五種苔蘚植物的組織培養(yǎng).pdf

1、華東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文五種苔蘚植物的組織培養(yǎng)姓名：于傳梅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：朱瑞良20070501摘要摘要苔蘚植物組織培養(yǎng)起步很早，但發(fā)展相對(duì)比較緩慢，隨著苔蘚植物分子生物學(xué)、生物化學(xué)、生理學(xué)、分類學(xué)以及生態(tài)學(xué)等研究領(lǐng)域的擴(kuò)大，人們需要大量的苔蘚植物材料，然而野生的材料遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足需求，組織培養(yǎng)技術(shù)卻能夠在較短時(shí)間內(nèi)提供大量的純樣品。本項(xiàng)工作針對(duì)五種具有代表性的苔蘚植物進(jìn)行組織培養(yǎng)，展開一些基礎(chǔ)研究。從材料的消毒，

2、獲得無(wú)菌的外植體入手，主要在孢子萌發(fā)、原絲體發(fā)育類型、原絲體分化等方面開展工作，以達(dá)到保種、擴(kuò)大培養(yǎng)目的，滿足進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究和開發(fā)利用的需要；通過光學(xué)顯微鏡和數(shù)碼拍照，記錄了進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)的孢子萌發(fā)和原絲體發(fā)育的全過程，以及部分苔類植物油體的發(fā)育過程，為苔類植物系統(tǒng)分類學(xué)積累資料。本項(xiàng)研究取得的成果如下：1利用MS培養(yǎng)基(不加維生素和氨基酸，分別添加1％的蔗糖和瓊脂，pH=62)培養(yǎng)膨葉唇鱗苔(Cheilolejeuneaventrico

3、sa)孢子和溪苔(Pelliaepiphylla)葉狀體。兩種材料用01％的次氯酸鈉消毒5秒鐘效果最佳。膨葉唇鱗苔孢子萌發(fā)和原絲體發(fā)育類型屬于典型的細(xì)鱗苔型(Lejeunea4ype)，培養(yǎng)生成的幼小葉片中，油體和野生植物的油體形態(tài)上有差異，無(wú)菌培養(yǎng)獲得的油體聚合度沒有野生的高。55天時(shí)間就可以得到膨葉唇鱗苔的完整植株。溪苔葉狀體在MS培養(yǎng)基上直接生長(zhǎng)植物體，經(jīng)過24D和6BA處理也沒有出現(xiàn)愈傷組織，兩個(gè)月之后在MS培養(yǎng)基上出現(xiàn)生長(zhǎng)停滯

4、，所用的MS培養(yǎng)基不是溪苔生長(zhǎng)的最適培養(yǎng)基。2選用MS和1／2MS培養(yǎng)基(不加維生素和氨基酸，分別添加1％的蔗糖和瓊脂，pH=62)、Knop培養(yǎng)基(分別添加1％的蔗糖和瓊脂，pH=62)、Beneck培養(yǎng)基(分別添加1％的蔗糖和瓊脂，pH=62)培養(yǎng)短月蘚(Brachymeniumnepalense)孢子。材料用1％的次氯酸鈉消毒4分鐘效果最佳。發(fā)現(xiàn)相對(duì)簡(jiǎn)單的Knop和Beneck培養(yǎng)基促進(jìn)短月蘚孢予萌發(fā)，并能夠在50天左右生長(zhǎng)出莖葉