中白藜蘆醇含量最高達(dá)1.37 mg/g、Y26中含量最低僅含0.07 mg/g;龍膽雙糖苷含量差異較小。
測(cè)定生物堿類(lèi)、核苷類(lèi)和氨基酸類(lèi)化學(xué)成分的色譜條件為:Acquity UPLC BEH
5、Amide(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流動(dòng)相:A-含5 mmol·L-1甲酸銨、乙酸銨和0.2%甲酸的水溶液,B-含1 mmol·L-1甲酸銨、乙酸銨和0.2%甲酸的乙腈溶液,梯度洗脫(0~3 min,10% A;3~9min,10→18%A;9~15min,18→20%A,15~16min,20→46%A,16~18min,46%A);流速:0.4 mL·min-1;柱溫:35℃;進(jìn)樣量:1μL。結(jié)果發(fā)現(xiàn),不同品種桑葉
6、中生物堿類(lèi)成分含量差異也較大, Y22(華桑)中DNJ含量最高達(dá)8.49 mg/g,Y86(廣東桑)中含量最低僅含0.16 mg/g;在各樣品中Fagomine含量均較低。
桑葉中多糖的含量隨品種變化差異較大,其中以白桑桑葉總多糖含量最高(3.49%),魯桑最低(0.79%)。不同品種桑葉中蛋白質(zhì)含量最高達(dá)22.14%(Y26),最低僅含9.54%(Y25)。揭示了不同品種之間各類(lèi)資源性化學(xué)物質(zhì)的含量差異,為桑資源的合理利用提
7、供了重要依據(jù)。
第三章評(píng)價(jià)了桑葉的適宜采收期。通過(guò)采集7~12月6批每批88個(gè)桑葉樣品中黃酮類(lèi)和生物堿類(lèi)資源性化學(xué)成分,結(jié)果表明,不同品種、不同生長(zhǎng)期桑葉中的生物堿類(lèi)、黃酮類(lèi)成分含量差異較大,隨著物候期的順延,生物堿類(lèi)成分的含量呈總體下降趨勢(shì),10月份后大幅下降;黃酮類(lèi)成分的含量變化較小,10月份之后亦呈下降趨勢(shì)。廣東桑中黃酮類(lèi)成分遠(yuǎn)高于生物堿類(lèi)成分,而雞桑則相反;華桑和蒙桑中生物堿類(lèi)成分在7~8月間迅速下降;白桑中的生物堿類(lèi)
8、、黃酮類(lèi)成分含量均處于中等水平。綜合分析,藥用桑葉的適宜采收期在9月底10月初。同時(shí),探討了經(jīng)霜前后桑葉中黃酮類(lèi)和生物堿類(lèi)資源性化學(xué)成分的積累動(dòng)態(tài),主要考察了輪哈2號(hào)、育711和禾桑3個(gè)品種桑葉,在2014年10月13至11月30之間每三天取樣一次,分別進(jìn)行定量分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),經(jīng)霜前后桑葉中黃酮類(lèi)成分含量?jī)H有小幅波動(dòng)并無(wú)明顯升高趨勢(shì)。各品種中DNJ含量較高, Fagomine含量較低,輪哈2號(hào)與禾桑中DNJ含量在經(jīng)霜前后呈下降趨勢(shì),而育
9、711中DNJ在經(jīng)霜前后的動(dòng)態(tài)圖呈“U”型,即經(jīng)霜后其中DNJ含量有所升高。研究結(jié)果為桑葉的合理采收及資源化利用提供了科學(xué)依據(jù),但“霜桑葉”的科學(xué)內(nèi)涵仍需要進(jìn)一步闡釋。
第四章評(píng)價(jià)了桑葉的適宜干燥方法。分析評(píng)價(jià)了曬干、陰干、熱風(fēng)干燥、中波紅外干燥、控溫控濕干燥等5種干燥技術(shù)對(duì)桑葉藥材品質(zhì)的影響,同時(shí)控制殺青時(shí)間和烘干溫度對(duì)經(jīng)霜后育711桑葉進(jìn)行了處理,以黃酮類(lèi)、生物堿類(lèi)化學(xué)成分等為指標(biāo)并結(jié)合干燥桑葉的外觀性狀,明確桑葉適宜的干
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