兩種鐵線蓮植物組織培養(yǎng)的初步研究.pdf

1、東北鐵線蓮(Clematis mandshurica)和褐毛鐵線蓮（Clematis fusca）均是東北重要的野生鐵線蓮屬植物，自身具有一定的觀賞特性及藥用價值，但目前對這兩種鐵線蓮植物的研究較少，故通過科學有效的方法對兩種野生鐵線蓮植物的種質資源進行保存將十分重要。本研究以當年生帶芽莖段、不帶芽莖段以及葉片為外植體，初步研究了兩種鐵線蓮的組織培養(yǎng)過程，以期為野生鐵線蓮的快速繁殖推廣提供基礎資料。研究結果如下:
　　1.兩種鐵線

2、蓮帶芽莖段誘導叢生芽的組織培養(yǎng)
　　(1)無菌體系的建立:外植體選用兩種野生鐵線蓮帶芽莖段，用0.1％升汞消毒時，效果好。
　　(2)取材季節(jié):外植體取材的最佳季節(jié)是春季，外植體的萌發(fā)率最高，且其污染率較低。
　　(3)腋芽誘導萌發(fā)培養(yǎng):褐毛鐵線蓮在MS+6-BA1.0 mg·L-l+NAA0.05 mg·L-1中萌發(fā)率最高，為93.33％。東北鐵線蓮在MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.01 mg·L-1時

3、萌發(fā)率最高，為86.67％。
　　(4)萌發(fā)芽的繼代增殖培養(yǎng):褐毛鐵線蓮芽繼代增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.05 mg·L-1+KT1.0 mg·L-1，增殖系數(shù)為2.63。東北鐵線蓮芽基帶增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1，增殖系數(shù)為3.94。
　　(5)壯苗及生根培養(yǎng):通過本試驗，不添加任何激素的MS和1/2MS基本培養(yǎng)基均未能達到兩種野生鐵

4、線蓮叢生芽壯苗的效果，且未能找到適合兩種鐵線蓮的生根培養(yǎng)基。
　　2.兩種鐵線蓮莖段和葉片愈傷組織誘導的初步研究
　　(1)無菌體系的建立:外植體選用兩種野生鐵線蓮的不帶芽莖段及葉片，兩種鐵線蓮不帶芽莖段用0.1％升汞消毒5min時，效果好;葉片用0.1％升汞消毒3min時，效果好。
　　(2)不同激素組合對愈傷組織誘導的影響:褐毛鐵線蓮不帶芽莖段的愈傷組織誘導的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0

5、.5 mg·L-1，誘導率為96.42％。東北鐵線蓮不帶芽莖段的愈傷組織誘導的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1，誘導率為80.77％。
　　(3)不同激素組合對愈傷組織增殖分化的影響:褐毛鐵線蓮莖間愈傷組織增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1，增殖率為52.17％;愈傷組織分化的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.05 mg

6、·L-1。東北鐵線蓮莖間愈傷組織增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.02 mg·L-1，增殖率為60.87％;愈傷組織分化的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.02 mg·L-1。
　　(4)不同含量的活性炭(AC)以及繼代周期對愈傷組織褐化的影響:兩種鐵線蓮的活性碳的濃度在2.0g·L-1，繼代時間為20天時，愈傷組織的褐化率最低。
　　(5)光照對葉片愈傷組織誘導的影響: