一氯、二氯聯(lián)苯和1--羥甲基芘的代謝活化與遺傳毒性研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2 0 1 1 級(jí)碩士學(xué)位論文一氯、二氯聯(lián)苯和1 ．羥甲基芘的代謝活化與遺傳毒性研究S t u d i e s o nM e t a b o l i c A c t i v a t i o na n d G e n o t o x i c i t yo f M o n o —a n dD i c h l o r i n a t e d B i p h e n y l s a n d 1 - H y d r o x y m e

2、 t h y l p y r e n e課題來源：廣東省高等學(xué)校人才引進(jìn)專項(xiàng)基金( 粵財(cái)教2 0 1 0 ．1 4 3 )廣東省自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目( $ 2 0 1 2 0 1 0 0 0 8 9 2 2 )學(xué)位申請(qǐng)人導(dǎo) 師 姓 名專 業(yè) 名 稱培 養(yǎng) 類 型培 養(yǎng) 層 次所 在 學(xué) 院答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)委員賴演媚劉云崗教授衛(wèi)生毒理學(xué)學(xué)術(shù)型碩士研究生公共衛(wèi)生與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)院羅孝俊研究員胡大林教授蔡春青研究員吳赤篷副教授楊雪梅副教授

3、2 0 1 4 年5 月2 0 日 廣州摘要1 一羥甲基芘( 1 ．m 仰) 是羥甲基多環(huán)芳烴衍生而來的一種芳醇，也是肝致癌物1 ．甲基芘( 1 - M P ) 的主要代謝產(chǎn)物。1 - H M P 在硫酸基轉(zhuǎn)移酶( S 切．一T ) 的作用下可進(jìn)一步代謝為具有親電子活性的代謝物，后者已于最近在小鼠體內(nèi)試驗(yàn)中證實(shí)為1 一磺基甲基芘( 1 ．S M P ) 。然而，1 - H M P 的誘變性迄今未有報(bào)道。目的人類生物轉(zhuǎn)化酶C Y P 2

4、E 1 是苯及其羥化產(chǎn)物的活化酶，而多氯聯(lián)苯的化學(xué)結(jié)構(gòu)與苯的羥化代謝物有一定相似度。本研究第一部分?jǐn)M驗(yàn)證人C Y P 2 E 1 活化一氯和二氯聯(lián)苯化合物的可能性，以了解其相關(guān)的遺傳毒性；第二部分則探討人S U L T l A l 代謝活化條件下1 - H M P 的遺傳毒作用。方法1 ：通過M T T 法觀察用一定濃度的受試物P C B s 或1 - H M P 處理1 2 h ，并繼續(xù)培養(yǎng)1 2 h 后，中國大鼠肺( V 7 9 )

5、 細(xì)胞和重組表達(dá)人C Y P 2 E 1 和人S U L T l A l 的V 7 9 細(xì)胞( V 7 9 ．h C Y P 2 E 1 ．h S U L T l A l ) 的生長情況，以反映其代謝相關(guān)的細(xì)胞毒性。2 ：用體外微核試驗(yàn)觀察一定濃度的受試物P C B s ( 包括2 ．單氯聯(lián)苯、3 ．單氯聯(lián)苯、4 ．單氯聯(lián)苯、2 ，2 ’．二氯聯(lián)苯、2 ，3 ．二氯聯(lián)苯、2 ，4 ．二氯聯(lián)苯、2 , 4 ’．二氯聯(lián)苯、2 ，5 ．二氯聯(lián)

6、苯、2 , 6 ．二氯聯(lián)苯、3 ，3 ’．二氯聯(lián)苯、3 ，4 ．二氯聯(lián)苯、3 ，5 ．二氯聯(lián)苯、4 , 4 ’．二氯聯(lián)苯) 和1 - H M P 對(duì)上述細(xì)胞染毒1 2 h 、繼續(xù)培養(yǎng)1 2 h 后，微核細(xì)胞率的變化，以反映受試物經(jīng)代謝活化后誘導(dǎo)真核細(xì)胞染色體畸變的作用。3 ：用H p r t 位點(diǎn)正向突變?cè)囼?yàn)觀察用各個(gè)P C B 化合物和1 - H M P 誘發(fā)V 7 9 ．h C Y P 2 E 1 ．h S U L T l A l

7、細(xì)胞的基因突變情況( 與對(duì)V 7 9 細(xì)胞作用的結(jié)果相比較) ，以反映各受試物代謝相關(guān)的致突變性。4 ：在上述實(shí)驗(yàn)條件下，以1 ．氨基苯三唑( 1 - a m i n o b e n z o t d a z o l e ，A B T ，C Y P 2 E 1抑制劑) 和五氯酚( p e n t a c h l o r o p h e n o l ，P C P , S U L T l A l 抑制劑) 分別與各受試物聯(lián)合處理受試細(xì)胞，以觀