雙酚A遺傳毒性研究.pdf

1、目的：雙酚A（bisphenol A, BPA），是一種廣泛使用的化工原料，添加BPA可使塑料制品具有輕巧耐用、無(wú)色透明以及加強(qiáng)抗沖擊性等特點(diǎn)，并有效防止水果和蔬菜從內(nèi)部侵蝕金屬容器，所以BPA成為制造聚碳酸酯、環(huán)氧樹(shù)脂、食品包裝、牙科填充劑、食品罐頭涂料和醫(yī)療器械等產(chǎn)品的重要原料。BPA具有毒作用劑量小、潛伏時(shí)間長(zhǎng)等特點(diǎn)，對(duì)健康造成多種潛在危害，國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者對(duì)BPA的毒性作用進(jìn)行了研究報(bào)道。目前對(duì)BPA的毒性研究多集中在內(nèi)分泌系統(tǒng)、

2、生殖系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等方面，其遺傳毒性還有待進(jìn)一步研究。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體外染毒檢測(cè)BPA對(duì)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（CHO細(xì)胞）的細(xì)胞存活率、DNA的直接損傷作用、微核率以及染色體畸變率，并通過(guò)Ames試驗(yàn)檢測(cè)BPA的致突變性，通過(guò)將上述檢測(cè)不同遺傳學(xué)終點(diǎn)的試驗(yàn)相結(jié)合探討B(tài)PA的遺傳毒性。
　　方法：(1)以倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（CHO細(xì)胞）作為實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，選用四甲基偶氮唑鹽法（即MTT比色法）檢測(cè)不同濃度雙酚A對(duì)CHO細(xì)胞作用不同時(shí)間后，對(duì)細(xì)胞存活率的

3、影響；（2）采用單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn)（即SCGE彗星試驗(yàn)），了解不同濃度及不同作用時(shí)間下雙酚A對(duì)CHO細(xì)胞DNA單鏈斷裂的損傷程度；（3）采用微核試驗(yàn)研究不同濃度雙酚A對(duì)CHO細(xì)胞微核率的影響；（4）采用染色體畸變分析檢測(cè)不同濃度雙酚A對(duì)CHO細(xì)胞染色體畸變率及誘導(dǎo)的主要畸變類(lèi)型；（5）通過(guò)Ames試驗(yàn)了解不同濃度雙酚A的致突變效應(yīng)。
　　結(jié)果：（1）MTT試驗(yàn)結(jié)果顯示，分別經(jīng)12h及24h染毒處理后，當(dāng)雙酚A終濃度為40μmol/

4、L時(shí)，CHO細(xì)胞的存活率顯著高于陰性對(duì)照組。當(dāng)濃度高于80μmol/L時(shí)，細(xì)胞存活率呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，各染毒組吸光度值與陰性對(duì)照組相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。（2）單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，經(jīng)12h及24h處理后，雙酚A濃度高于80μmol/L時(shí)，可引起CHO細(xì)胞的拖尾率、尾部DNA百分含量及尾長(zhǎng)增加。（3）微核試驗(yàn)和染色體畸變?cè)囼?yàn)表明，在雙酚A處理24h后，當(dāng)濃度高于100μmol/L時(shí)， CHO細(xì)胞的微核率和染色體畸變率顯著增加。其中染色體

5、畸變的類(lèi)型以斷裂、無(wú)著絲粒斷片和裂隙為主。（4）Ames試驗(yàn)檢測(cè)的BPA染毒濃度為10μg/皿～5mg/皿共九個(gè)劑量組，其結(jié)果為陰性。在活化和非活化條件下，與陰性對(duì)照組比較，可見(jiàn)部分菌株的回變菌落數(shù)有所增加，但并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論:（1）外培養(yǎng)條件下，雙酚A在染毒濃度為40μmol/L作用12h后，可顯著刺激細(xì)胞的生長(zhǎng)，表現(xiàn)出一定的刺激效應(yīng)。從80μmol/L開(kāi)始，染毒12h對(duì)CHO細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用，表現(xiàn)出細(xì)胞毒性