pH響應(yīng)性聚合物囊泡載體用于抗壞血酸協(xié)同氧化-化療治療的研究.pdf

1、近年來(lái)，隨著生物腫瘤學(xué)的快速發(fā)展，響應(yīng)性聚合物載體由于其自身的許多優(yōu)勢(shì)因而被廣泛地應(yīng)用于抗腫瘤藥物運(yùn)輸平臺(tái)，并逐漸成為近十年來(lái)的研究熱點(diǎn)。同時(shí)，隨著材料化學(xué)和藥物運(yùn)輸近年來(lái)發(fā)展的影響，具有良好生物相容性并且能夠受特定的物理刺激、響應(yīng)于特定的刺激物、質(zhì)子化、水解裂解或者是分子構(gòu)象的變化的刺激響應(yīng)性聚合物的研究也已經(jīng)相當(dāng)?shù)南到y(tǒng)和深入。在本論文中，主要集中討論了兩親性聚合物自組裝形成的納米載體用于抗壞血酸（Vc）協(xié)同氧化-化療治療的研究。本論

2、文研究的主要內(nèi)容如下：
　?。?）首先，我們利用原子轉(zhuǎn)移自由基聚合合成了一種新穎的兩親性嵌段共聚物PEG-b-PEEMA，該聚合物的疏水嵌段具有酸響應(yīng)性，這種聚合物通過(guò)自組裝方法能夠形成聚合物囊泡。動(dòng)態(tài)光散射（DLS）和透射電子顯微鏡(TEM)觀察到了中空的囊泡的尺寸大小和形貌，大約在280 nm。DLS驗(yàn)證了該囊泡在pH7.4條件下能夠穩(wěn)定存在，然而在pH6.8條件下，由于疏水嵌段上的叔氨質(zhì)子化后，在電荷相互作用力下，囊泡膨脹后

3、解離。
　?。?）另外，我們還合成了一種具有過(guò)氧化氫響應(yīng)的單體CPTOEMA（化療藥物為喜樹(shù)堿 CPT，喜樹(shù)堿小分子和甲基丙烯酸羥乙酯小分子通過(guò)草酸酯鍵連接起來(lái)），該單體與寡聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯（OEGMA）無(wú)規(guī)共聚形成大分子聚前藥。DLS觀察到聚前藥通過(guò)自組裝可以形成10納米以下的粒子。然后，將形成納米粒子的聚前藥和抗壞血酸通過(guò)自組裝方法包裹在聚合物囊泡的親水空腔中。實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了抗壞血酸在含有10％血清的培養(yǎng)基中能夠產(chǎn)生過(guò)氧化

4、氫，這不僅增加了腫瘤細(xì)胞的氧化應(yīng)激壓力并且克服了腫瘤部位過(guò)氧化氫濃度低，而且增加了腫瘤部位的過(guò)氧化氫濃度以此來(lái)達(dá)到破壞聚前藥粒子中的草酸酯鍵從而釋放出自由喜樹(shù)堿（CPT）。
　?。?）通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)部活性氧族（ROS）實(shí)驗(yàn)，MTT法，細(xì)胞死/活實(shí)驗(yàn)和激光共聚焦顯微鏡（LSCM）觀察藥物在細(xì)胞內(nèi)分布情況，研究該體系在不同pH值、不同Vc濃度條件下的性質(zhì)和對(duì)HepG2細(xì)胞的損傷和藥物在細(xì)胞內(nèi)部的分布情況。結(jié)果表明：Vc能夠改變HepG

5、2細(xì)胞內(nèi)部ROS濃度；在一定條件下，低濃度的Vc能夠促進(jìn)HepG2細(xì)胞的生長(zhǎng)，然而濃度為1 mM Vc在含有10%血清的培養(yǎng)基中產(chǎn)生過(guò)量的H2O2，破化了細(xì)胞的某些蛋白質(zhì)巰基結(jié)構(gòu)和DNA，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡；LSCM結(jié)果表明了在Vc存在的條件下，pH6.8體系中胞內(nèi)CPT熒光最強(qiáng)，即CPT含量最高。因此，該載體在pH7.4環(huán)境下能夠穩(wěn)定存在，同時(shí)包載有Vc和聚前藥小粒子，在pH6.8環(huán)境中解離，Vc改變了胞內(nèi)ROS濃度，CPT為化療藥物，實(shí)驗(yàn)