喹諾酮類抗菌藥吉米沙星的PK-PD及新型抗結(jié)核藥物的ADME-T早期研究.pdf

1、感染性疾病是威脅人類生命健康和社會(huì)穩(wěn)定的重大疾病，耐藥菌感染已經(jīng)成為臨床抗感染治療的嚴(yán)重問(wèn)題，細(xì)菌耐藥是抗感染藥物研發(fā)面臨的最大科學(xué)挑戰(zhàn)。臨床常見(jiàn)的耐藥菌主要包括耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)、耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)、耐青霉素肺炎鏈球菌(PRSP)、耐萬(wàn)古霉素腸球菌（VRE）、多重耐藥銅綠假單胞菌(MDR-PA)、泛耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌(PDR-AB)等。其中，MRSA感染發(fā)病率高、死亡率高，已成為院內(nèi)感染的重要致病菌之一

2、，與乙型肝炎、艾滋病并稱為世界三大最難解決的感染性疾病。
　　抗生素的不合理使用和濫用是導(dǎo)致細(xì)菌耐藥問(wèn)題日益嚴(yán)重的重要因素，抗生素的作用靶位不是機(jī)體，而是機(jī)體內(nèi)外來(lái)的病原菌，藥效主要反映的是藥物對(duì)病原菌的殺滅或抑制作用，療效取決于抗生素、細(xì)菌和機(jī)體三者相互作用的結(jié)果?？股厮幋鷦?dòng)力學(xué)/藥效學(xué)(PK/PD)研究可明確闡明藥物進(jìn)入機(jī)體后在感染病灶內(nèi)達(dá)到的殺菌或抑菌效果的動(dòng)態(tài)過(guò)程，闡明其殺菌模式，確定描述治療效果的最佳PK/PD參數(shù)和達(dá)

3、到療效的相應(yīng)PK/PD靶值，準(zhǔn)確地用于預(yù)測(cè)藥物在人體內(nèi)的殺菌或抑菌效果，有助于制定有效合理的抗菌治療方案，為臨床研究提供重要理論依據(jù)。美國(guó)FDA和中國(guó)CFDA明確提出在藥物批準(zhǔn)用于新適應(yīng)癥前需要提供PK/PD模型和靶組織藥物濃度。
　　吉米沙星為新一代喹諾酮類抗菌藥，抗菌譜廣，抗菌活性強(qiáng)，尤其是對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌的活性顯著優(yōu)于其他喹諾酮類。本文旨在研究注射用甲磺酸吉米沙星的體內(nèi)、外藥效學(xué)，并基于微透析采樣技術(shù)(MD)和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)

4、譜(LC-MS/MS)技術(shù)測(cè)定吉米沙星在大鼠感染模型中的血漿藥物濃度、腿部藥物濃度及PK參數(shù)，分析吉米沙星PK/PD特點(diǎn)。
　　藥效學(xué)研究結(jié)果表明，吉米沙星具有廣譜抗菌活性，對(duì)多數(shù)受試革蘭陽(yáng)性菌和革蘭陰性菌具有較強(qiáng)的抗菌作用，對(duì)革蘭陽(yáng)性菌的體外抗菌活性大多優(yōu)于莫西沙星、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、克拉霉素、頭孢呋辛、氨芐西林和美羅培南，對(duì)革蘭陰性菌的體外抗菌活性大多與莫西沙星和左氧氟沙星相近或稍強(qiáng)，弱于環(huán)丙沙星、美羅培南，明顯優(yōu)于克拉霉

5、素、頭孢呋辛和氨芐西林。吉米沙星對(duì)金葡菌、肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯桿菌感染小鼠均有較好體內(nèi)抗菌活性，對(duì)革蘭陽(yáng)性菌中金葡菌、肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌感染小鼠的體內(nèi)療效明顯優(yōu)于莫西沙星、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星，對(duì)革蘭陰性菌中大腸埃希菌、肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的體內(nèi)療效，總體上優(yōu)于莫西沙星，與左氧氟沙星、環(huán)丙沙星相近。
　　感染大鼠PK研究結(jié)果表明，吉米沙星透析液的定量分析方法和微透析采樣方法經(jīng)方法學(xué)確證，可用于吉米沙

6、星的PK研究。測(cè)定了大鼠感染模型中單劑量尾靜脈分別給予9 mg/kg、18 mg/kg和72 mg/kg吉米沙星后的游離血藥濃度和腿部肌肉組織游離藥物濃度，并對(duì)PK參數(shù)進(jìn)行了評(píng)價(jià)，3個(gè)劑量的血漿AUC0-24h分別為3090.96±979.81、7939.30±2157.81和32930±12880.48 h*ng/mL，Cmax分別為1583.37±573.78、4866.83±738.09和13966.68±3883.80 ng/m

