兩種鐵線蓮植物組織培養(yǎng)的初步研究.pdf

1、東北鐵線蓮(Clematis mandshurica)和褐毛鐵線蓮（Clematis fusca）均是東北重要的野生鐵線蓮屬植物，自身具有一定的觀賞特性及藥用價(jià)值，但目前對這兩種鐵線蓮植物的研究較少，故通過科學(xué)有效的方法對兩種野生鐵線蓮植物的種質(zhì)資源進(jìn)行保存將十分重要。本研究以當(dāng)年生帶芽莖段、不帶芽莖段以及葉片為外植體，初步研究了兩種鐵線蓮的組織培養(yǎng)過程，以期為野生鐵線蓮的快速繁殖推廣提供基礎(chǔ)資料。研究結(jié)果如下:
　　1.兩種鐵線

2、蓮帶芽莖段誘導(dǎo)叢生芽的組織培養(yǎng)
　　(1)無菌體系的建立:外植體選用兩種野生鐵線蓮帶芽莖段，用0.1％升汞消毒時(shí)，效果好。
　　(2)取材季節(jié):外植體取材的最佳季節(jié)是春季，外植體的萌發(fā)率最高，且其污染率較低。
　　(3)腋芽誘導(dǎo)萌發(fā)培養(yǎng):褐毛鐵線蓮在MS+6-BA1.0 mg·L-l+NAA0.05 mg·L-1中萌發(fā)率最高，為93.33％。東北鐵線蓮在MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.01 mg·L-1時(shí)

3、萌發(fā)率最高，為86.67％。
　　(4)萌發(fā)芽的繼代增殖培養(yǎng):褐毛鐵線蓮芽繼代增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.05 mg·L-1+KT1.0 mg·L-1，增殖系數(shù)為2.63。東北鐵線蓮芽基帶增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1，增殖系數(shù)為3.94。
　　(5)壯苗及生根培養(yǎng):通過本試驗(yàn)，不添加任何激素的MS和1/2MS基本培養(yǎng)基均未能達(dá)到兩種野生鐵

4、線蓮叢生芽壯苗的效果，且未能找到適合兩種鐵線蓮的生根培養(yǎng)基。
　　2.兩種鐵線蓮莖段和葉片愈傷組織誘導(dǎo)的初步研究
　　(1)無菌體系的建立:外植體選用兩種野生鐵線蓮的不帶芽莖段及葉片，兩種鐵線蓮不帶芽莖段用0.1％升汞消毒5min時(shí)，效果好;葉片用0.1％升汞消毒3min時(shí)，效果好。
　　(2)不同激素組合對愈傷組織誘導(dǎo)的影響:褐毛鐵線蓮不帶芽莖段的愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0

5、.5 mg·L-1，誘導(dǎo)率為96.42％。東北鐵線蓮不帶芽莖段的愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1，誘導(dǎo)率為80.77％。
　　(3)不同激素組合對愈傷組織增殖分化的影響:褐毛鐵線蓮莖間愈傷組織增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1，增殖率為52.17％;愈傷組織分化的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.05 mg

6、·L-1。東北鐵線蓮莖間愈傷組織增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.02 mg·L-1，增殖率為60.87％;愈傷組織分化的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.02 mg·L-1。
　　(4)不同含量的活性炭(AC)以及繼代周期對愈傷組織褐化的影響:兩種鐵線蓮的活性碳的濃度在2.0g·L-1，繼代時(shí)間為20天時(shí)，愈傷組織的褐化率最低。
　　(5)光照對葉片愈傷組織誘導(dǎo)的影響: