鹽離子對(duì)Hela細(xì)胞“30nm”染色質(zhì)提取純化的影響及“30nm”纖維結(jié)構(gòu)初探.pdf

1、染色質(zhì)“30nm”纖維是遺傳信息發(fā)揮作用的重要處所，其結(jié)構(gòu)受到了廣泛的關(guān)注，自其概念提出至今已有30多年。在此期間，研究人員基于不同的實(shí)驗(yàn)材料和方法給出了染色質(zhì)纖維不同的結(jié)構(gòu)模型并引起了該領(lǐng)域的熱議。本實(shí)驗(yàn)選擇Hela細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料，以前人的實(shí)驗(yàn)方法作為基礎(chǔ)，綜合考慮Hela細(xì)胞自身的特點(diǎn)，對(duì)實(shí)驗(yàn)方法作出了改良和創(chuàng)新，使整個(gè)實(shí)驗(yàn)方案更加適用于本課題的研究。本實(shí)驗(yàn)從細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行染色質(zhì)“30”nm纖維的提取純化及電鏡觀察，力求對(duì)爭議的熱點(diǎn)進(jìn)

2、行初步的實(shí)驗(yàn)分析。根據(jù)研究內(nèi)容制定了實(shí)驗(yàn)思路:首先，利用最接近細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的緩沖液進(jìn)行染色質(zhì)纖維結(jié)構(gòu)的細(xì)胞內(nèi)提取及純化，然后進(jìn)行醋酸鈾負(fù)染、鎢絲噴金屬及快速冷凍等制樣方法制備電鏡樣品并進(jìn)行電鏡觀察，最后綜合生化實(shí)驗(yàn)結(jié)果及電鏡照片進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分析。通過實(shí)驗(yàn)，得到了以下初步的研究結(jié)論:1，含有1.5mMMgCl2，1mMCaCl2，75mMNaCl的細(xì)胞核裂解液有效地抑制了Hela細(xì)胞內(nèi)源性核酸酶對(duì)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的酶切;2，Hela細(xì)胞染色質(zhì)纖維結(jié)構(gòu)