7、L，T1/2分別為2.15±0.74、2.40±0.41和2.61±0.95 h;腿部AUC0-24h分別為1402.82±877.71、5005.21±3115.87和27588.99±12750.61 h*ng/mL，Cmax分別為462.77±353.47、1905.66±978.54和6046.72±2635.94 ng/mL，T1/2分別為2.25±0.67、2.79±0.47和3.78±1.80 h。
　　大鼠腿部感染

8、PK/PD研究結(jié)果表明，成功建立了MRSA感染大鼠模型，在分別單劑量尾靜脈給予吉米沙星9mg/kg、18mg/kg和72mg/kg后，血漿fAUC0-24h/MIC分別為98.91、254.06和1053.76 h*ng/mL，fCmax/MIC分別為50.67、155.74和446.93 ng/mL，f％T＞ MIC分別為0.44、0.50和1;腿部fAUC0-24h/MIC分別為44.89、160.17和882.85 h*ng/mL

9、，fCmax/MIC分別為14.80、60.98和193.50 ng/mL，f％T＞MIC分別為0.36、0.58和0.77。對(duì)PK/PD參數(shù)fAUC0-24h/MIC、fCmax/MIC和fT＞MIC與藥效學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示PK/PD參數(shù)fAUC0-24h/MIC和藥效指標(biāo)相關(guān)性最好(r2=0.9939)，提示吉米沙星為濃度依賴型殺菌模式。根據(jù)數(shù)據(jù)分析結(jié)果，給藥后24h時(shí)腿部菌落計(jì)數(shù)與對(duì)照組相比降低3個(gè)Log值時(shí)，推測(cè)

10、血漿的fAUC0-24h/MIC和fCmax/MIC的靶值分別為215.83和130.55，腿部肌肉組織的fAUC0-24h/MIC靶值為128.44。
　　綜上所述，吉米沙星具有廣譜抗菌活性，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌活性大多優(yōu)于對(duì)照藥;利用微透析采樣技術(shù)和LC-MS/MS分析方法測(cè)定了大鼠血漿和腿部藥物濃度，實(shí)現(xiàn)了同時(shí)獲取同一個(gè)體血漿和組織藥物動(dòng)態(tài)變化的信息，并對(duì)其PK特征進(jìn)行了評(píng)價(jià);對(duì)感染大鼠的PK/PD研究結(jié)果顯示吉米沙星為濃度依賴型

11、殺菌模式，給藥后24h時(shí)腿部菌落計(jì)數(shù)與對(duì)照組相比降低3個(gè)Log值時(shí)，推測(cè)血漿的fAUC0-24h/MIC和fCmax/MIC的靶值分別為215.83和130.55，腿部肌肉組織的fAUC0-24h/MIC靶值為128.44。以上數(shù)據(jù)為臨床使用吉米沙星提供了理論依據(jù)。
　　結(jié)核病是嚴(yán)重危害人類健康的呼吸道傳染疾病，屬于我國(guó)法定的重大傳染病。世界衛(wèi)生組織估計(jì)，目前我國(guó)結(jié)核病年發(fā)病人數(shù)位居全球第二位。自世紀(jì)八十年代，耐藥結(jié)核病發(fā)病率不斷

12、上升，結(jié)核病與HIV/AIDS并發(fā)導(dǎo)致的結(jié)核疫情也再度上升，結(jié)核病成為全球重大公共衛(wèi)生問(wèn)題和社會(huì)問(wèn)題。但是，近40余年來(lái)幾乎沒(méi)有新作用機(jī)制的抗TB藥物問(wèn)世。
　　A2和A6是我所研發(fā)的新型抗結(jié)核化合物，具有良好的發(fā)展前景。本文目的是研究A2和A6在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，并對(duì)其毒性進(jìn)行初步評(píng)價(jià)。
　　首先，本文建立并確證了A2和A6生物樣本的定量分析方法，方法確證結(jié)果顯示，該方法的回收率穩(wěn)定，線性、精密度、準(zhǔn)確度均達(dá)到了有關(guān)技

13、術(shù)規(guī)范的要求。
　　然后，研究了大鼠經(jīng)灌胃分別給予單劑量25mg/kg的A2和A6后的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，A2和A6半衰期較短，分別為0.43±0.09 h和1.120±0.38 h;AUC0-24h分別為452.65±254.34和214.46±89.20。A2和A6在給藥6小時(shí)以后血藥濃度已低于LLOQ。
　　毒性研究實(shí)驗(yàn)顯示，靜脈給予A2和A6后，在100mg/kg劑量下，小鼠無(wú)明顯毒副反應(yīng)，也未有死亡情況發(fā)生，在此劑量以下這