牡竹屬竹葉化學(xué)成分研究.pdf

1、植物資源的化學(xué)利用是當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。竹子是森林資源的重要組成部分，在我國(guó)分布廣泛。竹子具有豐富的次生代謝產(chǎn)物，對(duì)竹類資源化學(xué)成分的研究和開(kāi)發(fā)利用具有重要意義。牡竹屬是我國(guó)重要的叢生竹屬，為了全面研究牡竹屬竹葉化學(xué)成分，揭示竹葉化學(xué)成分的生物活性，本文以牡竹屬中具有藥用價(jià)值的麻竹為研究對(duì)象，對(duì)其竹葉的化學(xué)成分進(jìn)行分離、純化和結(jié)構(gòu)鑒定;建立了竹葉中香豆素類化合物高效液相色譜檢測(cè)法;并對(duì)牡竹屬10種竹葉的化學(xué)成分進(jìn)行了比較研究，探討同屬的竹類

2、植物化學(xué)成分的差異，為更好的利用牡竹屬竹葉資源提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:
　　 (1)采集麻竹竹葉，用95％乙醇浸提，石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取。乙酸乙酯相經(jīng)硅膠柱色譜、凝膠柱色譜、高壓制備色譜及重結(jié)晶，得到17種單體化合物。通過(guò)理化性質(zhì)、波譜數(shù)據(jù)分析、高效液相色譜法等方法，分別鑒定為牡荊苷、異牡荊苷、木犀草素、苜蓿素、7-甲氧基-苜蓿素、苜蓿素-4'-O-葡萄糖苷、苜蓿素-7-O-葡萄糖苷、芹菜素、芹菜素-7-O-葡萄

3、糖苷、芹菜素-6-C-阿拉伯糖苷、芹菜素-7-O-葡萄糖-6"-O-鼠李糖苷、對(duì)羥基苯甲醛、5-羥基-2-甲氧基-苯甲醛、黑麥草內(nèi)酯、去氫催吐蘿芙木醇、催吐蘿芙木醇-9-O-葡萄糖苷和4,4',9,9'-四羥基-3,3',5,5'-四甲氧基-7,7'-單環(huán)氧木脂素，其中有11個(gè)黃酮、2個(gè)酚酸、3個(gè)萜類及1個(gè)木脂素類化合物。除牡荊苷外，其它16種化合物均首次在麻竹中分離得到。對(duì)獲得的質(zhì)量相對(duì)較大化合物15即4,4',9,9'-四羥基-3,

4、3',5,5'-四甲氧基-7,7'-單環(huán)氧木脂素進(jìn)行了體外抗腫瘤細(xì)胞活性測(cè)定，結(jié)果表明其對(duì)HeLa細(xì)胞增殖沒(méi)有抑制作用。
　　 (2)建立了一種簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的同時(shí)測(cè)定13種黃酮類化合物含量的高效液相色譜法。結(jié)果表明，異葒草苷、葒草苷、牡荊苷、異牡荊苷、木犀草素、芹菜素-7-O-葡萄糖-6"-O-鼠李糖苷、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、苜蓿素-7-O-葡萄糖苷、6-反式-(2"-O-α-鼠李糖基)乙烯基-5,7,3',4'-四羥基

5、黃酮、芹菜素、苜蓿素、Demethyltorosaflavone和7-甲氧基-苜蓿素在各自的線性范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，各標(biāo)準(zhǔn)品的LOD值在0.01～0.03mg/kg之間，LOQ值在0.02～0.34mg/kg之間。本試驗(yàn)儀器的精密度良好，且13種標(biāo)準(zhǔn)品較穩(wěn)定。
　　 采用建立的方法對(duì)牡竹屬10種竹種包括麻竹、龍竹、牡竹、黃竹、梁山慈竹、花吊絲竹、云南龍竹、福貢龍竹、勃氏甜龍竹和版納甜龍竹竹葉黃酮含量進(jìn)行分析，結(jié)果顯示各竹種竹

6、葉黃酮類化合物含量存在差異。異葒草苷、葒草苷、牡荊苷、異牡荊苷和芹菜素-7-O-葡萄糖-6'-O-鼠李糖苷在10種竹葉中含量普遍較高，其次是芹菜素-7-O-葡萄糖苷和苜蓿素-7-O-葡萄糖苷，木犀草素、6-反式-(2'-O-α-鼠李糖基)乙烯基-5,7,3',4'-四羥基黃酮、芹菜素、苜蓿素、Demethyltorosaflavone和7-甲氧基-苜蓿素含量較小。
　　 (3)以70％乙醇為提取溶劑，超聲波提取，高效液相色譜檢測(cè)

7、，首次建立了竹葉中12種香豆素類化合物同時(shí)檢測(cè)方法。竹葉樣品經(jīng)70％乙醇超聲提取3次，每次30min;FlorisilSPE柱凈化，5mL甲醇洗脫。結(jié)果表明，茵芋苷、東莨菪苷、東莨菪內(nèi)酯、傘形酮、6，7-二甲氧基香豆素、香豆素、補(bǔ)骨脂素、花椒毒素、5，7-二甲氧基香豆素、茴芹內(nèi)酯、歐前胡素和蛇床子素等12種香豆素的LOD值在0.19～0.85mg/kg之間，LOQ值在0.64～2.82mg/kg之間。在5～45mg/kg的添加濃度內(nèi)，添

8、加回收率在47.41～112.25％之間，RSD≤19.69％。
　　 采用建立的方法分析了牡竹屬10種竹葉中香豆素類化合物含量，共檢測(cè)到東莨菪苷、東莨菪內(nèi)酯、傘形酮、香豆素和茴芹內(nèi)酯5種香豆素，其中，東莨菪內(nèi)酯為其共有成分，含量在5.26～37.84mg/kg之間。10種竹葉香豆素總含量在20.39～152.96mg/kg之間，福貢龍竹竹葉中的香豆素類化合物總含量最高，梁山慈竹竹葉中所含香豆素總含量最低。
　　 (4)

9、對(duì)牡竹屬10種竹種竹葉揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行分析比較，發(fā)現(xiàn)10種竹葉揮發(fā)油中醛類、酮類和醇類化合物在各竹葉揮發(fā)油中相對(duì)含量較高，其次是烷烯烴類、酚類和酯類化合物，醚類、酸類、萘類、呋喃類及其它類化合物在各竹葉揮發(fā)油中相對(duì)含量較低。10種竹葉揮發(fā)油化學(xué)成分中含有18種共有成分，其中，反式-2-己烯醛是各竹種揮發(fā)油中的重要成分。
　　 (5)對(duì)牡竹屬10種竹種竹葉中的蛋白質(zhì)、多糖、葉綠素及礦質(zhì)元素等化學(xué)成分含量進(jìn)行比較研究，結(jié)果表明，蛋

10、白質(zhì)含量在12.90～22.12％之間，梁山慈竹含量最高，麻竹含量最低，黃竹和云南龍竹、花吊絲竹和版納甜龍竹之間蛋白質(zhì)含量不存在顯著性差異，其它幾種竹種蛋白質(zhì)含量存在顯著性差異。10種竹葉多糖含量在0.38～0.82mg/g之間，含量最高的竹種為龍竹，含量最低的為牡竹。10種竹葉葉綠素a的含量在1.69～3.82mg/g之間，葉綠素b的含量在0.79～1.60mg/g之間，葉綠素總含量在2.48～5.37mg/g之間，其中勃氏甜龍竹竹葉