牡荊子的化學(xué)成分研究以及生藥學(xué)鑒定.pdf

1、牡荊子為馬鞭草科（Verbenaceae）牡荊屬植物牡荊Vitex negundoL.var. cannabifolia(Sieb.et Zucc.) Hand.-Mazz.的干燥成熟果實(shí)。牡荊子具有化濕祛痰、止咳平喘、理氣止痛的功效，現(xiàn)代藥理研究表明其具有緩解支氣管平滑肌、抗炎鎮(zhèn)痛、抗氧化、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌等作用。為了更好的開發(fā)和利用牡荊子藥用資源，本課題對牡荊子的化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)分離、鑒定，為進(jìn)一步闡明牡荊子的藥效活性成分奠定基礎(chǔ)。此外，

2、由于民間多將牡荊子與其原種黃荊Vitex negundo的果實(shí)黃荊子混用，本課題擬基于生藥學(xué)五大鑒別方法（基源、性狀、顯微、理化和分子鑒別）對兩者進(jìn)行生藥學(xué)比較研究，以期明確兩者之間的異同并為兩者能否同用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。因此，本課題主要開展以下兩方面研究工作：
　　一、牡荊子的化學(xué)成分研究
　　將牡荊子乙醇提取物與水混懸后依次經(jīng)不同極性溶劑萃取，分別得到石油醚部位、二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位。結(jié)合現(xiàn)代色譜分

3、離手段以及多種波譜和光譜技術(shù)，從牡荊子石油醚部位分離、鑒定化合物6個(gè)，從二氯甲烷部位分離、鑒定化合物19個(gè)，共分離鑒定化合物25個(gè)。其中，木脂素類化合物9個(gè)，二萜類化合物4個(gè)，三萜類化合物1個(gè)，甾體類化合物2個(gè)，黃酮類化合物6個(gè)，酚酸類化合物3個(gè)。其中有3個(gè)化合物（VCL-8,12,14）為首次從牡荊中分離得到，分別為4β-羥基泡桐素、Abietatriene-3β-ol與無羈萜。
　　二、牡荊子與黃荊子的生藥學(xué)比較研究
　

4、　牡荊為黃荊的變種，兩者原植物與果實(shí)都非常相似，藥用過程中容易混淆。本課題基于生藥學(xué)五大鑒別方法，對牡荊子和黃荊子進(jìn)行生藥學(xué)比較研究。植物基源鑒別中，兩者主要區(qū)別在于葉片鋸齒的有無，黃荊多為全緣，而牡荊葉片多具有淺裂鋸齒。果實(shí)性狀鑒別中，兩者基本一致，無明顯區(qū)別特征。果實(shí)粉末顯微鑒別中，兩者主要區(qū)別在于石細(xì)胞形態(tài)，牡荊子石細(xì)胞多為卵圓形或橢圓形，次生壁薄，胞腔呈橢圓形且大；黃荊子石細(xì)胞多為披針形或楔形，次生壁較厚，胞腔狹長。理化鑒別中，

5、采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)（LC-MS）分析牡荊子和黃荊子的化學(xué)成分，結(jié)合文獻(xiàn)檢索建立的牡荊屬化學(xué)成分?jǐn)?shù)據(jù)庫進(jìn)行匹配，從黃荊子中推測出115個(gè)化合物，牡荊子中推測出79個(gè)，其中69個(gè)化合物為兩者共有成分，可見兩者的化學(xué)成分非常相似。分子鑒別中，采用新鮮葉片提取DNA，通過ITS2通用引物進(jìn)行擴(kuò)增，測定ITS2序列，基于ITS2序列對黃荊和牡荊進(jìn)行鑒別。結(jié)果顯示，牡荊和黃荊的ITS2長度均為221bp，兩者共有6個(gè)差異位點(diǎn)（第26、36、160、1

6、63、171和173位），提示兩者的ITS2序列可作為鑒別牡荊和黃荊的依據(jù)。
　　綜上，本課題從牡荊子中共分離鑒定25個(gè)化合物，以木脂素類化合物為主要類型成分，其中3個(gè)化合物為牡荊中首次報(bào)導(dǎo)，進(jìn)一步豐富了牡荊的化學(xué)成分資料；通過牡荊子和黃荊子的生藥學(xué)比較研究，探索出粉末顯微鑒別和ITS2序列分子鑒別為兩者的有效鑒別方法，可為牡荊屬植物的鑒別提供一定參考；基于LC-MS的牡荊子與黃荊子化學(xué)成分比較分析表明兩者化學(xué)成分相似度較高，提示