太白銀蓮花地上部分活性成分的研究.pdf

1、太白銀蓮花(Anemone taipaiensis)是陜西省特有的銀蓮花屬植物，本課題組已經(jīng)對其根莖進(jìn)行了詳細(xì)的化學(xué)和藥理活性研究，結(jié)果表明從其中分離得到的皂苷類成分具有明確的抗腫瘤活性。因?qū)μ足y蓮花地上部分尚未見研究報道，本課題對其地上部分首次開展了化學(xué)和抗腫瘤活性研究。
　　首次對太白銀蓮花地上部分70％乙醇提取物的正丁醇萃取部分進(jìn)行分離，經(jīng)正相硅膠、Sephadex LH-20、反相硅膠柱(RP-C18)、高效制備液相等多

2、種色譜方法，從中分離得到27個單體化合物，并且通過化學(xué)和波譜學(xué)方法鑒定了它們的結(jié)構(gòu)(1～27)，除化合物2和7外，其余25個均為齊墩果烷型三萜皂苷類化合物。分別為:3β-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸苷(1)，β-胡蘿卜苷(2)，3β-O-β-D-吡喃木糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸苷(3)，hederasaponin B(4)，3β-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠

3、李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-常春藤皂苷(5)，3β-O-β-D-吡喃木糖-(1→3)-α-L吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)，鄰苯二甲酸二丁酯(7)，3β-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸苷(8)，白頭翁皂苷D(9)，3β-O-β-D-吡喃葡萄糖-常春藤皂苷元-28

4、-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)，cemusoide C(11)，medicago-saponin P(12)，3β-O-β-D-吡喃木糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-（1→2）-[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L吡喃阿拉伯糖-常春藤皂苷(13)，kizutasaponin K12(14)，hederacholichiside F(15)，sieboldnos

5、ide B(16)，紅毛七皂苷D(17)，leontoside(18)，3β-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)]-β-D-吡喃葡萄糖-絲石竹皂苷元-28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(19)，sieboldnoside A(20)，刺楸皂苷B(21)，hederacholichiside E(22)，3β-O-β-D-吡喃木糖-(1→3)-

6、α-L-吡喃鼠李糖-（1→2）-[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂菅元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(23)，3β-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖-（1→4）]-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄

7、糖-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(24)，3β-O-β-D-吡喃木糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1-→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(25)，3β-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-[α-L-

8、吡喃鼠李糖-(1→2)]-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1-→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(26)，3-β-O-β-D-吡喃木糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃鼠李糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(27)。化合物5、10和19為

9、3個新化合物，化合物12首次從該屬植物中得到，化合物4，7和14從該植物中首次分離得到，所有化合物均為首次從該植物的地上部分得到。
　　體外腫瘤細(xì)胞毒活性篩選表明:化合物3，8，9和13對HL-60白血病細(xì)胞和Hep-G2肝癌細(xì)胞具有較強的細(xì)胞毒性，其中化合物8對HL-60細(xì)胞和Hep-G2細(xì)胞顯示顯著的活性，IC50分別是1.38和2.82μM?；衔?顯示了中等活性強度，化合物6對HL-60細(xì)胞亦有中等活性強度?；衔?和13

10、對人膠質(zhì)瘤U-251MG細(xì)胞具有顯著的細(xì)胞毒性，也以化合物8的活性最強，IC50(72 h)為1.38μM。根據(jù)這些皂苷活性與結(jié)構(gòu)間關(guān)系的推導(dǎo)再次確認(rèn)了齊墩果烷型三萜皂苷抗腫瘤的構(gòu)效關(guān)系，即:苷元C-28位為游離羧基的單糖鏈皂苷一般具有腫瘤細(xì)胞毒性，苷元C-3位糖鏈具有Rha(1→2)Ara-片段者活性較強，齊墩果酸皂苷比常春藤皂苷的活性更強。無游離羧基的皂苷19也顯示弱活性，推測可能因其苷元23位醛基的影響。
　　課題創(chuàng)新性及研

11、究意義:
　　1.首次對太白銀蓮花的地上部分的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究，分離鑒定了27個化合物，包括25個三萜皂苷類化合物、1個甾體苷和1個芳酸酯，基本摸清了地上部分的皂苷類成分。
　　2.化學(xué)新穎性:發(fā)現(xiàn)了3個新化合物，其中新化合物19的苷元gypsogenin（絲石竹皂苷元）為首次從該植物中發(fā)現(xiàn)，新化合物5、10和19的苷元3位內(nèi)側(cè)糖為六碳糖，這一結(jié)構(gòu)特征在本植物皂苷中首次被發(fā)現(xiàn);化合物12為從該屬植物中發(fā)現(xiàn)的第一個以ca

12、ulophyllogenin（葳嚴(yán)仙皂苷元）為苷元的皂苷;3個化合物(4、7和14)首次從該植物中得到;所有化合物均為首次從該植物的地上部分得到。
　　3.通過體外抗腫瘤活性篩選，發(fā)現(xiàn)一批具有顯著抗腫瘤活性的皂苷成分，包括抗膠質(zhì)瘤成分，表明本植物地上部分所含皂苷類成分與根莖一樣，具有通過間質(zhì)化療途徑給藥應(yīng)用于膠質(zhì)瘤治療的開發(fā)前景。
　　4.探討并驗證了齊墩果烷型三萜皂苷抗腫瘤的構(gòu)效關(guān)系。
　　5.本課題表明太白銀蓮花的